Способ прогнозирования инфекционных осложнений у больных ревматизмом с протезированными клапанами сердца

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ .

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я) 4 G 01 N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 !

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTPA (21) 4039820/28-14 (22) 19,03,86 (46) 07.10.88. Вюл. Ф 37 (71) Свердловский государственный медицинский институт (72) Г.Б. Колотова, Э.М. Идов, Г.С. Мармолевская, М.С. Савичевский и А.О. Маханек (53) 616.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 1009428, кл. А 61 В 10/00, 1980 ° (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У БОЛЬНЫХ PEBNATH3MOM С ПРОТЕЗИРОВАННЫМИ КЛАПАНАМИ

СЕРДЦА (5/) Изобретение относится к медицине, точнее кардиохирургии. Цель

„„SU„„1429027 А1 изобретения — ранняя диагностика и упрощение способа. Способ позволяет до операции по поводу протезирования клапанов сердца у больных ревматизмом прогнозировать инфекционные осложнения путем определения содержания Тлимфоцитов в крови и фагоцитарной активности нейтрофиллов в крови НБТтесте. По линейным уравнениям А

= -9,647 + 0,010 ° Х + 0,406 Х, А2 = -59107 + 0,008 х1+ 09132 .Х29 где Х 1 — абсолютное число Т-лимфоци" тов (Е=РОК); Х > - фагоцитарная активность нейтрофилов в НБТ-тесте, Й, определяют два показателя. При значе нии А, А прогнозируют осложненное ф течение послеоперационного периода.

1 ил., 1 табл.

1429027

Изобретение относится к медицине, ф именно к кардиохирургии. !

Целью изобретения является ранняя диагностика и упрощение способа.

На чертеже схематически изображен дискриминантный анализ.

Способ осуществляется следующим ,образом.

Методика определения количества

Т-лимфоцитов в периферической крови методом розеткообраэования с эритроцитами барана (Г-РОК) (по Jondal et а1, 1972) .

В пробирку с гепарином забирают ,2 мл венозной крови больного. Кровь ,:наслаивают на верографин (2 мл с удельным весом 1,077), центрифугируют, 30 мин при 1500 об/мин. Отсасывают кольцо лимфоцитав н центрифужную 20 пробирку и отмывают средой 199 2 раза по 7 мин при 1000 об/мин. Подсчитывают количество Т-лимфоцитов (должно быть не менее 1000000--1500000 в

1 мл). В центрифужную пробирку вносят25

О, 1 мл взвеси лимфоцитов и О, 1 мл

0,5%-ной взвеси зритроцитов барана, 1 помещают на 15 мин в термастат при о

37 С, далее центрифугируют 3 мин при

1000 об/мин и оставляют B холодильнике ) на 1 ч. К 0,3 мл взвеси добавляют

0,1 мл 0,6Ж-ного глютарового альдегида,.пипетируют и оставляют для фиксации на 20 мин при комнатной температуре. Добавляют физиологический ра- 35 створ, центрифугируют 5 мин при !

1000 об/мин, физиологический раствор сливают, а осадок (0,2-0,5 мл взвеси) наносят на предметное стекло, высушивают и окрашивают по Романовскому, Ро- 40 эеткообразующей кпеткой считается лимфоцит, присоединивший 3 и более эритроцита барана. Подсчет производится на 100 лимфоцитов в 7. и затем определяется абсолютное количество Т-лимфо- 45 цитов в 1 мкл крови.

Методика определения фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАЛ) в НБТтесте (по Ра& et al, в модификации

Ал.А. Демина).

Кровь в количестве 0,9 мл забирают в пробирку с 0,1 мл 5Х-ного цитрата натрия, смешивают, встряхивают, центрифугируют 8 мчн при 1500 об/мин, сливают плазму, слой лейкоцитов переносят силиконизированной пастеровской пипеткой в силиконизированную пробирку и добавляют равный объем раствора

НБТ, смешивают, инкубируют 30 мин на

I водяной бане (при 57 С) и 15 мин при о

i8-2О С на воздухе. Делают мазки на стеклах, высушивают на воздухе, фиксируют легким жаром и окрашивают дополнительно 0,1Х-ным раствором нейтрального красного в течением мин.

Подсчет клеток (100 нейтрофилов) осуществляют под микроскопом с масляной иммерсией. НБТ-позитивными считаются только неповрежденные нейтрофилы с четко определяемыми клеточными мембранами, у которых в цитоплазме имеются крупные включения формазана,рав, ные или превосходящие размер ядерных долей.

Приготовление НБТ-краски. Готовят

2 буфера: первый — 0,2 M раствор однозамещенного фосфата натрия; второй — 0,2 М раствор двузамещенного фосфата натрия.

Конечный рабочий раствор получаем добавлением 100 мл дистиллированной воды к 20 мл первого и 80 мп второго раствора. рН конечного буфера 7,2.

Краска готовится путем растворения кристаллического НБТ в фосфатном буфере до концентрации 0,2 .

Затем по линейным уравнениям

А =-9,647+0,010хХ1+0,406хХ, {1)

А =- 5,107+0,008хХÄ+0,132хХ, (2) где Х, — абсолютное число Т-лимфоцитов (E-РОК) в 1 мкл крови;

X — фагоцитарная активность нейтрофилов в НБТ-тесте, 7, определяют два показателя, которые свравнивают между собой. При значении A, a А прогнозируют благоприятное течение послеоперационного периода, а при значе нии А„ А прогнозируют осложненное течение послеоперационного периода.

