Производные тиено [2,3-d]пиримидина, обладающие противогерпетической и противотуберкулезной активностью

 

Изобретение касается замещенных пиримидина , в частности тиено I2,3-d пиpимидинo8 общей ф-лы СН -О- C N-CH N-C C-S-CR CR где э 1I1 2 а) R -СН, и R-NO . б) R-NO, и R-СН, обпа13221223 дающих лротивогерпетической и противотурберкулезной активносгьк), что может быть использовано в медщине. Цель изобретения - создание новых более активнь1х веществ с расширенным спектром действия Их синтез ведут из соответствующего 3,4-дигидротиено 2,3-d| пиримид - 4 - она и РОС в присутавии дйметилформамида с последующим кипячением в метаноле. Выход %: тля, С брутто-ф-ля; а) 50, 119 - 120; б) 55; 95 -96. С Н N О S. Новые вещеава активны против герлеса f и 11 типов при концентрации 1 мкг/мл против 5 мкг/мл для известного (химиотерапбвтический индекс 5); минимально подавляющая концентрация для туберкулеза 3 и 0,55 мкг/мл против 1-2 МЮ-/МЛ для арептомицина. 3 табп

(ю) SU (и) 1389235 А1 (51) 5 С 07 D 495 04 А 61 K 31/505

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЦ10ЛФСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР)

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4129630/04 (22) 25.08.86 (46) 15.11.93 Бюп. Na 41-42 (71) Всесоюзный научно-исследовательский химико-фармацевтический институт имСерго Орджоникидзе (72) Каплина Н.В.; Шведов ВК; Фомина АН.; Николаева И.С„Пушкина Т.В„Филитис Л.Н. (54) ПРОИЗВОДНЫЕ ТИЕНО (2,3-ЩПИРИМИДИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОГЕРПЕТИЧЕСКО0т И ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ (S7) Изобретение касается замещенных пиримидина, в частности тиено (2,3-4)пиримидинов общей ф-лы СН -0- С э

R где

2 а) R -СН и R -NO: б) R -N0 и R -СН обпа1 3 2 2 1 2 2 3

2 дающих противогерпетической и противотурберкулезной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения — создание новых более активных веществ с расширенным спектром действия Их синтез ведут из соответствующего

3,4-дигидротиено (23-б) пиримид — 4 — она и

P0CI в присутствии диметилформамида с послеэ дующим кипячением в метаноле. Выхор 96: тлл. С брутто-ф-ля: a) 50, 119 — 120; С Н N 0 S б) 55; в 7 э э

95-96; С Н N 0 $. Новые вещества активны про в7.33 тив герпеса т и 11 типов при концентрации 1 мкг/мл против 5 мкг/мл для известного (химиотерапевтический индекс 5); минимально подавляющая концентрация для туберкулеза 3 и 0,55 мкг/мл против 1 — 2 мкг/мп дпя стрептомицина. 3 табл

1389235

Изобретение относится к новым производным тиено(2,3-б)пиримидина, обладающим биологической активностью,, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — создание новых производных тиено(2,3-б))пиримидина, обладающих болев высокой противогерпетической активностью в сочетании с противотуберкулезной активностью.

Пример 1. Получение 4-метокси-5-метил-б-нитротиено(2,3-д)пиримидина (1 а).

Получение исходного соединения — 4хлор-5-метил-б-нитротие но(2.3-д)пиримидина (2а).

Смесь 1,7 r (0,008-моль) 5-метил-6-нитро-3,4-дигидротиено(2,3-б)пиримид-4-она, 1 мл (0,01 моль) хлорокиси фосфора, 0.84.мл (0,01 моль) диметилформвмида (ДМ ФА) в 30 мл сухого дихлорзтана (ДХЭ) кипятят при перемешивании в течение 30 мин. Реакци- 20 онный раствор промывают водой, ДХЭ упаривают в вакууме, остаток кристаллизуют из смеси гексана и хлористого метилена (1:1), Получают 1,5 г (82 } 4-хлор-5-метил-6нитротиено(2,3-б)пиримидина в виде кри- 25 сталлического порошка желтого цвета; т.пл.

