Способ диагностики атеросклероза

 

Изобретение относится к медицине . Цель изобретения - повышение точности способа за счет диагностирования в период регрессии атеросклероза. В пробе крови определяют содержание холестерина и липидов. Липиды экстрагируют из тромбоцитов и эритроцитов. Остаток растворяют в хлороформе и наносят капилляром старт хроматографических пластин. В смеси растворителей проводят разделение фракций. Затем пластинки проявляют и высушивают . Определяют фракции липидов. Пластинки денсйтометрируются. После этого вычисляют содержание холестерина . При увеличении этого показателя относительно нормы диагностируют атеросклероз.-1 табл. S tSP sj а CD

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (so 4 С 01 И 33/92

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3804945/28-14 (22) 23.10.84 (46) 15.12.86. Бюл. Р 46 (71) Белорусский государственный институт усовершенствования врачей (72) А,Г.Мрочек, Т.Д.Тябут, Т.А.Алюшина и Л.Б.Коростелева (53) 616.07(088.8) (56) Мясников А.Л. Гипертоническая болезнь и атерослероз. M.: Медицина, 1965, с.616. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТЕРОСКЛЕРО3А (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения — повышение точÄÄSUÄÄ 1276991 А 1 ности способа за счет диагностирования в период регрессии атеросклероза.

В пробе крови определяют содержание холестерина и липидов. Липиды экстрагируют иэ тромбоцитов и эритроцитов.

Остаток растворяют в хлороформе и наносят капилляром "старт" хроматогра- фических пластин. В смеси растворителей проводят разделение фракций.

Затеи пластинки проявляют и высушивают. Определяют фракции липидов.

Пластинки денситометрируются. После этого вычисляют содержание холестерина. При увеличении этого показателя относительно нормы диагностируют атеросклероз. I табл.

1276991

Фракции

На старте

0„11 + 0,007

Фосфолипиды

Холестерин

Свободные жирные кислоты

0,26 + 0,01

0,45 + 0,02

Триглицериды

Эфиры холестерина

0,72 + 0,01

Пластинки денситометрируются с последующим вычислением процентного содержания по формуле:

30 показатель денситометра.пятна ХС х 100

% содержание ХС— интегральный показатель денситометра вс.ех фракций липидов.

И при увеличении этого показателя 35 получают плазму, обогащенную тромбоотносительно нормы диагностируют ате- цитами. Для этого берут утром наторосклероз. щак у больного из локтевой вены в

Hp и м е р 1. Больной Василь- силиконированную посуду 5 мл крови ев Н.B., 45 лет, поступил с клиничес- с 3,8%-ным цитратом натрия в соотким диагнозом: ИБС, стенокардия на- 40 ношении. 9:1. Цитра,.ную кровь центри::ряжения, атеросклероз аорты, коро- фугируют при 1000 об/мин в течение нарных артерий. 10 мин или отстаивают в течение одного часа при комнатной температуре.

Для диагностики заболевания были Полученная плазма содержит 300 использованы два способы. Содержание 400 тыс. тромбоцитов в 1 мм . Под45 Ъ общего ХС общепринятым способом АЬе // счет тромбоцитов проводят под микропоказал, что содержание ХС в плазме скопом с применением фазового конткрови составляет 170 мг/дл. Получен- растного устройства. 2 мл плазмы, ный показатель ниже среднего уровня обогащенной тромбоцитами, центрифу— нормы, следовательно, он не выявляет 50 гируют при 3000 об/мин в течение у данного больного признаков атеро- 15 мин. Полученный тромбоцитарный склероза, хотя диагноз ИБС и атеро- осадок трижды отмывают раствором, склеро тическо го поражения сосудов содержащим 0,279 r ЭДА (этилендиаминбыл поставлен врачами клиницистами тетраацетат), 0,21 r Tris, 0,186 г на основании инструментальных и дру- КС1 на 500 мл дистиллированной вогих методов исследования. ды. Отмывание производят в процессе

Поэтому определяют относительное центрифугирования при 300 об/мин в содержание ХС в тромбоцитах, Вначале течение 15 мин;

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для диагностики атеросклероза.

