Способ культивирования бактерий bacillus suвтilis

 

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения гидролитических ферментов. Цель изобретения - повышение выхода ферментов. Бактерии BACILLUS SUBTILIS ВКПМ В-312 выращивают на питательной среде, содержащей отход вакцинного производства - куриные эмбрионы, предварительно подвергнутые тепловой обработке и измельчению. Выход ферментов повышается на 36 - 78%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4147460/30-13; 4147463/30-13; (22) 12.11.86 (46) 15.12.89. Бюл. М 46 (71) Омутнинский химический завод и

Всесоюзный научно-исследовательский проектно-конструкторский институт прикладной биохимии (72) Г.М.Симонова, Н.Д.Корякина, В.К.Рябова, Е.Л.Агафонов, Б.Л.Огорельцев и В.И.Коровкин (53) 663 18(088.8) (56) Гаэиумарова Л.Д., Кулиева Т.Г.

Использование отходов вакцино-сывароточного производства для приготовления питательных сред. Тезисы координационного совещания по разработке и стандартизации микробиологических питательных сред для диагностики инфекционных заболеваний и производства медико-биологических препаратов. Махачкала, 1982, с. 20-22.

Промышленный регламент производства ферментного препарата амилосубтилина ГЗХ. Омутнинск, 1979.

Промышленный регламент производства ферментного препарата протосубтили на ГЗХ. Омутнинск, 1981.

Изобретение относится к биотехнологии и касается получения гидролитических ферментов.

Цель изобретения - повышение выхода ферментов.

Cnocob осуществляют следующим образом.

При культивировании штамма-продуцента Bacillus subtilis ВКПМ В-312 (511 4 С 12 N 1/20, 9/14//(С 12 N 9/14, С 12 P 1:125) 2 (54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ

BACILLUS SUBTILIS (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения гидролитических ферментов. Цель изобретения - повышение выхода ферментов.

Бактерии Bacillus subtilis ВКПМ В-312 выращивают на питательной среде, содержащей отход вакционного производства — куриные эмбрионы, предварительно подвергнутые тепловой обработке и иэмельчению. Выход ферментов повышается на 36-781 используют куриные эмбрионы - отход вакционного производства в количестве

0,5-3,0(. Куриные эмбрионы после выращивания на них вируса гриппа предварительно подвергают тепловой обработке и измельчению.

Питательную среду, содержащую картофельный крахмал, кукурузный экс тракт, кормовые дрожжи, бактериаль1528790

0,05

0,02

0,02

0,005 25

0,2

0,85 ную амилазу, минеральные соли, гидрат окиси аммония, ортофосфорную кислоту, синтетический пеногаситель, измельченные куриные эмбрионы и воду инокулируют посевным материалом и выращивают в оптимальных для используемого штамма-продуцента условиях. При получении амилолитических ферментов питательная среда содержит также лактозу и кашало-10 товый жир.

Изобретение поясняется следующими примерами.

Пример 1. Готовят питательную среду следующего состава, мас. :

Крахмал картофельный 7,0

Измельченные куриные эмбрионы - отход вакционного производства 0,5

Экстракт кукурузный

20 (содержащий 503 сухих веществ)

Дрожжи кормовые

Магний серно-кислый

Кальций хлористый

Аммоний фосфорнокислый двузамещенный 0,8

Калий хлористый 0,1

Гидрат окиси аммония 0,8

Кислота ортофосфорная 0,1

Пеногаситель синтетический

Амилаэа бактериальная (60 ед/г) 0,05

Вода Остальное

В колбы емкостью 750 мл вносят по

50 мл среды, засевают штаммом Bacillus.

subtilis ВКПМ В-312 и инкубируют в течение 72 ч при 37+1 С.

После 772 ч культивирования протео 40 литическая активность культуральной жидкости составляет 7,2 ед/мл.

Параллельно культивируют тот же штамм на среде того же состава, но не содержащей измельченных куриных 45 эмбрионов, После завершения культивирования протеолитическая активность составляет 5,3 ед/мл.

Пример 2. Готовят питательную среду следующего состава, мас.4: 50

Крахмал картофельный 22,0

Экстракт кукурузный 0,78

Измельченные куриные эмбрионы - отход вакционного производства 2,0

Дрожжи кормовые 0,27

Ла ктоза 0,3

Аммоний фосфорно-кислый двузамещенный

0,03

0,3

0,015

0,01.

0,02

0,0043

2,0

0,45

0,3

1,0

0,4

0,04

Натрий хлористый

Калий серно-кислый

Магний серно-кислый

Кальций углекислый

Кальций хлористый

Медь серно-кислая

Гидрат окиси аммония

Кислота ортофосфорная

Жир кашалотовый

Пеногаситель синте" тический 0,03

Амилаза бактериальная 0,1

Вода Остальное

В колбы емкостью 750 мл вносят по

50 мл среды, засевают штаммом Вас 1lus subtilis ВКПМ В-312 и культиви— руют в течение 72 ч при 37+1 С. После завершения культивирования амилолитическая активность культуральной жидкости составляет 32 ед/мл.

Параллельно культивируют тот же штамм на среде того же состава, но не содержащей измельченных куриных эмбрионов. После завершения культивирования амилолитическая активность культуральной жидкости составляет

18 ед/мл.

Пример 3, Способ осуществляют согласно примеру 1, но используют питательную среду следующего состава, мас.4:

Крахмал картофельный 25,0

Измельченные куриные эмбрионы - отход вакционного производства 3,0

Экстракт кукурузный (по техническому весу)

Кормовые дрожжи

Лактоза

Аммоний фосфорно-кислый двузамещенный О, . }

Натрий хлористый 0,04

Калий серно-кислый 0,4

Магний серно-кислый 0,02

Кальций углекислый 0,02

Кальций хлористый 0,03

Медь серно-кислая 0,0005

Гидрат окиси аммония 3,0

Кислота ортофосфорная 0 5

Жир кашалотЪвый 0,4

Пеногаситель синтетический 0,04

Амилаза бактериальная 0,15

Вода Остальное

После 72 ч культивирования амилолитическая активность культуральной жидкости в опыте составляет 31 ед/мл, а в контроле 20 ед/мл.

Способ культивирования бактерий

Bacillus subtilis на питательной среде, содержащей картофельный крахмал, Составитель Т. Мелентьева

Техред JI, Сердюкова Корректор М. Васильева

Редактор М.Недолуженко

Тираж 501

Заказ 7616/23

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина,101

15287/0 о

Таким образом, по сравнению с из- кукурузный экстракт, кормовые дрожжи, вестным данный способ позволяет повы- амилазу бактериальную, минеральные сить выход гидролитических ферментов соли пеногаситель синтетический, на 36-781. воду, отличающийся тем, Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я что, с целью повышения выхода гидролитических ферментов, в питательную среду вносят измельченные куриные эмбрионы — отход вакционного производства в концентрации 0,5-3,0 ь.