134 — 135 С.

Найдено,, С 36,5; Н 1,9; Cl 15,2;

N 18,2; S 14,1, С7Н4С!ЙЗО2$ 30

Вычислено, : С 36.6; Н 1,8; Cl 15,4; N

18,3; S 14,0, Спектр RMP (СНС!з. внутр.ст.ТМС), д, м,д„ 9,15 (с, 2H}, 2,52 (с, 5СНз).

Получение целевого продукта — 4-меток- 35 си-5-метил-б-нитротиь но(2,3-б)пиримидина (1а), Кипятят раствор 2,29 г (0,01 моль) соединения 2а в 40 мл метанола в течение 30 мин.

Раствор охлаждают, выпавший осадок от- 40 фил ьтро вы ва ют, .

Получают 1,12. г (50";ь) 4-метокси-5-метил-б-нитротиено(2,3-б)пиримидина в виде кристаллического порошка желтого цвета. растворимого в хлоруглеводородах, спир- 45 тах, т.пл. 119 — 120 С.

Найдено, ь: С 42,4; Н 3,0; N 18,7; S 14,1.

СЗН7йзоз$

Вычислено, : С 42,6: Н 3,1; N18,,6: :S

14,2. 50

Пример 2, Получение 4-метокси-5нитро-б-метилтиено(2,3-б)пиримидина (16).

Получение исходного соединения — 4хлор-5-нитро-б-метилтиено(2,3-б)пиримидина (26) — проводят в условиях примера 1. 55

Иэ 3.8 r (0,018 моль) 5-нитро-6-метилтиено(2,3-б)пиримид-4-она. 1,65 мл РООз, 1,39 мл ДФМА в 100 мл сухого ДХЗ получаloT 2 г (70 ) 4-хлор-5-нитро-б-метилтиено(2.3-б)пиримидина в виде ilopoUJKB кремового цвета. растворимого в спиртах, хлоруглеводородах, диоксане, кетонах. т.пл.

84-85 С (хлористый метилен:гексан 1:1), Найдено; : С 36,6: Н 1,8; С1 15,6; N

18,4; S 14,1.

СтН4ОйзОг$

Вычислено, )(: С 36,6; H 1,8; Cf 15,4; N

t8,3; S f4,0.

Спектр ЯМР (СНС!з, внутр.ст, TMC), д. м,д.: 8,93 (с, 2Н), 275 (с, 6-СНз), Получение целевого продукта — 4-метокси-5-нитро-б-метилтиено(2,3-б)пиримидина (16) — проводят аналогично примеру 1 иэ

1,12 г (0,005 моль) соединения 2а в 30 мл метанола, Получают 0,65 r (55%) 4-метокси-5-нитро-б-метилтиено(2,3-б)пиримидина в виде порошка белого цвета с кремовым оттенком, т,пл, 95-96 С, Найдено. 7ь; С 42,7; Н 3.2; N 18,9; $14,3.

СвНтйзОз$

Вычислено, : С 42,6; Н 3.1; N 18 6, S

14,2.

Описываемые соединения изучены в опытах на культурах клеток по подавлению размножения вирусов простого герпеса (и

П антигенных типов.

Для изучения противогерпетической активности соединений испольэовали первично трипсиниэированную культуру клеток фибробластов эмбриона курицы (ФЭК), которую получали путем трипсинизации 9дневных куриных эмбрионов. В качестве тест-вирусов использовали вирусы простого герпеса! и П антигенных типов (штаммы ffz и Тр).

Двухдневный монослой культуры клеток инфицировали разведениями вируса. содержащими от 10 до 1000 ТЦД5о в 0,4 мл.

После адсорбции и удаления неадсорбировавшегося вируса (череэ 1 ч после инокуляции вируса) вносили изучаемые соединения в концентрациях, составляющих 1/2 от максимально переносимой для культуры клеток концентрации, и в меньших концентрациях.

Результаты учитывали через 48 ч по способности изучаемых соединений предотвращать цитопатическое действие вируса на клетки и выражали количеством ингибируемых 500 тканевых цитопатических доэ вируса (ТЦДм).

