Способ выявления бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции

 

Изобретение относится к медици не, а именно к диагностике инфекдионных заболеваний, предназначено для выявления скрытого бактерионосительства . Цель изобретения - повышение точности выявления скрытых форм брюшно-тифозного носительства при массовых обследованиях населения атравматическим способом. Для этого на обработанные 0,1%-ным р-ром бычьего сывороточного альбумина, высушенные и фиксированные метанолом покровные стекла (10 шт.) наносят исследуемую мочу. Капли высушивают в токе теплого воздуха и фиксируют 10 мин метанолом . На вымытые от солей мазки наносят кроличью сыворотку, специфическую к L-формам брюшно-тифозных бактерий (в разведении 1:1280). Стекла помещают во влажную камеру, инкубируют 30 мин при 37°С, промывают и высушивают . Затем на мазки наносят антикроличьи антитела с введенным в их состав радиоактивным изотопом (в разведении 1:100). Подсчитывают радиоактивность каждого образца.в v-спектрометре. Аналогично и одновременно производят анализ контрольных образцов мочи заведомо здоровых людей . Результаты статистически обрабатывают . е (Л со со NU i со

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU» 139414 сю 4 G 01 N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕГЕНИЯ

Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4036922/28-14 (22) 18.02.86 (46) 07. 05. 88. Бюл. № 1 7 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. почет. акад. Н.Ф.Гамалеи и 2-й

Московский государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова (22) Э.Н.Князева, Т.Д.Левина, Л.В.Погорельская, Н.В.Алексеева и А.Л.Горелов (53) 615,36(088.8) (56) Беседова H.Н. и Сомов Г.П. Гигиена, эпидемиология, микробиология и иммунология. Прага, 1972, т. 6, № 3, с. 302-307. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА БРЮШНО-ТИФОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ (57) Изобретение относится к медици» не, а именно к диагностике инфекционных заболеваний, предназначено для выявления скрытого бактерионосительства. Цель изобретения — повышение точности выявления скрытых форм брюшно-тифозного носительства при массовых обследованиях населения атравматическим способом. Для этого на обработанные 0,17-ным р-ром бычьего сывороточного альбумина, высушенные и фиксированные метанолом покровные стекла (10 шт.) наносят исследуемую мочу. Капли высушивают в токе теплого воздуха и фиксируют 10 мин метанолом. На вымытые от солей мазки наносят кроличью сыворотку, специфическую к L-формам брюшно-тифозных бактерий (в разведении 1:1280). Стекла помещают во влажную камеру, инкубируют 30 мин при 37 С, промывают и высушивают. Затем на мазки наносят антикроличьи антитела с введенным в их состав радиоактивным изотопом I (в разведении 1:100). Подсчитывают радиоактивность каждого образца.в

1спектрометре. Аналогично и одновременно производят анаЛиз контрольных образцов мочи заведомо здоровых людей. Результаты статистически обрабатывают.

1394143

Изобретение относится к медицине, именно к диагностике инфекционных аболеваний, и может быть использовао для выявления скрытого бактерио5 йосительства.

Целью изобретения является повышение точности выявления скрытых форм брюшко-тифозного носительства при массовых обследованиях определенных 10 ,групп населения атравматическим спо1 собом.

Способ осуществляется следующим

1 образом.

Для исследования у больных или возможных бактерионосителей берут на анализ мочу. На предварительно обработанные О, 1 -ным раствором бычьего сывороточного альбумина (БСА) высушенные и фиксированные метанолом по- 20 кровные стекла (10 шт.) наносят по 0,03 мл исследуемой мочи. Капли высу1 шивают в токе теплого воздуха и фикi сируют 10 мин метанолом. Зафиксиро",, ванные мазки отмывают от солей в те- 25 чение 5 мин проточной водопроводной водой. После этого мазки высушивают и наносят на них по 0,015 мл кроличьей сыворотки, специфической к Lформам брюшно-тифозных бактерий (в 30 разведении 1:1280). Стекла помещают во влажную камеру, инкубируют 30 мин при 37 С, промывают 20 мин проточной водой и высушивают. Затем на мазки наносят антикроличьи антитела с вве" денным в их состав радиоактивным изотопом 1 I (й разведении 1:100) . Обрабоганные стекла также инкубируют во влажной камере при 37 С в течение

30 мин, промыва1от 20 мин проточной 40 водой и высушивают. Каждое покровное стекло опускают в специальные пробирки и подсчитывают радиоактивность каждого образца в у-спектрометре. Одновременно с определяемыми образцами аналогичным образо . производят анализ контрольных образцов мочи заведомо здоровых людей. Результаты подсчета радиоактивности контрольных и опытных образцов обрабатывают статистически по методу Стьюдента, используя критерий достоверности t, для оценки результата.

