Способ определения церебральных нарушений у доношенных новорожденных детей,родившихся в тяжелой асфиксии

 

Изобретение относится к педиатрии . Цель изобретения - ранняя диагностика глубоких церебральных нарушений у новорожденных детей. В эритроцитах пуповинной крови определяют содержание общих липидов. Расчет содержания липидов в пробе производят на основании сопоставления экстинкции опытной и эталонной проб против контрольной пробы. Церебральные нарушения диагностируют при уровне общих липидов, равном 6,2-9,85 г/л. 00 со 4 00 ю

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

A t (j9} (И} (51)4 С 01 К 33 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 38М 703/28-14 (22) 14. 12. 84 (46) 30.08.87. Бюл. В 32 .(7 1 ) Белорусский научно-исследовательский институт охраны материнства и детства и Белорусский государственный институт усовершенствования врачей ,(72) В.С.Данильчик, В.Г.Колб и В.Ю.Домбровский (53) 616.07 (088.8) (56) Елизарова И.П. Церебральные нарушения у новорожденных, перенесенных родовую травму и асфиксию. M.

1977, с. 75-76. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦЕРЕБРАЙЬНЫХ

НАРУШЕНИЙ У ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ

ДЕТЕЙ, РОДИВШИХСЯ В ТЯЖЕЛОЙ АСФИКСИИ (57) Изобретение относится к педиатрии. Цель изобретения — ранняя диагностика глубоких церебральных нарушений у новорожденных детей. В эритроцитах пуповинной крови опредепяют содержание общих липидов. Расчет содержания липидов в пробе производят на основании сопоставления экстинкции опытной и эталонной проб против контрольной пробы. Церебральные нарушения диагностируют при уровне общих липидов, равном 6,2-9,85 г/л.

1 13340

Изобретение относится к медицине,, а именно к способам ранней диагностики заболеваний.у детей.

Цель изобретения — ранняя диаг5 костика глубоких церебральных нарушений у новорожденных детей, родившихся в тяжелой асфиксии, путем определения содержания общих липидов в эритроцитах пуповинной крови. 10

Способ осуществляют следующим образом.

Реактивы: физиологический раствор хлористого натрия (9 г/л); концентрированная серная кислота (х.ч.); концентрированная ортофосфорная кислота (х.ч.); водный раствор ванилина (6. г/л), для приготовления которого

0,6 r ванилина растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды 20 при нагревании на водяной бане, после охлаждения объем доводят водой до 100 мл, раствор стабилен при комнатной температуре; фосфорно-ванилиновая смесь: раствор ванилина (6 г/л) 25 смешивают с концентрированной ортофосфорной кислотой в соотношении 1:4, хранится при комнатной температуре в темной посуде не более 2 недель; стандартный раствор триолеина (8 г/л ЗО триолеина в хлороформе),; хлороформ; метанол.

Ход определения. В центрифужную пробирку, содержащую 0,5 мл физиологического раствора, вносят 0,05 мл цельной крови, перемешивают и центри фугируют в течение 15 мин прн

300 об/мин. Цадосадочную жидкость с верхним слоем эритроцитов отсасывают, а к оставшейся на дне эритроци- 40 тарной массе добавляют 1,0 мл физиологического раствора. Проводят повторное центрифугирование в течение

15 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость осторожно, полностью отсасывают. Микропипеткой набирают 0,0 1 мл эритроцитарной массы и вносят в пробирку, в которую предварительно нали— вают О, 1 мп дистиллированной воды.

К образовавшемуся гемолизату добавляют 5 мл хлороформ-метанолоной смеси (2:1 по объему), содержимое пробирки осторожно встряхивают в течение

15 мин и фильтруют в чистую iJpHTpH фужную пробирку. Пробирку и осадок на фильтре промывают дважды хлороформметаноловой смесью по 1 мл. К объединенному фильтрату в опытной пробирке добавляют 1,5 мп дистиллированной во82 2 ды, пробирку закрывают полиэтиленовой пробкой, осторожно встряхивают в течение 5 MICH и центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин. Содержимое пробирки расслаивается на 2 фазы: нижняя содержит липиды, верхняя нелипидные компоненты. Всю нижнюю фазу аккуратно отсасывают и переносят в чистую пробирку ° Эту пробирку ставят в водяную баню и выпаривают досуха о при 75-85 С. В сухому липидному экстракту приливают 0Ä01 мл хлороформа и

0,5 мл концентрированной серной кислоты, тщательно перемешивают, ставят на водяную баню при 100 С на 20 мин, а затем сразу же охлаждают водопроводной водой до комнатной температуры. После охлаждения прибавляют

I,5 мл фосфорно-ванилиновой смеси, тщательно перемешивают и пробу оставляют на 45 мин в темноте при комнатной температуре, после чего ее колориметрируют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром (длина волны

500-560 нм) в кювете с толщиной слоя

3 мм против контроля на реактивы.

Расчет содержания липидов в пробе производят на. основании сопоставле" ния экстинкции опытной и эталонной проб против контрольной пробы. Контрольную и эталонную пробы готовят так же, как и опытную, но вместо эритроцитарнои массы берут соответственно по 0,01 мл дистиллированной воды и стандартного раствора тииолеина с концентрацией 8 г/л.