Изучение вирусингибирующей активности соединений по изобретению в отношении вирусов простого repneca проведено на

1600 пробирках с монослоем клеточной культуры ФЭК; результаты обработки статистические.

Противотуберкулезную активность соединений по изобретению изучали в опытах

1и vitro, определяя минимальную подавляю1389235 щую концентрацию (МПК) методом серийных разведений на среде Сотона, В качестве тест-культуры испольэовали микобактерии туберкулеза человеческого типа(М tuberculosis Нз7йч1, Сроки культиви- 5 рования испытуемых концентраций соединений с тест-культурами составляли 14 дней при 37 С, Токсичность соединений по изобретению изучали в опытах на культуре клеток 10

ФЭК (96 пробирок) и белых нелинейных мышах с массой тела 18-20 г (120 мышей). На монослой 48-часовой культуры клеток ФЭК наносили питательную среду М 199, содержащую испытуемое соединение в различ- 15 ных концентрациях, и в течение 5 дней проводили микроскопию клеточных культур для выявления цитотоксического действия соединений и определения максимально переносимой клетками концентрации. 20

Мышам испытуемые соединения вводили внутрь в виде взвеси в 1 -ном крахмальном геле в объеме 0,5 мл 1 раз в день в течение 5 дней. Наблюдение за выживаемостью животных проводили в течение 14 дней 25 и определяли максимально переносимую дозу (МПД) соединения. Результаты изучения противогерпетической активности соединений приведены в табл. 1 и 2, 30

Сравнение проводили с известным соединением формулы А

35 обладающим вирусингибирующим действием в отношении вируса простого герпеса в клеточной культуре Ф Э К. 40

Результаты изучения соединений по изобретению свидетельствуют о том, что эти соединения обладают выраженной вирусингибирующей активностью в отношении вируса простого герпеса. Соединение 45

1а в концентрациях 2,5 и 2,0 мкг/мл подавляет репродукцию вируса герпеса I типа на

1,0 — 2,0 1ц ТЦДво, а II типа на 1.0--1,5 Ig

TLQso, Соединение 16 эффективно только в отношении вируса герпеса I типа: в концентрации 10 и 5 мкг/мл подавляет его репродукцию на 2.0-1,0 Ig ТЦД о по сравнению с контролем. Соединение А уступает по противогерпетической активности соединениям по изобретению в отношении вируса простого герпеса I типа и неактивно в отношении вируса герпеса II типа.

Результаты изучения противотуберкулезной активности соединений приведены в табл. 3.

Как следует из табл. 3, соединения по изобретению кроме противовирусной активности обладают высокой противотуберкулезной активностью в отношении микобактерий туберкулеза человеческого типа, близкой по активности к известному противотуберкулеэному антибиотику стрептомицину.

Результаты изучения токсичности соединений по изобретению свидетельствуют о том, что они хорошо переносятся животными: при введении per os 1 раз в день в течение 5 дней МПД для мышей соединений

1а и 16 составляют 500 мг/кг, что выше МПД соединения А в 4 раза и свидетельствует о меньшей токсичности соединений по изобретению.

Анализ полученных результатов показывает, что соединения по изобретению обладают более выраженным действием и меньшей токсичностью по сравнению с соединением формулы А. Кроме того, соединения по изобретению обладают высокой противотуберкулезной активностью, сравнимой с активностью известного антибиотика стрептомицина. (56) Харизоменова И.А, и др. Синтез и противовирусная активность производных 3аминотиено(2,3-0)пи римидина.

Хим.фарм. журнал. 1981. N. 9, с 40.

Машковский M,Ä, Лекарственные средства. M,: Медицина, 1984, т. 2. с.230.

1389235

Таблица 1

+ ХТИ вЂ” обратная величина отношения минимально активной концентрации к максимально переносимой

** p < O,O5.

*** р < 0,01.

Таблица 2

Таблица 3 нимальнэя подавляющая мкг/мл

3,5

0.55

1.0-2,0

Формула изобретения

Производные тиено (2,3-б)пиримидина общей формулы Б

N R где Й - метил, а R", - нитрогруппа или R1нитрогруппа, à Rz - метил, обладающие противогерметической и противотуберкулезной активностью.