Способ определения токсичности сыворотки крови

 

Изобретение относится к области медицины ,в частности, к клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при определении токсичности сыворотки крови при заболеваниях, связанных с эндогенной интоксикацией. Цель изобретения - повышение точности способа. Одинаковые объемы сыворотки крови пациента и взвеси сперматозоидов быка смешивают, инкубируют 15-20 мин и окрашивают зозином, затем расчитывают процент погибших клеток и сравнивают с таковым в контроле.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Н АВТ0РСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4265162/28-14 (22) 17.03.87 (46) 30.04.89. Бюл. У 16 (71) Тернопольский государственный медицинский институт и Тернопольская городская больница N 1 (72) В.В. Бигуняк, Н.Д. Бех, А.Н. Романюк и И.В. Мурованый (53) 612.015 (088 8) (56) Авторское свидетельство СССР

Ф 1024840, кл. G 01 N 33/48, 1983. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ

СЫВОРОТКИ КРОВИ

Изобретение относится к медицине и биологии, в частности к клинической лабораторной диагностике, и может быть быть использовано в клинических условиях при определении токсичности сыворотки крови при различных заболеваниях, а также в экспериментальных условиях при моделировании заболеваний с эндогенной интоксикацией на животных.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Смешивают равные объемы сыворотки крови больного и сперматозоидов быка, окрашивают через 15-20 мин сперматозоиды раствором эозина и определяют процент погибших сперматозоидов в мазке.

Такое выполнение способа путем постановки реакции взаимодействия сыворотки крови и сперматозоидов быка позволяет по количеству погибших (57) Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано при определении токсичности сыворотки крови при заболеваниях, связанных с эндогенной интоксикацией. Цель изобретения — повышение точности способа. Одинаковые объемы сыворотки крови пациента и взвеси сперматозоидов быка смешивают, инкубируют 15-20 мин и окрашивают зозином, затем рассчитывают процент погибших клеток и сравнивают с таковым в контроле. 1 табл, сперматозоидов определять степень токсичности сыворотки крови как в момент начала заболевания, так и в процессе лечения.

Способ осуществляют следующим образом.

Берут одинаковые объемы (0,04 мл, 2 капли) сыворотки крови больного и сперматозоидов быка, предварительно растворенных в 2,9% раствора цитрата натрия в 1 мл растворяют одну стандартную гранулу, содержащую

15 млн. сперматозоидов, и смсшивают их. Через 15-20 мин сперматозоиды окрашивают 5%-ным раствором эозина и делают тонкий мазок смеси испытываемого материала и сперматозоидов на предметном стекле. Время окраски при постановке реакции взаимодействия сперматозоидов и сыворотки крови у больных с ожоговой травмой и перитонитом определено экспериментально, 1476382

Погибшие сперматозоиды,%

66

71

72

5

10 15

15

Сроки исследования, сут

Парамеций- Погибшие ный тест спермато зонды,%

55+-5

55-4 50

55-5

Первые

Третьи

Пятые

Седьмые

Девятые

14+2

8"3

55+-3

55-5

13+ 1

При увеличении экспозиции окраски до 30 мин дальнейшая гибель сперматозоидов не происходит.

Ниже приведены результаты определения процента погибших сперматозо, идов при смешивании их с сывороткой крови больного С-н, история болезни ¹ 671.

Время экспозиции мин

Подсчитывают под микроскопом в нескольких полях зрения 500 сперматозоидов. По формуле

Ж 100

П =

500

25 определяют процент погибших, что отражает токсичность. сыворотки крови.

Проводят определение токсичности сыворотки крови в процессе лечения больных. Полученные данные сравнивают с контрольными определениями с сывороткой донора, которая не ока-. зывает токсического действия на сперматозоиды, а лишь показывает процент, погибших сперматозоидов в стандартной грануле.

Установлено, что антитоксическая резистентность сперматозоидов постоянна в пределах срока хранения.

В таблице приведена антитоксичес 40 кая резистентность парамеций и сперматозоидов по отношению к плазме постоянного уровня токсичности.

%— I

Среднее из семи наблюдений.

Пример 1. Больной С., 27 лет, история болезни ¹ 671, клинический диагноз: ожог пламенем II-IIIA ст. лица, туловища — 48% поверхности тела. Токсичность сыворотки крови по предлагаемому способу равна 71% погибших сперматозоидов. После проведенной деэинтоксикационной терапии на другой день токсичность сыворотки по предлагаемому способу была равна

60%, на третий — 55%, на десятый—

35%, клинические данные также указывали на выздоровление больного. Конт-. рольные определения с сывороткой донора показывали 26% погибших сперматозоидов в грануле.

Пример 2. Больной С-а, 2 г. 3 мес., история болезни № 1046, клинический диагноз: контактный ожог металлом IIIA-Б ст. — 50(36)% поверхности тела.

Токсичность сыворотки крови по предлагаемому способу равна 85% погибших сперматозоидов. После проведенной дезинтоксикационной терапии на другой день токсичность сыворотки крови по предлагаемому способу быпа равна 85%, больному усиленно проводили дезинтоксикационную терапию и на третий день токсичность сыворотки снизилась до 70%, на четвертый—

60%, на десятый — 40%, íà 18 — 30%, больной в удовлетворительном состоянии выписан домой. Контрольные определения с сывороткой донора показывали 25% погибших сперматозоидов в грануле. . Пример 3. Больной П-а, 57 лет, история болезни № 02-07240, клинический диагноз! разлитой фибринозно-гнойный перитонит.

Токсичность сыворотки крови .по предлагаемому способу равна 82% погибших сперматозоидов. После проведен- ного лечения на второй день токсичность сыворотки крови равна 74%, больному продолжали проводить дезинтоксикационную терапию и интоксикация организма снижалась„ что подтверждается результатами исследования сыворотки крови: на четвертый день—

62%, на шестой — 51%, на восьмой—

42%, на десятый — 34%, состояние больного улучшалось, в удовлетворительном состоянии он выписан домой. Контрольные определения с сывороткой крови донора показывали 26% погибших сперматозоидов в грануле.

5 1476382 6

Ф йормулаизобретенияличающийся тем,что,с

Способ определения токсичности целью повышения точности способа, сыворотки крови путем смешивания ее в качестве тест-объекта используют с тест-объктом, инкубации смечи с сперматозоиды быка, при этом сперма5 последующеи регистрацией процента тозоиды и сыворотку смешивают в равпогибших организмов тест-объекта за ных объемах, а иикубацию проводят в определенное время инкубации, о т— течение не менее 15 мин.

Составитель Е.Синауридзе

Редактор М,Петрова Техред Л.Олийнык Корректор М.Васильева

Заказ 2150/45 Тираж 790 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,!Of