Способ определения изоиммунологической совместимости крови донора и реципиента

 

Изобретение относится к медицине , точнее к гемотрансфуэиологии касается способа определения изоиммунологической совместимости крови донора и реципиента. Цель изобретения - предотвращение посттрансфузионных реакций. Дпя этого проводят реакции агглютинации по зритрацитарноантигенным системам, определяют совместимость по бепково-плазменным аитигенньм системам, применяя реакции связывания комплемента в .смешанньк образцах плазм крови реципиента и донора. Оsg

Соаэ СОВЕТСНИХ

СОЦЕЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСЩБЛИН

А1

ИЕ ПИ

ВСЕСШНА

ПМЕЫПВО - т г !.45 !!й

4ййа

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НРМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (46) 15.09.90. Бюл. М- 34 . (21) 3926688/28-14 (22) 10.07.85 (71) Московский областной научноисследовательский клинический институт им. М.Ф.Владимирского (7?) Л.A.Ñóìáàòîâ и Л.И.Юновидова (53) 615. 373 (СЬ:;-,8) (56) Дмитриева Ь.А,, Шаноян С.А. °

Самсонова Н.Н., Самуилова Д.Ш. Методы исследования и коррекции иммунологических осложнений в сердечнососудистой хирургии. Методические рекомендации.М., 1981. (51)5 С 01 Ы ЗЗI 48, ЗЗ/53 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЯЗОИМИУНОЛОГИЧЕСКОЙ СОВМЕСТИМОСТИ КРОВИ ДОНОРА

И РЕЦИПИЕНТА (57) Изобретение относится к медицине, точнее к гемотрансфуэиологии, касается способа определения изоиммунологической совместимости крови донора и реципиента. Цель изобретения — предотвращение посттрансфузионньм реакций. Для этого проводят реакции агглютинации по эритрацитарноантигенным системам, определяют совместимость по белково-плазменным ан-

6 тигенным системам, применяя реакции связывания комплемента в смешанных образцах плазм крови реципиента и донора, 14 26236

Ю

Изобретение относится к медицине, в частностй к гемотрансфуэиологии и касается способа определения иэоиммунологической совместимости крови донора и реципиента.

Цель изобретения — предотвращение посттрансфуэионных реакций..

Конкретный пример осуществления способа. 10

Для операций на сердце с искусственным кровообращением донорскую кровь подбирали следующим, образом.

У больного (реципиента) перед операцией определяли группу по системе 15

ABO и реэусную принадлежность крови.

То же проделывали с кровью каждого донора. Для выявления сенсибилиэации организма больного с появлением реэусных (неполных) и других антител, 20 .если г анамнезе имелись указания на ранее перенесенные гемотрансфузии, то эа неделю до операции проводили тестирование по Кумбсу. Непосредственно перед операцией определяли ин- 25 дивидуальную совместимость крови каждого донора в отдельности с кровью реципиента по антителам системы

ABO, а также И,N. Эту пробу ставили на плоскости при комнатной темпера- 30 туре в солевой среде, эа агглютипа4ией следили и течение 5 мин. При ! этом па стекле сначала смешивали эритроциты каждого донора в отдельности с сывороткой крови больного, затем эритроциты больного с сыворот- кой крови каждого донора. Появление агглютинатов эритроцитой в обесцвеченной жидкости означает несовместимость крови данного донора с кровью 40 больного. Далее определяли совместимость крови доноров с кровью реципиента по резус-фактору, причем это .делали с помощью 2 проб, а именно с помощью применения желатины (B

45 . пробирках) и с помощыа применения непрямой пробы Кумбса. Пробы с желатиной ставили в термостат в агглютинационных пробирках (по числу доиоров) при 46-48 С на 10 мии. Появление в пробирках плавающих хлопьев озиачало несовместимость. Для постановки непрямой пробы Кумбса сначала трижды отмывали эритроциты каждого донора в центрифужных пробирках, затем отмытые эритроциты инкубировали с сывороткой реципиента в термоста о те при 37 С .в течение 45 мин, после чего инкубиронанные эритроциты вновь подвергали трехкратному отмыванию и к отмЬ|тым эрнтроцитам добавляли сыворотку для пробы Кумбса, представляющую собой кроличью антисыворотку к глобулинам человека. Если при размазывании на стекле образовывались агглютинаты эритроцитов, то кровь такой пробы признавалась несовместимой по системе резус- и другой специфичности.

Дополнительно определяли совместимость каждого донора в отдельности с реципиентом по плаэменно-белковым антигенным системам, используя с этой целью реакцию связывания комплемента (РСК). Техника поставноки

РСК в предлагаемом нами способе за ключалось в следующем.

