Способ определения карбарила в растительном материале

 

Изобретение относится к биохимии растений и может быть использовано для определения карбарила (севина) в растительном материале. Цель - повышение точности способа. Цель достигается тем, что после экстракции остатков карбарила из растительного материала проводят гидролиз раствором едкого натра, гидролизат подвергают перегонке с водяным паром, в нем измеряют спектрофотометрическим методом количество α - нафтола, а по его содержанию определяют общее количество связанного и свободного остаточного карбарила. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ.

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК.SU» >50093 (51) 4 С 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ.

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР!

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

Н А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 (57) Изобретение относится к биохимии растений и может быть использовано для определения карбарила (севина) в растительном материале. Цель — повышение точности способа. Цель до: стигается тем, что после экстракции остатков карбарила из растительного материала проводят гидролиз раствором едкого натра, гидролизат подвергают перегонке с водяным паром, в нем измеряют спектрофотометрическим методом количество M-нафтола, а по его содержанию определяют общее количество связанного и свободного остаточного карбарила. 3 табл.

1 (21) 4253162/28-14 (22) 04.03.87 (46) 15.08.89. Бюл. N - 30 (71) Институт биохимии растений

АН ГССР (72) С. В. Дурмишидзе, Д. 111. Угрехелидзе, Х. А. Кахниашвили, Э. П. Ломидзе и Т. В. Миминошвили (53) 612.015(088.8) (56) Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Колос, 1983, с. 162. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРБАРИЛА

В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ

Я

Изобретение относится к биохимии растений, в частности к определению остаточных токсических веществ, после обработки растений пестицидами.

Целью изобретения является увеличение точности способа.

Цель достигается тем, что проводят трехкратную экстракцию биоматериала метанолом в течение 2-3 ч и после фильтрации, упаривание раствора про-. водят гидролиз 20Х-ным раствором едкого натрия в течение не менее 30 мин.

Гидролизат подвергают перегонке с водяным паром, в нем измеряют спектро- фотометрическим методом количество

» -нафтола и по его содержанию определяют суммарный остаток связанного и свободного карбарила в образце.

Для осуществления способа проводят измельчение растительного биоматериала (образец хорошо измельча>>т ипи гомогенизируют), экстракцию биоматериала (трехкратная, экстракция 80Е-ным метанолом на водяной бане с обратным холодильником в течение 2-3 ч); фильм трацию экстракта (на воронке Бюхнера © под вакуумом); остаток на фильтре про- мывают двумя порциями 807,-ного мета- („) иола по 15-20 мл; концентрирование (Д> под вакуумом (на вакуумно-ротапион- (, Д ном испарителе до определенного об1ема); гидролиз как свободного карбарила,,так и конюгированных форм продуктов его биотрансформации (к экстракту добавляют NaOEI до получения

207-ного раствора щелочи); перегонку с водяным паром (гидролизат подкисляют концентрированным раствором НС1 до рН 6 и перегоняют с водяным паром до определенного объема); окс>нчание процесса перегонки проверя>г с помощью О, 27>-ного раствор» соли (прочный

Т аблица 1

14

Извлечение С-кярбарила, %, растворителями

Повторность экстракции

80 -ный этиловый

807-ный- Ацетон Гексан метиловый спирт спирт

78

93

64

71

Однократная

Двухкратная

Трехкратная

72

78

86

92

15 мин.

30 мин

30 мин

1 ч

3 150093 с!фний их!и прочный краГне 1Й 1 I ) янллиз полученного раствора ня спектрофотометре (3 мл рястворя анализируют на спектрофотометре С 26 или другого типа при длине волны 3?9 нм в кварцевой кювете); построение калибровочной кривой (перед анализом сублимируют няфтол, готовят растворы точной концентрации, строят калибровочную кри- 10 вую); определение количества с -нафтола в образце (по полученному результату спектрофотометра находят количество по калибровочной кривой, в мг/кг свежего биоматериаля); по существующе-15 му количеству М-няфтола определяют остаточное количество связанного и свободного карбярила.

