Питательная среда для выращивания спорообразующих аэробных бактерий bacillus suвтilis и bacillus liснеnifоrмis

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве ферментов, антибиотических и бактерийных препаратов. Цель изобретения - повышение выхода биомассы. Для приготовления среды используют, г/л: пивное сусло 500-600, гидролизат мяса (с содержанием аминного азота 600 мг %) 100-120, меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,304-0,064, марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,028-0,017, агар-агар 25-30, дистиллированную воду до 1 л. Среду стерилизуют и используют для выращивания. На 12-ые сутки выращивания выход биомассы BACILLUS SUBTILIS увеличивается в 3-4 раза, BACILLUS LICHENIFORMIS в 2-3 раза по сравнению с известной средой.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А8ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

500,0-600,0

100,0-120,0

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ fHHT СССР

f (21) 4392712/30-13 (22) 09.02.88 (46) 07.11.89. Бюл. У 41 (71) Днепропетровский химико-фармацевтический завод и Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К.Заболотного (72) В.Я.Чаплинский, В.П.Крылова, В.А.Вьюницкая, И.В.Косюк и А.И.Осадчая (53) 576.8.093. 1 (088.8) (56) ТУ 46-12-1449-85. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЬРАЩИВАНИЯ СПОРООБРАЗУЮЩИХ АЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ BACILLUS SUBTILIS И BACILLUS

LICHENIF0RMIS (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве ферментных, антибиотических и бактерийных препаратов.

Цель изобретения — повышение выхода биомассы.

Среду готовят следующим образом, Питательную среду, предназначенную для выращивания В. subtilis u

В. licheniformis, обогащают новым набором аминокислот, полученным при триптическом гидролизе мяса (600 мг Х аминного азота) и микроэлементами

Ип и Си при следующем соотношении компонентов, г/л:

Пивное сусло

Гидролизат, мяса

„„SU „„1520О94 А 1 (51)4 С 12 N /2G // (С 12 Ь 1/20, С 12 R 1:10, 1:125) 2 ферментов, антибиотических и бактерийных препаратов. Цель изобретения — повышение выхода биомассы. Для приготовления среды используют, г/л: пивное сусло 500-600; гидролизат мяса (с содержанием аминного азота

600 мг Ж) 100-120; меднокалиевую .соль оксиэтилендифосфоновой кислоты

0,304-0,064; марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,0280,017; агар-агар 25-30; дистиллированную воду до 1 л. Среду стерилиэуют и используют для выращивания.

На 12-е сутки выращивания выход биомассы Bacillus subtilis увеличивается в 3-4 раза, Bacillus licheniformis в 2-3 раза по сравнению с известной средой.

Мп 0,05-0,01

Си 0,005-0,003

Агар-агар 25,0-30,0

Дистиллированная вода Остальное

После тщательного перемешивания среду стерилизуют текучим паром с избыточным давлением 0 5 атмосферы в течение 30 мин.

В качестве источников микроэлемен2+ тов Ьп используют марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты, а в качестве источника микроэлемента меди — меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты.

После приготовления питательную среду разливают в 50 бактериологи -.„ ческих.матрацев по 0,25 л и стерили1520094

45 зуют текучим паром с избыточным давлением 0,5 атмосферы в течение 4G мин.

3асев питательных сред в матрацах производят одной и той же маточной культурой В. subtilis и отдельно

В. licheniformis содержащей в 1 мл

1 млрд. микробных тел по оптическому стандарту. В каждый матрац вносят

10 мл одной из указанных микробных взвесей, которую равномерно распределяют по всей поверхности питательной среды. Матрацы помещают в термостат с температурой 28 С. Выросшую микробную пленку на 2-5 — 12-й день

5 роста собирают с каждого матраца отдельно с помощью 0,857-ного раствора хлорида натрия ° Полученную взвесь микроорганизмов с хлопьями пленки гомогенизируют. В гомогенной микробной взвеси определяют количество микробных тел с помощью оптического стандарта и делают пересчет количества микроорганизмов, выросших на

1 мл питательной среды. В дальнейшем 25 вычисляют средние данные по каждой группе исследований.

Пример 1. Используют среду следующего состава, г/л . пивное сусло 500; гидролизат мяса 100; меднокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,28; марганцевокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,304; дистиллированная вода остальное.

Количество микроорганизмов, выросших на 1 среды составляет: на 35

2-й день В. subtilis — 0,28 млрд.кл., В. licheniformis — 0,24 млрд. кл.; на 5-й день — 0,52 и 0,42 млрд.кл. соответственно; на 12-й день - 0,83 и 0,7 млрд. кл. соответственно.

Пример 2. Для выращивания микроорганизмов используют питательную среду следующего состава, г/л: пивное сусло 550; гидролизат мяса

110; меднокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,023; марганцевокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,18; агар-агар 27,5; дистиллированная вода остальное. Получено биомассы с 1 мл среды: на 2-й день В.subtilis — 0,28 — 0,3 млрд.кл., В. licheniformis — 0,24-0,26 млрд. кл. на 5-й день 0,52- 0,58 и 0,42

0,5 млрд. кл. соответственно; на12-й день — 0,83-0,88 и 0,7

0,72 млрд. кл. соответственно.

Пример 3. Используют для выращивания микроорганизмов питательную среду следующего состава, г/л: пивное сусло 600 гидролизат мяса

120 меднокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,017; марганцевокалиевая соль оксиэтиленфосфоновой кислоты 0,64 агар-агар 30; дистиллированная вода остальное.

Количество микроорганизмов, выросших на 1 мл среды, составляет: на

2-й день В.subtilis — 0,3 млрд. кл., В. licheniformis — 0,26 млрд. кл.; на 5-й день — О, 58 и О, 5 млрд. кл. соответственно; на 12-й день — 0,88 и 0,72 млрд. кл. соответственно.

На известной среде выход биомассы на 2-й, 5-й и 12-й дни составляет: для В. subtilis — 0,13 — 0,14, 0,250,3 и 0,44-0,46 млрд. кл. соответстВеННо) для В. licheniformis — 0,110,2, 0,23-0,26 и 0,38-0,4 млрд. кл. соответственно.

Вместо указанных солей можно использовать и иные источники ионов т z+

Си и Мп из расчета, что в пита2г тельнои среде концентрация ионов Нп составляет 0,05-0,01 г, а концентрация ионов Cu — 0,005-0,003 г/л среды.

Использование предлагаемой питательной среды позволит повысить выход биомассы спорообразующих аэробных микроорганизмов. Кроме того, состав питательной среды способствует повышению выхода живых микроорганизмов после лиофилизации.

Формула изобретения

Питательная среда для выращивания спорообразующих аэробных бактерий

Bacillus subtilis u Bacillus licheniformis содержащая пивное сусло, агар-агар и воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы,, она дополнительно содержит гидролизат мяса с содержанием аминного азота 600 мг 7., меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты и марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты, а в качестве воды она содержит дистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, г/л:

Пивное сусло 500-600

Гидролизат мяса 100-120

Ееднокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты

0,304-0,064

1520094

25-30

Остальное

0,028-0,017

Составитель А.Завадская

Редактор И.Дербак Техред М.Ходанич Корректор М.Самборская

Заказ 6723/29 Тираж 501 Подписное

ВЙИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4!5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðîä, ул. Гагарина, 101

Марганцевокалиевая соль оксиэтилендифосфоновой кислоты

Агар-агар

Дистиллированная вода