Способ оценки реакции гемагглютинации

 

Изобретение относится к микробиологии . Цель изобретения - ускорение и повышение точности способа. Для получения спектра рассеянного света используют установку, состоящую из фотооптической части, усилителя и анализатора спектра. Луч от лазера фокусируют линзами на исследуемом объеме. Рассеянный свет регистрируют под углом 10. После усиления сигнала он поступает в анализатор спектра. Спектр обрабатывают на ЭВМ и определяют полуширину спектральной функции. i С/)

СООЗ COBETCHHX

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„,Я0„„1 7004 А 1 (51). 4 G 01 N 33 53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3859436/28-14 (22) 17. 12.84 (46) 30.07;87. Бюл. В 28 (72) А.М. Королюк, Н.Н. Петров, В.П. Никитин, В.М. Романов, А.Э. Фотиади и А.В. Соколов (53) 615.373(088.8) (56) Science, 1941, v.. 94, р. 22. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕАКЦИИ ГЕМАГППОТИНАЦИИ (57) Изобретение относится к микробиологии. Цель изобретения — ускорение и повьппение точности способа.

Для получения спектра рассеянного света используют установку, состоящую из фотооптической части, усилителя и анализатора спектра. Луч от лазера фокусируют линзами на исследуемом объеме. Рассеянный свет регистрируют под углом 1О . После усиления сигнала он поступает в анализатор спектра. Спектр обрабатывают на ЭВМ и определяют полуширину спектральной функции.

132 7004

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для быстрого обнаружения и идентификации микробных и немикробных антигенов, а также антител к ним.

Цель изобретения — ускорение и повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Для оценки реакции гемагглютинации (РГА) и непрямой гемагглютинации (РНГА) применяют установку для

Получения спектра рассеянного света, которая состоит из фотооптической части, усилителя и анализатора спектра. В качестве источника излучения используют лазер ЛГ-38, луч от которого фокусируют линзами на исследуемом объеме (гелий-неоновый лазер с длиной волны 0,63 мкм). Рассеянный о свет регистрируют под углом 10 фотометрической приставкой типа ФМЭЛ-1А

После усиления сигнала усилителем типа 1У14 он поступает в анализатор спектра СК4-72 (ширина полосы обзора

50 Гц, ширина полосы пропускания филь тра 0,25 Гц). Затем спектр обрабатывают. на 3ВМ "Электроника ДЗ-28", при этом с высокой точностью определяют полуширину спектральной функции Г из формулы

АГ

L(p) (Г+с /2) + j3

)5

55

1 где d /2 — полуширина частотной характеристики фильтра анализатора по полувысоте, — центральная частота фильтра.

А и à — подгоночные параметры, à — полуширина спектральной функции.

Пример 1. Обнаружение вирус- „ ных антигенов при помощи РГА.

В качестве объекта исследования взяли аллантоисную жидкость куриного эмбриона, зараженного вирусом гриппа А (Свердловск) 7862/82-HÇN2.

Реакцию ставили в лунках полистироловых пластин, где вируссодержащий материал двукратно разводили физиологическим раствором от 1:25 до

1:409600 в объеме 0,5 мл. Затем в каждую лунку добавляли по 0,5 мл 1%ной взвеси куриных эритроцитов. После оседания эритроцитов в контроле (через 40.мин) результат реакции учитывали общепринятым визуальным способом.

Визуально положительная реакция регистрировалась до разведения 1:800.Измерение параметров спектра методом

СОС делали через 10 мин после постановки реакции, для этого брали по

О, 1 мл пробы из каждой лунки и разбавляли 2 мл физиологического раствора. В тех образцах, где происходило склеивание эритроцитов, наблюдали сужение спектральных кривых вплоть до разведения 1:204800 (при этом Г магд = 4,7 1 0,2), для разведения 1:800 Г р = 3,,3+ 0,2) . Для контрольного образца (эритроциты с физиологическим раствором) полуширина спектра была стабильной и составляла Г = 5,1"0,2.

Пример 2. Титрование специфических антител при помощи РНГА.

В качестве объекта исследования взяли псевдотуберкулезную антисыворотку. К 0,4 мл двукратных разведений сыворотки на физиологическом растворе (с i:100 до 1:204800) добавляли по 0,1 мл 1%-ной взвеси стандартного эритроцитарного псевдотуберкулезного диагностикума. Реакцию сопровождали контролем сыворотки (сыворотка в начальном разведении и нормальные эритроциты барана) и контролем диагностикума (сенсибилизированные эритроциты и физиологический раствор). Визуальный учет результатов проводили после оседания эритроциТоВ в контролях (через 1,5-2 ч), а реакцию методом СОС начинали уже спустя 10 мин после постановки реакции.

Титр РНГА при визуальном учете составил 1:12800, при учете методом

СОС вЂ” 1:409600 (Г,<< =7,6 0,2). Полуширина спектра для контрольных образцов оставалась на уровне Г =8,2+0,2).

Как видно из обоих примеров, цель изобретения достигается тем, что чувствительность способа регистрации реакции методом СОС была существенно выше, чем при оценке РГА и РНГА обычным визуальным способом. Кроме того, регистрация предлагаемым способом осуществляется значительно раньше (через 10-15 мин), чем при визуальном способе (через 1-2 ч). Таким образом, регистрация РГА и РНГА по изменению полуширины спектров рассеянного света методом СОС обеспечивает одновременно экспрессность учета и высокую его чувствительность.

Составитель В. Фролова

Техред И.Попович

Корректор Т. Колб

Редактор М. Петрова Заказ 3382/40 Тираж 776

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4. з

1327004

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я вышения точности способа, регистрацию осуществляют в пучке когерентного изСпособ оценки реакции гемагглюти- лучения, измеряют полуширину спектра нации путем регистрации образования рассеянного света, при уменьшении ее

5 гемагглютинатов, о т л н ч а ю щ и й- по сравнению с контролем определяют с я тем, что, с.целью ускорения и по- наличие гемагглютинатов.