Суцуки, Киуичи Матсубайаши и Шиничиро Ашида (1Р) (71) Санофи (FR) (53) 54 7 ° 738. 07 (088. 8) (56) Эльдерфилд P. Гетероциклические соединения. М., ИЛ, т. 1, с. 183. (54) СПОСОВ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

5,6,7,7а-ТЕТРАГИДРО-4Н-ТИЕНО (3,2-с)ПИРИДИНОНА-2 ИЛИ ИХ СОЛЕЙ С МИНЕРАЛЬНЫМИ ИЛИ ОРГАНИЧЕСКИМИ КИСЛОТАМИ. (57) Способ получения производных

5, 6, 7, 7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридийона-2 общей формулы (51И С 0 1) 495 04 // А 61 К 31/38 где R вЂ” фенил, незамещенный нли за1 мещенный атомом галогена, низшим алкильным радикалом, нитро- или цианогруппой

R вЂ” водород или низший алкиль2 ный радикал, или их солей с минеральными или органическими кислотами, о т л и ч авЂ” ю шийся тем, что соединение общей формулы II

Я где R u R вЂ” имеют указанные значения;

R вЂ” водород или алкил с 14 атомами углерода, обрабатывают хлористым водородом и Я сероводородом в уксусной кислоте прн 85 С с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли с минеральной или органической кислотой.

1176843

Изобретение относится к способу получения не описанных в литературе производных 5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено-(3,2-с)-пиридинона-2 общ и формулы

/Bi

В о

10 где R„- фенил, незамещенный или замещенный атомом галогена, низшим алкильным радикалом нитро- или цианогруппой, R2 водород или низшии алкильныи 15 радикал, или их солей с минеральными или органическими кислотами, обладаюших фармакологической активностью.

Цель изобретения вЂ” разработка способа получения новых производных

5,6,7,7а-тетрагидротиено (3,2-с)пиридинона-2 общей формулы или их солей, которые обладают высокой антиагрегатной активностью в отношении 25 тромбоцитов.

Пример 1. 5-(2-Хлор-бензил)-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)2-пиридинон.

А..Получение 1-(2-хлор-бензил)-4- З0

-оксо-З-пиперидин)-метилацетата.

Добавляют по каплям раствор 100 г (0,355 моль) L1 (2-хлор-бензил)-4-оксо-3-пиперидин)-этилкарбоксилата в 400 см 1,2-диметоксиэтана в смесь 35 из 17,04 г (0,355 моль) гидрида натрия (суспензня 50%) в 250 см 1,2-диметоксиэтана, перемешивают при комнатной температуре в течение

30 мин, затем добавляют по каплям 40 раствор из 59, 28 г (0,355 моль) этилбромацетата в 250 смз 1,2-димексиэтана. Перемешивают при комнатной температуре н течение 2 ч, фильтруют образовавшийся осадок, промывают 45 его эфиром и концентрируют фильтрат в вакууме. Осадок растворяют в воде и экстрагируют хлористым метиленом.

Органические экстракты промывают водой, сушат сульфатом натрия, фильт- 50 руют на слое двуокиси кремния и концентрируют в вакууме.

Полученную. желтую смолу (123,2 r) растворяют в 850 см 6 и. соляной кислоты и раствор кипятят в атиосфе- 55 ре азота н течение 4 ч. После охлаждения реакционную смесь концентрируют в вакууме, добавляют воду и экстрагируют эфиром. Водные фазы подщелачивают добавлением едкого натра, затем доводят до рН а 4 добавлением уксусной кислоты и экстрагируют хлористым метиленом..Органические фазы промывают водой, сушат сульфатом натрия и выпаривают досуха. Полученный смолистый продукт (93,8 г) растворя-ют в ацетоне и обрабатывают эфирным раствором хлористого водорода. Полу- ченный хлоргидрат Г1-(2-хлор-бензил)-4-оксо-3-пиперидин) -уксусной кислоты фильтруют, промывают ацетоном, затем эфирои и сушат в вакууме: белые кристаллы; т. пл. (разл.) при

180 С, выход 64%.. Перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч раствор из 30 г полученного хлоргидрата в 300 см метанола, насыщенного хлористым водородом. Выпаривают в вакууме при температуре ниже 50 С, о добавляют, доводят до щелочной реакции добавлением бикарбоната натрия и экстрагируют хлористым метиленом.

Органические экстракты промывают водой, сушат сульфатом натрия и выпаривают досуха. Полученный кетоэфир в виде желтой смолы используют без очистки на следующей стадии.

ИК-спектр (пленка: СР; 1720 см ).

ЯИР (CDCl>) 7 05-7,76 (m 4Н);

3,72 (S 2Й); 3,62 (S ЗН).

Б. 5-(2-Хлор-бензил)-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено (3,2-с)-пиридинон-2.