Пример 1. Готовят экстракт биоматерияля — пробу биоматериала в

При трехкратной экстракции 80%-ным этянолом или метанолом извлекается 35

96-977, усвоенного растением С-кари бяриля.

Полученный экстракт упаривают на. вакуумно-ротационном испарителе до

400 мл, добавляют 100 г МаОН для гид-40 ролиза. К колбе присоединяют обратный холодильник и проводят гидролиз на водяной бане 30 мин.

В табл. 2 приведены результаты проведения гидролиза в различных ус- 45 ловиях, Полный щелочной гидролиз как неизмененного карбарила, так и конъюгатов с эндогенными веществами клетки достигается при 60 С 207-ным едким нат-50 ром в течение 30 мин. Гидролизят подкисляют концентрированным НС1 до рН 6,0., Из гидролизата o(-нафтол перегоняют с водяным паром. Перегонку продолжают55 до получения 2 л. раствора. После этого наличие Ы-нahтолa контролируют с помощью О,? -ного раствора соли прочного синего Б. При отсутствии хярак-..

7 4 количестве 50 r, состоящего из листьев и корней заранее обработанного кярбярилом кукурузы, подвергают измельчению и переносят в литровую круглодонную колбу со нлифом, добавляют

200 мл 807,-ного метанола и подвергают экстрякцию на водяной бане,с обратным холодильником в течение 2 ч. После фильтрации экстракцию повторяют. еще дважды. Остаток биоматериала на фильтрате промывают двумя порциями 807ного метанола по 15 мл.

О полноте экстракции продуктов биотрансформации из биоматериала и о . возможных потерях судят по уровню радиоактивности экстракта..

В табл. 1 даны результаты обработки биоматериала различными растворителями. терной цветной реакции перегонку прекращают; о(-нафтол (в мг/л) .определяют на спектрофотометре СФ-26 при

= 329 нм в кварцевой кювете. Количество Ы-нафтола в анализируемом свежем растительном материале определяют при помощи калибровочной кривой. По установленному количеству a(-нафтола определяют остаточное общее количество связанного и свободного пестицида — . карбарила в мг вещества на кг сырой биомассы.

Степень определения — 927, чувствительность метода — 10 мг/мл.

Таблица 2

1 5()0, 17

В тлбл. 3 приведено тлтков 4 С-клрблрилл в ных рлстениях остлтки пестицида в пс. новном () 907) содержатся в связанном состоянии с эндогенными веществами.

Неизменный клрблрил содержится лишь в неболычом количестве ((107) .

< одержание осрлэлпчных растениях °

Таблица 3

Соотношение остатков клрблрилл в конце в егетлции, Х

Растение

Формуллизобретени я

Связанная Неиэ м енный форма карбарил

3,6

5,2

9,2

9,5

3,0

96,4

94,8

90,8

90,5

97,0

Кукуруза

Рейгрис

Фасоль

Горох

Овес Виноградная лоза

3,4

96,6

Составитель А. Агуреев

Редактор Т. Парфенова Техред Л.Олийнык Корректор Э. Лончакова

Тираж 789

Заказ 4859/39

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

Из полученных данных видно, что в обработанных С-карбарилом в различИ

1ð Способ определения карбарила в растительном материале путем его измельчения, экстракции органическим раство . рителем, очистки экстракта с последующим измерением оптической плотности

15 и расчетом концентрации по калибровочной кривой, о т л и ч а ю ц и и с я

I тем, что, с целью повышения точности способа, экстрлкцию проводят 807,-ным спиртом,. затем обрабатывают экстракт

20 207-ным едким нлтром в течение не менее 30 мин, очистку проводят путем перегонки полученной смеси с водяным паром при рН 6,0, а оптическую плот-. ность измеряют при 329 нм.