Цель изобретения — повышение точности способа за счет диагностирования в период регрессии атеросклероза.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного производят забор крови, в пробе которой определяют содержание холестерина (ХС) и липидов. Липиды экстрагируют из тромбоцитов и эритроцитов 20 объемами смеси хлороформметанол 2:1. Разделяют на 2 фазы добавлением 0,5 мл подкисленной воды и центрифугированием в течение 10 мин при 1500 об/мин. Нижнюю фазу, содержащую липиды, отбирают и выпаривают в токе азота при 37 С. Остаток растворяют в 100 мкл хлороформа и наносят капилляром "старт" хроматографических пластин. Разделение фракций проводят на пластинах Silufol (ЧССР) в смеси растворителей: петролейный эфир, диэтиловый эфир„ ледяная уксусная кислота — 30:10:0„2.Проявляют пластинки 2%-ным спиртовым раствором фосфорномолибденовой кислоты и высушивают при 100 С в течение 5 мин.

Определяют следующие фракции липидов: фосфолипиды, ХС, свободные

5 жирные кислоты, триглицериды, эфиры холестерина со следующими значениями

Rf.

В таблице приведены значения Rf полученных липидных фракций.

1276991

Составитель Н.Валеева

Редактор В.Ковтун Техред Л.Сердюкова Корректор M.Äåì÷èê

Заказ 6661/37 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Г

Производственно-полиграфическое предприятие, r.Óæãoðîä,ул.Проектная,4

Экстрагируют липиды тромбоцитов.

Для этого в пробирку с отмытыми тром-. боцитами добавляют 2,4 мл хлороформа и метанола (2:1), закрывают плотно пробкой и оставляют для экстракции на 5 мин. Добавляют 0,5 мл подкисленной воды (0,5 мп концентрированной серной кислоты на, 1 л дистиллированной воды), встряхивают 20 раз и оставляют на 10-20 ч для разделения на 2 фазы. Отбирают нижнюю фазу. содержащую липиды и выпаривают в токе азота при 37 С. Сухой липидный экстракт разводят в 100 мкл хлороформа и капилляром наносят на старт хроматографической пластины, покрытой силикагелем (например, "Silufol", ЧССР). Разделение фракций проводят в смеси растворителей: петролейный эфир, диэтиловый эфир, уксусная кислота (30:10:0,2). Проявляют пластинки 2 -ным спиртовым раствором фосфорномолибденовой кислоты и высушио ванием при 100 С в течение 5 мин.

Определяют фракции липидов исходя из значений Rf и денситометрируют пластинки на денситометре ("Виан").

Интегральный денситометрический показатель равняется 357, а для ХС—

104. 30

Вычисляют относительное содержание ХС в тромбоцитах (29,1 ) . Полученный показатель превышает норму, что свидетельствует о,наличии у больного атеросклеротических изменений в 35 организме с последующей клиникой ИБС.

Пример 2 ° Больной Григорьев Н.Р., 36 лет, поступил в клинику с неясными болями за грудиной, сходными с клиникой ИБС, являющейся отражением атеросклероза коронарных артерий.

Проведенные инструментальные методы не могут подтвердить наличие атеросклеротического процесса °

Определение ХС по прототипному способу выявило показатель равный

220 мг/дл, что является пограничным показателем между нормой и патологией.Определение относительного содержания ХС в тромбоцитах по предлагаемому методу составило 21 ., что явля- ется критерием нормы. Последующее клиническое обследование больного выt явило, что происхождение болей эа грудиной связано с периодическими спазмами пищевода и не имеет отношения к клинике ИБС.

Формула и э обретения

Способ диагностики атеросклероза путем определения холестерина относительно общего содержания липидов в крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет диагностирования в период регрессии атеросклероза, определение проводят в тромбоцитах и при значении этого показателя выше нормы диагностируют атеросклероз.