Производят одновременно барботирование потоков хлористого водорода и сероводорода в раствор, нагретый до 85 С и содержащий 4,5 r (0,0152 моль) полученного кетоэфира в 45 см уксусной кислоты. Концентрируют в вакууме, поглощают осадок водой, доводят до щелочной реакции добавлением бикарбоната натрия и экстрагируют хлористым метиленом.

Экстракты промывают водой, сушат сульфатом натрия и выпаривают досуха. Получают целевой продукт в виде желтого масла (3,6 г, выход 86%),, превращают в оксалат с т. пл. 170 С (этанол) добавлением ацетонового раствора щавелевой кислоты.

Хлоргидрат-полугндрат: т. пл. с разл. при 180 С (осаждение в ацетоне).

Основание: т. пл. 73-74 С, 5 С (этанол).

76843 з 11

Пример ы 2-9. Следующие соединения получают по аналогичной методике.

Производное 2: 5-бензил-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено (3,2-с)-пиридинон-2.

Малеат: бежевые кристаллы. т.пл.

132-134 С (изопропанол).

Производное 3: 5-(4-хлорбензил)-5„6,7,7à-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинон-2.

Малеат: бежевые кристаллы, т.пл.

158-160 С (этанол) .

Производное 4: 5-(2-метилбензил)5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено (3,2-с)пиридинон-2.

Оксалат: бежевые кристаллы т.пл.

195-197 С (метанол),.

Производное 5: 5- ((2-хлорфенил)-1-этил)-5,6, 7, 7а-тетрагидро-4Н-тие-но(3,2-с)пиридинон-2.

Хлоргидрат: желтые кристаллы, т. пл. 140-142 С.

Основание: ЯМР (СОСЯ, ): 7, 30 (ш4Н)

6,05 и 5,95 (2S, 1Н), (2 диастериоизомера).

Производное 6: 5- (1-(2-хлорфенил)вЂ”

-пропил-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)-пиридинол-2 °

Хлоргидрат: бежевые кристаллы, т. пл. 124-126 С.

Основание: ЯМР (CDCI,): 7,30 (ш4Н)

6,05 и 5,90 (2S, 1Н); (2 диастериоизомерау.

Производное 7: 5-(2-цианобензил)-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинон-2.

Оксалат: бежевые кристаллы, т.пл.

176-178 С (ацетонитрил).

Основание: ЯМР (СССР,): 7,50 (m4H); 6,00 (S, 1Н); 3,80 (S, 2Н).

Производное 8: 5-(2-нитробензил)-5,6,7,7А-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинон-2.

Оксалат: бежевые кристаллы т. пл.

186-188 С.(изопропанол-этанол).

Основание: ЯМР (СРС1 ): 7,50 (m, 4Н) 5,95 (S, 1Н); 3,90 (S, 2Н).

Производное 9: 5-(2-бромбензил)-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)-пиридинон-2.

Оксалат: бежевые кристаллы, т. пл.

151-153 С (изопропанол).

Основание: (СПСР,): 7,30 (m, 4Н), 5 96 (S, 1Н) ; 3 75 (S, 2Н).

DhSo мг

Соединения

113

116

125

110

286

121

254

278

118

Кроме того, опыты показали, что

55 производные общей формулы 1 не вызывают у животных различных видов в ходе проводившихся опытов местных или общих реакций, нарушений показаТоксикологические и фармакологические исследования проведены в сравнении с аналогами по строению 2-хлор-5-бензил-4, 5,6, 7-тетрагидротиен(3, 2-с) пиридинон, (сравнителу,ное соединение A) и 2-циано-5-бензил-4,5,6,7-тетра-гидро-тиен(3,2-с)пиридинон (соединение В).

Токсикологическое исследование.

Изучены острая, хроническая, субхроническая и замедленная токсичности. Опыты, проведенные на различt0 ных видах животных (мышах, крысах и кроликах), свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы 1, а также их хорошей толерантности.

Ниже приведены 1Ж (25 ч/кг веса тела), вычисленные по методу Миллера и Тентера, при внутривенном введении мышам, а также представлены результаты, полученные для производных

2р формулы 1 и сравнительных соединений

А и В. Эти результаты показывают, что токсичность производных общей ! формулы 1 по меньшей мере вдвое меньше токсичности соединений А и В.

1176843!

5 ний регулярно проводившегося биологического контроля, расстройств микро- или макроскопического характера.

Исследование потомства не обнаружило тератогенного действия испытуемых соединений.

Фармакологическое исследование.

Изучена способность подавлять аггрегацию тромбоцитов и противо- !О .тромбоэную активность по сравнению с соединениями А и В.

Подавление соедчнения тромбоцитов.

У крыс Wistar, предварительно обработанных испытуемым соединением, берут кровь из яремной вены. Из этой крови после обработки цитратом и центрифугирования получают плазму, содержащую 800 + 20 тыс. тромбо- 20 цитов в 1 мм, которую применяют в дальнейшем для всех определений аггрегации тромбоцитов.

Определение аггрегации тромбоцитов при помощи АДФ (аденодиндифос- 25 фата).