Расчет ведуъ по формуле

Экстинкция опыта

Общие липиды (г/л)-„- — — — -- — — — — — 8>

Экстинкция эталона где 8 — концентрация липидов г» эталонной пробе, г/л.

Пример 1. Ребенок h... мужского пола, масса тела при рождении

3350 г, длина тела 52 см. Родился в тяжелой асфиксии, с оценкой по шкале Апгар 2/6 баллов (первая оценка через 1 мин, вторая — через 5 мин после рождения), Сразу же после рождения проводились реанимационные мероприятия. Во время пребывания в родильном доме состояние ребенка оставалось тяжелым, развились клинич еские явления нарушения мозгового кровообращения II-ТТХ степени, по поводу чего он получал соответствующее лечение, а на 11-е сутки жизни бып пере1334082 с глубокими церебральными нарушения" ми с минимальными церебральными арушениями

3,79

3,54

6,25

4,74

9,54

5,31

3,69

3,47

7,58

3, 8 7

4,17

7,20

4,36

4,27

7,37

7,67

3,10

3,79

5,89

9,80

3,12

4, 712

6,96

6,38

6,86

3,79

5,28

8,04

5,81

5,50

Как свидетельствуют результаты статистической обработки полученных данных, уровни общих липидов в эритроцитах пуповинной крови здоровых новорожденных и детей, родившихся в тяжелой асфиксии с минимальными церебральными нарушениями, достоверно не отличились один от другого ° В то же время содержимое общих липидов в эритроцитах пуповинной крови у детей третьей группы (родившихся в тяжелой веден для продолжения лечения в неврологическое отделение для новорожденных. -.

Содержание общих липидов в эритро5 цитах пуповинной крови 6,2 г/л.

Пример 2. Ребенок Ж., мужского пола, родился в тяжелой асфиксии, с оценкой по шкале Апгар 4/7 баллов. Масса тела при рождении

4000 г, длина 56 см. Оживлен с использованием комплекса реанимационных мероприятий. В связи с развившимися глубокими неврологическими нарушениями, свидетельствующими о нару- 15 шении мозгового кровообращения II-III степени, получил необходимое лечение, а на 13-е сутки жизни бып переведен в неврологическое отделение для новорожденных детей. 20

Содержание общих липидов в эритроцитах пуповинной крови 7,85 г/л.

Пример 3. Ребенок Л., мужского пола, родился с массой тела

4000 г, длиной 58 см. Извлечен в 25 состоянии тяжелой асфиксии, с оцен- > кой по шкале Апгар 3/6 баллов, реанимирован. Тяжелое состояние ребенка в родильном доме было обусловлено явлениями нарушения мозгового кровооб- 30 ращения II-III степени. Проводимое лечение не привело к исчезновению неврологической симптоматики и на

11-е сутки жизни ребенок был переведен в неврологическое о деление для новорожденных.

Содержание общих липидов в эритроцитах пуповинной крови 9,85 г/л.

Таким образом, определение уровня общих липидов в эритроцитах пуповин- 40 ной крови детей, родившихся в тяжелой асфиксии, позволяет осуществлять раннее выявление глубоких церебральных нарушений до появления их клинических признаков и своевременно назначать 45 необходимое лечение.

В процессе испытаний определено содержание общих липидов в эритроцитах пуповинной крови у новорожденных следующих трех групп (по 10 детей в каждой группе):.I — здоровые новорожденные; II — дети, родившиеся в тяжелой асфиксии с минимальными церебральными нарушениями, исчезавшими к 10-12 суткам жизни, что позволило выписать этих детей домой; III - де ти, родившиеся в тяжелой асфиксии с глубокими церебральными нарушениями, требовавшими раннего назначения лечебных мероприятий в родильном доме и дополнительного лечения в условиях специализированного неврологического отделения для новорожденных детей. . Результаты определения содержания общих липидов в эритроцитах пуповинной крови у новорожденных всех трех групп приведены в таблице. !

Содержание общих липидов (г/л) в пуповинной крови в зависимости от тяжести церебральных нарушений

Здоровые Дети, родившиеся в тяноворожденные желой асфиксии

M+m 4,28+0,266 4,48+0,308 7,72+0,356

Составитель Л.Шилина

Техред Л.Сердюкова

Корректор В.Бутяга редактор А.Огар

Заказ 3958/42 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул., Проектная, 4

Б l334082 б асфиксии с глубокими церебральными Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я нарушениями) были с высокой степенЬю Способ определения церебральных достоверности (P (0,001) вьппе, чем у: нарушений у доношенных новорожденных детей двух предыдущих групп. Данные, детей, родившихся в тяжелой асфиксии, характеризующие содержание общих ли- путем биохимического исследования пидов в эритроцитах пипувинной крови эритроцитов пуповинной крови, о тдетей, родившихся в тяжелой асфиксии л и ч а ю шийся тем, что, с цес глубокими церебральными нарушения- лью ранней диагностики глубоких цеми, находятся в пределах, при которых 1О ребральных нарушений, измеряют уро-. определяют церебральные нарушения у вень общих липидов и при их показановорожденныХ детей предлагаемым т еле, равном 6, 2 г/л-9, 85 r /л, опреспособом. деляют церебральные нарушения.