Пример 1. Ч.B.T., 75 лет. История болезни У 48749. В 19б7 r. npu обследовании по контакту у нее была выделена из кала культура S.typhi

Повторные исследования дали также положительные результаты, что бьито расценено как хроническое бактерионосительство. С этого времени и по 198 1 r. постоянно выделяла возбудитель. После проведенного в 1981 r. лечения антибактериапьными средствами обнаружить

S.typhi в посевах крови, кала и мочи не удалось. Результаты серологического обследования (РПГА, иммуноферментный метод, реакция коагглютинации) были также отрицательными.

Только предложенным способом с использованием иммунной сыворотки к

Ь-формам S. ТурЫ в пробах мочи удалось выявить специфический антиген.

Пример 2. Б.Т.П., 32 лет. История болезни Ф 32546. В 1974 r. перенес брюшной тиф в стертой форме, подтвержденный выделением копрокультуры. Через 2 недели после выздоровления вновь начап выделять S.Typhi.

С этого времени сформировалось хроническое бактерионосительство с периодическим выделением возбудителя.

В момент обследования находился в фазе латенции: все бактериологические (посев крови, костного мозга, кала, мочи) и серологические (РПГА, с

0- и ВИ-антигенами; реакция Видаля, реакция коагглютинации) исследования дали отрицательный результат. Только при исследовании образцов мочи предложенным способом с иммунной сывороткой против L-форм S.typhi был выявлен антиген L-форм S Typhi и установлен факт хронического бактерио" носительства.

Указанным способом параллельно было проведено исследование 11 образцов мочи от хронических бактерионосителей в фазе латенции с другими методами диагностики бактерионосительства.

Показано, что посев мочи на среды для бактериальных форм сальяонелл ни в одном случае не дал положительного результата, при посеве на специальные среды для выделения Ь-форм в одном случае выделена культура сальмонелл. С помощью РНГА сальмонеллезный антиген определен в тех же объектах в трех случаях. Применение радиоизотопного метода с сывороткой к бактериальной форме сальмонелл дало два положительных и четыре сомнительных результата, а с сывороткой к Ь-форме — положительные результаты во всех

11 случаях. 13941

Формула изобретения

Составитель Г. Крюкова

Техред М.Моргентал Корректор А.Зимокосов

Редактор Г.Волкова

Заказ 2215/41

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Таким образом, предложенный способ позволяет быстро и точно в течение 3 ч диагностировать брюшно-тифозное бактерионосительство. Испольэо5 вание этого способа позволяет диагностировать хроническое бактерионосительство также и в фазе латенции, т.е. в тех случаях, когда все остальные известные способы выявления бактерионосительства дают отрицательный ответ ° Предложенный способ позволяет выявлять бактерионосительство не только измененных форм (L-форм), но и бактериальных форм возбудителя 15 брюшного тифа.

Предложенный способ использует минимальное количество ингредиентов.

Кроме того, предложенный способ ,дает возможность экономить питательные среды при плановых массовых обследованиях определенных групп населения, подлежащих регулярной проверке на бактерионосительство, что черезвычайно важно для решения вопросов 2б эпидемиологии данной инфекции.

Поскольку отбор образцов мочи не связан с травмированием пациентов и не представляет технических трудностей, предложенный способ является удобным для проведения массовых обследований на бактерионосительство.

Способ обеспечивает наиболее полное выявление брюшно-тифозного бакте-!

43 4 рионосительства благодаря высокой точности эа счет выявления в латентный период болезни объективности . оценки результатов, причем достоверность полученных результатов подтверждается статистической обработкой данных.

Предложенный способ может быть автоматизирован, что позволит снизить затраты труда при проведении массовых обследований, причем при необходимости обработка полученных результатов может производиться с помощью 3ВМ.

Способ выявления бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции путем проведения иммунной реакции между исследуемым материалом и брюшно-тифозной антисывороткой с последующим определением наличия брюшно-тифозного антигена с помощью метки, о т л и -. ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности за счет выявления антигенов возбудителя в латентный период носительства, в качестве исследуемого образца используют мочу и проводят иммунную реакцию с антисывороткой к L-формам S.typhi, а выявление брюшно-тифозного антигена осуществляют иммунорадиометрическим методом.