Помещают 0,4 мл плазмы в силиконовую трубку, снабженную намагниченным силиконовым прутком. Трубку помещают в агрегометр, соединенный с прибором, позволяющим регистрировать изменения оптической плотности. Когда прохождение света достигает постоянного значения, в трубку вводят

0,5 мл раствора, содеожащего

10 мкмоль АДФ.

Аггрегация тромбоцитов вызывает повышение пропускаемости света, которое сопровождается последующим понижением пропускаемости на фазе разъединения.

Максимальное изменение оптической плотности, определенное таким образом по отношению к плазме, не содержащей тромбоцитов, характеризует ин- 45 тенсивность соединения.

Определения выполняют в течение

2 ч после обработки испытуемым соединением..

Определение соединения тромбоци- тов при помощи коллагена.

Раствор ЛДФ заменяют раствором коллагена, взятого из бычьих сухожилий.

Результаты.

Были применены розличные партии по 55 по 20 крыс каждая. Каждая партия получала одну дозу испытуемого производного орально причем то же производное давали в разных дозах от

5 до 100 мг/кг.

Значительная активность проиэводных общей формулы 1 проявляется при дозе 12, 5 мг/кг, тогда как для соединений А и В для получения такой же активности требуются дозы I00 мг/кг.

Результаты сведены в табл. 1 (опыты с АДФ) и 2 (опыты с коллагеном), где показано процентное подавление аггрегации тробмбоцитов, достигнутое по сравнению с контрольным опытом, через 3 ч после обработки испытуемым соединением.

Исследование кичетики аггрегации тромбоцитов.

Проводят эксперимент, относящийся к исследованию кинетики соединений общей формулы 1. Производное 1 и соединение А растворяют в пропиленгликоле и дают крысам интраперитонально в дозе 100 мг/кг веса тела, тогда как контрольные мыши получают интраперитонально только 1 мл/кг пропиленгликоля.

Кровь отбирают через 10 и 60 мин после введения, затем ее центрифугируют для получения обогащенной троибоцитами плазмы.

Лггрегацию тромбоцитов в плазме, вызванную АДФ, определяют при помощи агрегометра Брайстона по нефелометрическому методу Бориа.

Зависимость подавления от времени, полученная в результате этого экс" перииента, представлена в табл. 3.

Табл. 3 показывает, что по отношению к соединению А производное общей формулы 1 значительно сильнее подавляет аггрегацию тромбоцитов активностью и это действие наступает гораздо быстрее.

Противотромбоэная активность.

Изучена по методу экспериментального тромбоза путем экстракорпорального кровообращения.

У крысы, анестезированной путем интраперитонального введения пентобарбитала, обнажены левая аремная и правая внешняя сонная артерия. Шунт составлен из одного центрального и двух боковых катетеров: белуют нить из натурального шелка вводят в центральную часть и кровообращение восстанавливается в течение 20 мин.

1176843!

Таблица 1

Подавление, Х, при дозе, мг/кг

25 50

Производные

)

12,5

84, 1

84,0

83,7

51,0

83,6

83,7

82,6

82,9

47,8

83,6

83,5

82,4

83,0

48,1

82,9

82,8

82,1

81,9

48,0

83,5

82;4

83,2

82,0

48,4

83,9

83,4

83,0

48,7

82,7

S3,2

83,1

82,9

47,6

83,4

83,3

83,1

82,3

48,0

84,0

83,7

83,4

48,4

83,1

Сравнительное соединение Л

63,2

34,6

63,8

35,5

После остановки кровообращения путем наложения зажима нить осторожно вытягивают и медленно взвешивают.

Средний вес одной влажной шелковой нити по предварительному определению 5,10 мг.

Обработку проводят за 48, 24 и

2 ч до начала кровообращения по шунту.

Продукты вводят перорально различным партиям по 20 животных каждая в виде суспензии в 10 мп/кг

5Х-ного гуммиарабика в дозах 12,5

25, 50, 100 и 200 мг/кг.

В табл. 4 сведены результаты опытов с производными 1 и 3 общей формулы 1 и соединением А, представленные в виде средних значений, вычисленных для каждой партии.

Эти данные показывают активность соединений общей формулы 1, которые вызывают значительное уменьшение среднего веса тромбов, начиная с дозы 25 мг/кг, тогда как сравнительное соединение А не проявляет протиI вотромбозного действия даже ири повышенных дозах.

5 Кроме того, опыты показывают, что в противоположность соединениям А и В производные общей формулы 1 не обладают противовоспалительными свойствами и не оказывают сосудорасширяющего действия. Следовательно, они проявляют более избирательные свойства (дополнительная актиность, если она не требуется, может повредить больному).

Токсикологические и фармакологические исследования свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы f и их хорошей толерантности, а также о способности подавлять аггрегацию тромбоцитон и противотромбозных свойствах, которые

1 обуславливают целесообразность их применения при лечении челОВека и

ЖИВОТНЫХ, l0

1176843

Подавление, %, при дозе, мг/кг

Производные

12,5

100

16,8

46,8

86,7

89,6

89,8