8-амино-4,5,5- триметил -7- циан-5,6- дигидро-3н-тиопирано [3,4-с] пиридин-2-тион, обладающий антимутагенной активностью, и способ его получения
(19)SU(11)1226819(13)A1(51) МПК 6 C07D495/04, A61K31/38(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк авторскому свидетельствуСтатус: по данным на 17.01.2013 - прекратил действиеПошлина:
(54) 8-АМИНО-4,5,5- ТРИМЕТИЛ -7- ЦИАН-5,6- ДИГИДРО-3Н-ТИОПИРАНО [3,4-С] ПИРИДИН-2-ТИОН, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
Изобретение относится к новому классу соединений, конкретно к 8-амино-4,5,5-триметил-7-циан-5,6-дигидро-3Н-тиопира- но[3,4-c]пиридин-2-тиону формулы
C
обладающему антимутагенной активностью, и к новому способу его получения. Целью изобретения является нахождение новой гетероциклической системы, обладающей антимутагенной активностью, и разработка нового способа ее получения. П р и м е р 1. 8-Амино-4,5,5-триметил-7-циан-5,6-дигидро-3Н-тиопирано[3,4-c]пи- ридин-2-тион (1). К смеси 14,1 г (0,1 моль) 1,2,2-триметилпиперидона-4 15,2 или 12 мл (0,2 моль) сероуглерода прибавляют при встряхивании 6,6 г (0,1 моль) динитрила малоновой кислоты. После охлаждения образовавшиеся кристаллы отфильтровывают, промывают метанолом и сушат. Выход 22,1 г (83,4%), т.пл. 204-205оС (этанол), Rf 0,50 (хлороформ-эфир, 1:3). Найдено, С 54,20; H 5,67; N 15,85; S 24,21. С12H15N3S2. Вычислено, С 5430; Н 5,69; N 15,83; S 24,16. В ИК-спектре имеются следующие полосы поглощения: 
, см-1: 3110 ср. 3300 с. (NH2); 2225 c. (CN); 1660 с (NHдеф); 1570 с. (С-С). ПМР-спектр (пиридин-d5), 
, м. д. 1,05 [6H, с, 5-(СН3)2] 2,30 (3Н, с, 6-СН3); 2,80 (2Н, с, 4-СН2); 3,90 (2Н, с, 7-СН2); 6,50-7,00 (2Н, широкая полоса, 2-NH2). Масс-спектр (м/е), 265 (М+) 72; 250 (14); 232 (100); 217 (21); 205 (16); 199 (31). Оптимальными условиями, при которых достигается наибольший выход целевого продукта, являются комнатная температура (18-25оС) и молярное соотношение 1,2,2-триметилпиперидон-4, динитрил малоновой кислоты, сероуглерод 1: 1:2. Понижение или повышение температуры, а также изменение количества сероуглерода приводят к уменьшению выхода целевого продукта. П р и м е р 2. Процесс проводят по примеру 1, только берут 12,7 г или 10 мл (0,17 моль) сероуглерода, выход 20,7 г (78,1%), т.пл. 204-205оС (этанол), Rf 0,50 (хлороформ-эфир, 1:3). П р и м е р 3. Процесс ведут по примеру 1, только берут 17,7 г 14 мл (0,23 моль) сероуглерода, выход 21,2 г (80%), т.пл. 204-205оС (этанол). П р и м е р 4. Процесс проводят по примеру 1, но при 15оС, выход 17,5 г (66,0%), т.пл. 204-205оС (этанол). П р и м е р 5. Процесс проводят по примеру 1, но при 28оС, выход 20,5 г (77,3%) т.пл. 204-205оС (этанол). Антимутагенное действие 8-амино-4,5,5-триметил-7-циан-5,6-дигидро-3Н-тио- пирано[3,4-c] пиридин-2-тиона изучали на ауксотрофных штаммах; Escherichia coli P-678-thr, Actinomyces rimosus 222 lys- и Salmonella typhimurium ТА 1535 his методом доза-эффект. Антимутагенную активность определяли по частоте встречаемости ревертантов от ауксотрофного к прототрофному состоянию по локусам, ответственным за синтез треонина, лизина и гистидина. Тест-культуры обрабатывали соединением 1 в дозе 10 ммоль в течение 10 мин. Контролем служила спонтанная мутация. Влияние предложенного соединения на мутации, индуцированные УФ-лучами, изучали на тех же штаммах кишечной палочке и актиномицетах. УФ-облучение проводили бактерицидной лампой БУФ-30 на расстоянии 60 см от источника излучения при постоянном перемешивании в течение 90 с. Опыты проводили в затемненном боксе при красном свете. При комбинированном действии на тест-культуры один вид обработки непосредственно следовал за другим (протектор + УФ-облучение). В этих опытах контролем служила частота мутаций, возникших при обработке объектов УФ-лучами. В качестве позитивного контроля взяты известные протекторы -2-меркаптоэтиламин (МЭА) и цистамин, которые применяли соответственно в дозах 100 и 25 ммоль. Результаты изучения антимутагенного действия предложенного соединения и контрольных протекторов приведены в табл. 1. и 2. Как видно из табл. 1, предложенное соединение оказывает заметное защитное действие, индуцирует мутации у кишечной палочки, актиномицетов и сальмонелл соответственно на 28,38 и 30% меньше, чем возникшие спонтанно в контрольных вариантах опыта. В табл. 2 приведены результаты изучения влияния предложенного соединения и контрольных протекторов на выживаемость клеток кишечной палочки и актиномицетов, а также на мутации, индуцированные у этих культур УФ-лучами. Из таблицы видно, что исследуемое соединение также оказывает заметное протекторное действие. Оно существенно увеличивает выживаемость клеток и уменьшает число мутаций, возникших под влиянием УФ-лучей соответственно на 21 и 47,3% по сравнению с контролем. Острую токсичность предложенного соединения изучали на беспородных белых мышах массой 18-20 г путем внутрибрюшинного введения. Испытывали 6 доз каждого препарата, на каждую дозу брали по 4 мыши. Наблюдение над животными вели в течение одной недели. ЛД50 определяли методом Беренса. Для предложенного соединения ЛД50 составляет 1730,2 мг/кг.
Формула изобретения
обладающий антимутагенной активностью. 2. Способ получения 8-амино-4,5,5-триметил-7-циан-5,6-дигидро-3Н-тиопирано[3,4-с]пиридин-2-тиона формулы
отличающийся тем, что 1,2,2-триметилпиперидон-4 подвергают взаимодействию с динитрилом малоновой кислоты и сероуглеродом.
РИСУНКИ
Рисунок 1
