Питательная среда для выделения парагемолитических вибрионов
Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к бактериологической диагностике заболеваний, вызываемых парагемолитическими вибрионами. Цель изобретения - повышение чувствительности среды и ускорение выделения. Среду готовят следующим образом. Навески компонентов, г/л: пептон 8-12, натрий хлористый 25-35, манноза 1-3, 20%-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия 1,7-2,3, конго красный 1,5-2,5, желатин 8-12, агар-агар 3,3-3,7 растворяют в дистиллированной воде, рН среды 8,2-8,4. Среда полужидкая, цвет малиново-красный. Посев осуществляют тампоном в центр чашки Петри с питательной средой. Парагемолитические вибрионы образуют макроколонии черного цвета. Чувствительность среды 10-1000 клеток. Выделение осуществляют в 1 этап. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (И) .
1,7
До1л
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPbITHRM
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4384905/28-13 (22) 06.01.88 (46) 07.10.89. Бюл. Ф 37 (71.) Астраханский филиал Центрального научно-исследовательского института эпидемиологии (72) Ф.Х.Ибрагимов, Н.П.Погорелова и А.В.Бойко (53) 576.8.093. 1 (088.8) (56) Либинзон А.E. Методические рекомендации по выделению и идентификации галофильных вибрионов. — Ростов-на-Дону, РПЧИ, 1974, с.10. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЩА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ
ПАРАГЕМОЛИТИЧЕСКИХ ВИБРИОНОВ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к бактериологической диагностике sa- .
Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к бактериологической диагностике заболеваний, вызываемых парагемолитическими вибрионами.
Цель изобретения — повьппение чувствительности среды и ускорение выделения.
Пример 1..Для приготовления среды используют компоненты в следующих количествах, г/л:
Агар-агар 3,3
Пептон 8
Хлористый натрий 25
Манноза 1
Желатин 8
Конго красный 1,5
20Х-ный водный (Ю 4 С 12 (1 1/04,///С 12 Q 1/04, С 12 R 1:63) болеваний, вызываемых парагемолитическими вибрионами. Цель изобретения — повьппение чувствительности среды и ускорение выделения. Среду готовят следующим образом. Навески компонентов, г/л: пептон 8-12, натрий хлористый 25-35, манноза 1-3, 20Х-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия 1,7-2,3, конго красньп .
1,5-2,5, желатин 8-i2, агар-.агар
3,3-3,7 растворяют в дистиллированной воде, рН среды 8,2-8,4. Среда пслужидкая, цвет малиново-красный. Посев осуществляют тампоном в центр чашки Петри с питательной средой, Парагемолитические вибрионы образуют макроколонии черного цвета. Чувствительность среды 10-1000 клеток. Выделение осуществляют в 1 этап. 2 табл. раствор вторичных алкилсульфатов натрия (препарат "Прогресс")
Дистиллированная вода рН среды 8 2
Навески всех компонентов, эа исключением индикатора, манноэы и препарата "Прогресс", растворяют в дистиллированной воде и доводят до кипения при помешивании. Стерилнзуют при 0,5 ати в течение 20 мин. Перед употреблением среду расплавляют и вносят манноэу, конго красньп в виде
4Ж-ного спиртово-водного раствора (37,5..мл) и препарат "Прогресс". Цвет среды — малиново-красный.
25
3 151303
Пример 2. Среду готовят в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах, г/л:
Агар-агар 3,5
Пептон 10
Хлористый натрий . 30
Манноза 2
Желатин 10 !О
Конго красный 2
20Х-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия (" Прогресс"} 2
Дистиллированная вода рН среды 8,3 До 1 л
Пример 3. Среду готовят в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах, г/л: . Агар-агар 3,7
Пептон 12,0
Хлористый натрий 35 0
Манноза 3,0
Желатин 12,0
Конго красный 2,5
20Х-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия (" Прогресс" ) 2,3
Дистиллированная вода рН среды 8,4 До 1 л
Пример 4. Полужидкую среду 35 разливают.в чашки Петри по 20-25 мл и оставляют в течение 1 ч прикрытыми, кружками из стериальной бумаги для застывания. Посев исследуемого материала производят ватными тампонами . 40 объемом около 1 см, которые погру5 жают в исследуемую взвесь, а затем переносят в центр чашки Петри с пи.тательной средой. Инкубацию посевов осуществляют при 37 С в течение 22- 45
24 ч. Парагемолитические вибрионы образуют макроколонии черного цвета диаметром 30-80 мм в зависимости от их концентрации. Для идентификации микробного роста материал с края мак-50 роколонии пересевают на общепринятые дифференциальные среды. Для достоверности в каждый опыт берут по 6 штаммов микробов.
При посеве на полужидкую среду
10 — 1000 клеток парагемолитических
4 4 ,вибрионов, кишечной палочки и протея
1 (по 6 штаммов) макроколонии образуют только вибрионы.
В табл.1 даны результаты испытания трех вариантов питательной среды, Чувствительность предлагаемой среды вышее, чем известной. Рост парагемолитических вибрионов на полужидкой среде удается обнаружить при посеве 10 клеток, а на общепринятой плотной среде без предварительного обогащения — при посеве более 1000 клеток.
В табл.2 даны результаты изучения чувствительности известной и предлагаемой сред при посеве парагемолитических вибрионов.
Таким образом, использование полужидкой питательной среды значительно повышает чувствительность бактериологического исследования, направленного на выявление случаев кишечных заболеваний, вызванных парагемолитическими вибрионами, Это позволяет исключить этап предварительного обогащения материала, сократив тем самым срок исследования.
Формула изобретения
Питательная среда для выделения парагемолитическнх вибрионов, содержащая пептон, хлористый натрий, углевод, 20Х-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия, индикатор, агар-агар и дистиллированную воду, о т л и ч .а ю щ а я с я тем, что„ с целью повышения чувствительности среды и ускорения выделения, она дополнительно содержит желатин, в качестве углевода она содержит маннозу, в качестве индикатора — конго красный при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
Пептон 8-12
Хлористый натрий 25-35
Манноза 1-3
20Х-ный водный раствор вторичных алкилсульфатов натрия 1,7-2,3
Конго красный 1,5-2,5
Желатин 8-12
Агар-агар 3,3-3,7
Дистиллированная вода До 1 л.
1513034
Таблица 1
Содержание ингредиентов в среде
Диаметр микроколонии, мм, прн посевных дозах, число клеток
Культура микробов
Г Т
10 10 10
64,6
76,6
74,5 1арагемолитический вибрион
Минимальное
Кишечная палочка
Протей
Т а б л и ц а 2
Посевная доза, число
Результаты посевов на сравниваемые среды
Средний диаметр макро- Число колоний на колонии на предлагае- известной среде мой среде, мм клеток
21,2
62,6
71,6
О
Составитель Г.Смирнова
Техред Л.Олийнык Корректор С.Черни
Редактор В.Петраш
Заказ 6043/27 Тираж 501 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент",. r.Ужгород, ул. Гагарина, 101
Оптимальное
Максимальное
Минимальное
Оптимальное
Максимальное
Минимальное
Оптимальное
Максимальное
21,2
13,2
О
О
0
62,6
47,4
0
0
61,6
62,4
0
0
О