Способ количественного определения агрегационной и дезагрегационной способности эритроцитов

 

Изобретение относится к медицине . Цель изобретения - повышение точности способа при исследовании плазмы с .высоким содержанием липидов. Регистрируют вязкость плазмы крови и вязкость плазмы после добавления эритроцитов, раствора фибриногена и гаммаглрбулина. Затем рассчитьгоают. агрегационную способность эритроцитов и определяют скорость сдвига, характеризующую гидродинамическую дезагрегацию эритроцитов. Способ позволяет изучать реологические свойства крови с учетом поведения клеток в потоке.

СОЮЗ СО8ЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 G 01 N 33 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4122409/28-14 (22) 19.09.86 .(46) 28.02.89. Бюл. Ф 8 (71) Киевский научно-исследовательский институт кардиологии им. акад. Н.Д. Стражеско и Киевский институт усовершенствования врачей (72) Н.К. Фуркало, А.И. Романенко и Т.И. Иващенко (53) 615.476(088.8) (56) Лакин К.М. и др. Фармакология и токсикология, 1975, 2, 188-193. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АГРЕГАЦИОННОЙ И ДЕЗАГРЕГАЦИОННОИ СПОСОБНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественной оценки агрегации и дез-.агрегации эритроцитов, имеющих важное значение для диагностики нарушений реологических свойств крови при ря-де патологических состояний, в том числе и ишемической болезни сердца (ИБС), а также для оценки эффективности проводимого лечения.

Цель — повышение точности способа при исследовании плазмы с высоким содержанием липидов.

Способ осуществляют следующим образом.

Забор крови посредством пункции локтевой вены в количестве 9 мл.

9 мл крови стабилизируют добавлением

1 мл 3,8Х-ного раствора цитрата натрия.Я0» 1462196 а1 (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения — повышение точности способа при исследовании плазмы с высоким содержанием липидов. Регистрируют вязкость плазмы крови и вязкость плазмы после добавления эритроцитов, раствора фибриногена и гаммаглобулина. Затем рассчитывают агрегационную способность эритроцитов и определяют скорость сдвига, характеризующую гидродинамическую дезагрегацию эритроцитов. Способ позволяет изучать реологические свойства крови с учетом поведения клеток в потоке.

Стабилизированную кровь центрифугируют при 1000 об/мин 10 мин. Затем отделяют обогащенную тромбоцитами плазму и центрифугируют ее повторно М при 3000 об/мин 15 мин. При помощи фЬ пипетки отсасывают плазму, не содер- фф жащую форменных элементов крови. фф

Эритроцитарную взвесь приготавливают в соотношении 1:400 в плазме,не содержащей форменных элементов крови, предварительно трижды отмыв эритроциты в физиологическом растворе. Количество эритроцитов в полученноЪ а суспензии контролируют на электронном счетчике для подсчета форменных элементов крови "Picoscale PS-4" (количество эритроцитов) 4300000 +

+ 200000 в 1 мл).

Приготовление 57-ного раствора фибриногена: 90 мг сухого фибриногез 146219 . : на, приготовленног о из человеческой

: крови, разбавляют 2,5 мл дистиллированной воды.

10Е-ный раствор g-глобулина выпускается Киевским заводом бактерийных препаратов. Изменение вязкости плазмы в количестве 2,7 мл на микроэлектрореометре "ВИР-79 МЭ" в диапа-. зоне скорости сдвига 0,7-121 с .

После измерения вязкости плазмы в нее добавляют О,! мл эритроцитарной . суспензии 0,2 мл 5Х-ного раствора

: - фибриногена и 0,2 мл 10Х-ного раст-! вора -глобулина и измеряют вяз-! кость полученной суспензии в диапазо, .не скоростей сдвига 0,7-121,0 с .

30 (а-в) 100/ (2 48 спз — 2 07 спз) к 1007. в 2,07 спз

55 . (а-в), 100Х

АЭ в (2 1 спз — 1 45 спз) 1007

Х

= 447.

1,45 спз — 24Х.

Расчет показателей проводят по !