Указанные показатели получены путем дискриминантного анализа лабораторных данных. Была поставлена задача нахождения решающего правила для прогноза послеоперационных инфекционных осложнений. Грчппы больных с осложенным и не осложненным течением послеоперационного периода до операции статистически достоверно (P C 0,01) отличались по двум иммунологическим показателям: ФАЛ и Е-РОК. Эти показатели и были включены в анализ для нахождения решающего правила. В результате дискриминантного анализа были получены две дискриминантные функции: А, и А . Укаэанные дискриминантные функции разделяют признаковое пространство на 3 области: 1 — где

142902 предполагается развитие инфекционных осложнений; 2 — где предполагается гладкое течение послеоперационного периода; 3 — пограничная область.

Для того, чтобы определить, будут или нет развиваться у конкретного больного инфекционные осложнения, значения Х и Х подставляют в ука1 Х занные уравнения и находят значение

А, и А . Физический смысл А1 и А — это расстояние в пространстве признаков от классифицируемого объекта (т.е. конкретного больного) до границ между областями 1-3 и 2-3. В за 15 висимости от того, какое расстояние больше, определяем, в какой области (1-й или 2-й) находится объект. Если объект находится в 3-й области, то с помощью дискриминантных функций on- 20 ределяем, к границе с какой областью (1-й или 2-й) он расположен ближе.

Статистическая обработка проведена на ЭВМ-ЕС-1022 по программе DISCR пакета прикладных программ SSP, 25

Для исследованных групп больных указанные показатели являются постоянными величинами.

Пример 1. Больная И1 44 лет, . с диагнозом: ревматизм, неактивная 0 фаза. Сочетанный митральный порок с преобладанием недостаточности, IV стадия, IV функциональный класс. Больна в течение 22 лет, последние 3 года прогрессировали признаки недостаточности кровообращения с отсутствием эффекта от проводимой консервативной терапии. Исходные показатели клеточного иммунитета были снижены: число

Т-лимфоцитов составило 998 клеток в

1 мкл крови,фагоцитарная активность нейтрофилов в НБТ-тесте 4Ж. При реше. нии уравнения (t) с учетом перечисленных показателей получен результат

1,957,а уравнения (2) 3,405. 1,957 (45 (3,405, что позволило предполагать осложненное течение послеоперационно го.периода. Затем была произведена операция имплантации искусственного клапана МКЧ-3-25 в митральную позицию.50

На 7-е сут после операции у больной возникло нагноение послеоперационной раны с последующим развитием гнойного медиастинита.

Пример 2. Больная С., 47 лет.

Поступила с диагнозом: ревматизм, .неактивная фаза ° Недостаточность митрального клапана, IV стадия IV функциональный класс. Бып имплантирован

4 искусственный клапан МКЧ-3-25 в митральную позицию. До операции содержание Т-лимфоцитов составило 2032 клеток в 1 мкл крови, фагоцитарная активность нейтрофилов в НБТ-тесте 16Х.

При решении уравнения (1) получен результат 17,169, а уравнения (2)

13,261. Таким образом, значение уравнения (1) больше значения уравнения (2), что дало воэможность прогнозиро-, вать благоприятное течение послеоперационного периода, которое и имело место у данной больной.

Предлагаемый способ прогнозирования йрименен у 50 больных, в 75Х случаев прогноз совпал с истинным течением послеоперационного периода.

Предлагаемый способ прогнозирова" ния инфекционных послеоперационных осложнений у больных ревматизмом с протеэированными клапанами сердца дает возможность прогноза указанных осложнений еще до операции; в условиях клиники это может диктовать необходимость проведения комплекса лечебно-профилактических мероприятий, направленных на предупреждение развития осложнений, в дооперационном периоде.

Данный способ имеет достаточно высокую точность прогноза (см.табл.) и, кроме того, прост в выполнении (отсутствует взятие биоптата).

В таблице приведены показатели клеточного иммунитета ФАЛ и Е-POK до операции у больных с гладким и осложненным течением послеоперационного периода N+m.

Формула изобретения

Способ прогнозирования инфекционных осложнений у больных ревматизмом с протезированными клапанами сердца путем определения в биологическом материале Т-лимфоцитов, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью ранней диагностики и упрощения способа, исследование проводят в периферической крови методом реакции розеткообразования, дополнительно определяют фагоцитарную активность нейтрофилов в НБТтесте, рассчитывают первый показатель исхода заболевания по формуле

А, =-9,647 + 0,010 -X,+ 0,406-Х, а второй показатель по формуле

А =-5,107 + 0,008-Х „ + 0,132-Х, 5 1429027 6 первый показатель исхода и при значении первого показателя заболевания; больше второго прогнозируют благовторой показатель исхода приятное течение послеоперационного заболевания; периода, а при значении первого пока5 абсолютное число Т"лимфоци- зателя меньше второго — осложненное тов (Е-РОК) в 1 мкл крови; . течение. фагоцитарная активностЬ нейтрофилов в НБТ-тесте, %, ФАЛ, % 7, 70+0, 66 4, 14+0, 83 (0,01

Е-РОК, абс. 1630,00+106,31 1150,33+95,02 c 0,01

Составитель Л. Шилина

Техред М.Дидик, . коРРектоР М. Шароши

Редактор С ° Пекарь

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 5118/41

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 где А .—

A,— й

Х

Показатель Группа с глад" ким течением послеоперационного периода (n=28) Группа с инфекционными осложнениями после операции (n = 7)