В сухие центрифужные пробирки набирали по 8-10 мл крови реципиента и каждого донора в отдельности. Пробы крови центрифугировали 10 мин до образования прозрачной плазмы.

Из каждой пробирки в видалевские пробирки переносили по О, 1 мл плазмы и добавляли по 0,4 мл физиологического раствора. В эти же пробирки добавляли по 0,5 мл разбавленной физиологическим раствором (1:5) плазмы реципиента. К набору видалевских пробирок (по числу доноров) в штатив добавляли еще одну пробирку для контроля положительной реакции связывания комплемента, в которой в таких же объемах соединяли плазму одного из доноров с сывороткой для реакции Кумбса. Штатив со всеми пробирками ставили в холодильник на

18 ч для инкубации. Параллельно го- . товили ЗХ-ную взвесь бараньих эритt роцитов в физиологическом растворе, для чего у животного, путем венопункции забирали 5 мл крови в центрифужную пробирку. Кровь центрифугировали в течение 5 мин, образовавшуюся сверху плазму сливали, а эритроциты на дне пробирки подвергали трехкратному отмыванию физиологическим раствором. Для этого пробирку доверху . наполняли физиологическим раствором, центрифугировали и раствор сверху сливали, оставляя на дне пробирки эритроциты. В заключение для получе" ния 37.-ной взвеси эритроцитов в чистую пробирку переносили 2 капли эритроцитов и 10 капель фиаиологичвского раствора.

14 2623б

Формула изобретения

Составитель С.Мельникова

Техред М,Дидык Корректор О. Кравцова

Редактор Н.Козлова

Заказ 3325 Тираж 527 Подписное

BHHHFfH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. д. 4/5

ЮЮ Ю

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Далее следовал основной этап постановки РСК. Иэ холодильника извлекали штатив с набором пробирок со смешанной плазмой реципиента и каждо5

ro донора в отдельности. В каждую из этих пробирок добавляли по 0,5 мл взвеси эрнтроцитов барана. В контроль ной пробирке содержалось по 0,5 мл . плазмы одного нэ доноров, сыворотка для 10 реакции Кумбса и взвесь эритроцитов барана. Штатив с этими пробирками ставили в термостат для инкубации о в течение.60 мин при 37 С, после чего пробирки извлекали и оценивали результаты реакции связывания комплемента. Реакцию признавали положительной, если эритроциты барана осели на дно пробирок и не подверглись гемолиэу; если же произошел их гемолиэ, 20 то РСК считали отрицательной, Гемализ эритроцитов может быть полный (лаковая кровь) или частичный. В последнем случае степень ге-: молиза оценивается знаками плюс (от 25 одного до пяти) . При положительной

РСК кровь данного донора несовместима с кровью реципиента, при отрицаФ тельной реакции связывания комплемента — совместима с кровью реципиента, и может быть перелита ему. Следует подчеркнуть, что данное тестирование определяет совместимость лишь по белково-плазменным антигенным си стемам, поскольку при этом можно судить, что при смешивании плазмы донора и реципиента произошло (положительная PCK) или не произошло взаимодействие между антигенами и антителами совпадающей иммунологической 40 специфичности, содержащимися в укаэанных плазмах. Если взаимодействие происходит, то образуются комплексы антиген-антител и на поверхности . комплексов фиксируются молекулы ком- 45

4 племента. В отсутствие свободного комплемента в.среде гемолиэ эритроцитов барана не может произойти. .На 500 кардиохирургических опера ций, выполненных в условиях искусственного кровообращения (разновидность массивной гемотрансфузии) с общепринятым агглютчнационным тестированием совместимости крови доно- ров и реципиентов по эритроцитньм антигенным системам ЛВО, резус и др., т.е. беэ применения РСК постстрансфузионные осложнения типа синдрома гомологичной крови встречались в

2,5Х случаев. В сопоставляемой серии операций в числе 85, в которых для искусственного кровообращения в иэоиммунологическом подборе совместимой донорской крови применялись те же методики агглютинационного тестирования и дополнительно для совместимости по плазменно-белковым ан» тигенным системам применялись реакции связывания комплемента, ни в одном случае пострансфузионных осложнений типа синдрома гомологичной крови не наблюдалось (OX).

Способ определения изоиммунологической совместимости крови донора н реципиента путем проведения arrmo- . тинационных реакций .по эритроцитарно-антигенным системам, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью предотвращения посттрансфуэионных реакций при массивных гемотрансфуэиях, дополнительно определяют совместимость по белково-плазменным антигенным системам с применением реакции связывания комплемента в смешан ных образцах плазм крови реципиента и донора.