1 формуле

1 ! ! ,:. где АЭ вЂ” агрегационная способность эритроцитов в процентах; а — .вязкость суспензии эритроцитов в плазме с добавлением фибриногена и -глобулина в — вязкость плазмы.

Определение скорости сдвига, характеризующей гидродинамическую дегазацию эритроцитов.

20 (а-в) АЭ = — — — х 1007, в

Таким образом, агрегационная способность эритроцитов равна 207..

При построении графика зависимости вязкости "чистой" плазмы и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами от скорости сдвига отмечено, что при 58 . с различие вязкости двух проб равно 67.. Таким образом, при 45

58 с произошла гидродинамическая дезагрегация эритроцитов.

Пример 2. Больной Л.

Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7 с равна 1,68 спз.

Вязкость плазмы с агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига

-1

0,7 с ранна 1,9 спз.

Отсюда (а — в) 1007

АЭ в (1 9 спз — 1 68 спз) - 1007.

А .2

1,68 спз

Скорость сдвига, при которой происходит разрушение эритроцитарных агрегатов, можно определить расчетным или графическим методом.

Расчетный метод заключается в вычислении процента прироста вязкости суспензии агрегировавших эритроцитов на всех фиксированных скоростях сдвига в диапазоне 0,7-121,0 с (т.е. при 0 7; 1 8; 3 8; 6 3; 8; 13; 17;

28; 35; 58; 121 с ). Скорость сдвига, при которой различие в величинах равно 6Х свидетельствует о наступлении дезагрегации.

Графический метод заключается в построении графика зависимости вязкости от скорости сдвига (на оси абсцисс откладываются величины вязкости, на оси ординат — величины скорости сдвига). Скорость сдвига, при которой различие вязкости плазмы, лишенной форменных элементов, и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами будет несущественным (порядка 6Х), указывает на дезагрега- . цию.

Пример 1. Больной А. Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7 с = — 2,07 спз.

Вязкость плазмы с агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига

0,7с = 2,48 спз.

Агрегационная способность эритроцитов равна 247..

При построении графика зависимости вязкости "чистой" плазмы и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами от скорости сдвига отмечено, что при 13 с отличие вязкости двух

1 проб равно 6Х. Это свидетельствует о том что при 13 с произошла гидродинамическая дезагрегация эритроцитов.

ПримерЗ. Больной Ч.

Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7 с равна 1,45 спз.

Вязкость плазмы с агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига

0,7 с равна 2,1 спз °

Отсюда

Составитель А. Лычкова

Техред М.Ходанич Корректор.С. Патрушева

Редактор Н. Горват

Тираж 788

Заказ 667/41

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðoä, ул. Гагарина, 101

5 14

Агрегационная способность эритроцитов равна 44Х.

При построении графика зависимости вязкости бестромбоцитарной плазмы и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами от скорости сдвига отмечено, что при скорости сдвига 58 с различие в вязкости двух сред равно

67, т.е. скорость сдвига 58 с характеризует гидродинамическую дезагреrацию эрнтроцитов.

Предлагаемый способ позволяет с достаточной точностью количественно определять агрегационную способность и дезагрегационные свойства эритроцитов с учетом поведения клеток в потоке. Способ прост, не только не требует дополнительных материальных затрат, и дорогостоящей аппаратуры, но и позволяет с большой экономической эффективностью использовать рота- ционный вязкоэиметр, расширив сферу его применения при изучении реологических свойств крови.

62196 6 формула изобретения

Способ количественного определения агрегационной и девагрегационной способности эритроцитов, включающий отделение плазмы и добавление в нее эритроцитарной взвеси, обработку полученной смеси растворами фибриногена и -глобулина, о т л и ч а ю -, шийся тем, что, с целью повышения точности способа при исследовании плазмы с высоким содержанием липидов, регистрируют вязкость плазмы и полученной смеси и агрегационную способность эритроцитов определяют по проценту увеличения вязкости агрегированной суспензии по отношению к вязкости бестромбоцитарной плазмы

20 при скоростях сдвига 0,7-13 с, а дезагрегационную способность эритроцитов — по величине скорости сдвига, вызывающей гидродинамическую дезагрегацию клеток °