Способ количественного определения новокаина
Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам количественного фотометрического определения новокаина -медицинского препарата, что может быть использовано в фармацевтической промышленности. Цель - повышение чувствительности и селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентом - п-диметиламинокоричным альдегидом, растворенным в этиловом спирте, в присутствии додецилсульфата натрия при PH среды 3,0-4,0. Количество п-диметиламинокоричного альдегида в этаноле 4,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-5</SP>-4,5<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-4</SP>М, количество додецилсульфата натрия 4<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-3</SP>-4<SP POS="POST">.</SP>10<SP POS="POST">-2</SP>М. Способ позволяет повысить чувствительность определения новокаина в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет возможности определения новокаина в биологическом объекте - донорской крови. Нижний предел обнаружения 0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мл, т.к. окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
РЕСПУБЛИК (19 (И) (. 111 4 С 01 0 21/78
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ HOMHTET
ПО ИЗОбРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
Я И ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ -.
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
l (21) 4312829/31-04 (22) 05.10.87 (46) 15,12.89 ° Был.1Р 46 (71) Научно-исследовательский институт химии Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского и Саратовский государственный медицинский институт (72)Р.K.Чернова, К.Т.Бендер, Н.Н.Гусакова, О.М.Харитонова, Г.М.Борисова и Т.Н.Подзорова (53) 543. 42. 063 (088. 8) (56) Лукьянчикова Г.И., Бернштейн В.Н.
Фотоколориметрическое определение
ыгьекциониых растворов новокаина.
Сб. научных докладов. Изд-во Медицинского института. Всесоюзное химическое общество им. Д.И.Менделеева. Ставропольское краевое отделение. 1960, в. 1, с. 31-34.
Авторское свидетельство СССР
В 1415159, кл. G 01 N 21/78, 1988. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОКАИНА (57) Изобретние относится к аналитической химии, в частности к способам
Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения новокаина, Цель изобретения — повышение чувствительности и селективности способа определения новокаина.
Пример l. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрического определения больших количеств новокаина. Точную
2 количественного фотометрического опре- деления новокаина — медицинского пре- парата, что может быть использовано в фармацевтической проюппленности.
Цель — повышение чувствительности и селективности способа. Пробу обрабатывают органическим реагентом— и-диметиламинокоричным альдегидом, растворенным в зтиловом спирте, в присутствии додецилсульфата натрия при рН среды 3,0-4,0. Количество идиметиламинокоричного альдегида в этаноле 4,5 10 -4,5 10 + N количество додецилсульфата натрия 4 ° 10
4 10 М. Способ позволяет повысить чувствительность определения новокаи- ф на в 5 раз и селективность за счет определения новокаина в присутствии большого числа лекарственных форм в определяемой пробе, а также за счет воэможности определения новокаина! в биологическом обьекте — донорской крови. Нижний предел обнаружения
0,04 мкг/мл против 0,02 мкг/мп, так как окраска сигналов аналитической формы 5-8 ч против 5 ч. 8 табл. навеску субстанции сухого препарата новокаина 0,00250 г помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в дистиллированной воде при нагревании на водяной бапе. Стандартный раствор содержит 100 мкг/мл новокаина. Для построения градуировочной характеристики в семь мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (10 мкг);
0,3 мп (30 мкг)р 0,5 мл (50 мкг);
1529086
0 8 мп (80 мкг); 1 0 мп (100 мкг)1
1,2 мп (120 мкг); 1,4 мп (140 мкг) стандартного раствора новокаина. Добавляют в каждую из колб IIQ 0,1 мл
0,2/-ного раствора 1,14-10 М идиметиламинокоричного. альдегида в этиловом спирте (Q-ÄÌÀÊÀ) по 1 мл 10 " M раствора додепилсульфата натрия (ДСНа) и доводят объем колб до метки цитратным буферным раствором с рН = 3,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на фотоэлектрокалориметре ФЭК-56М-У.4.1; с/ф II 6 в кюветах с толщиной погло- 15 щающего слоя 1 = 1 см относительно раствора сравнения, содержащего
0,1 мл 0,2/-ного раствора и-ДМАКА;
1 мп 10 M раствора QCNa и цитратный буферный раствор с pH = 3,0. V > = 20
= 25 мп. По полученным значениям оптической плотности строят зависиюсть А = f (С). Закон Бугера-Ламберта-Бера выполняется при концентрации новокаина 10-140 мкг/25 мл или 0,4- 25
5,6 мкг/мп.
П р и и е р 2. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрическоro определения малых содержаний новокаина. Стан- 30 дартный раствор новокаина 100 мкг/мп (раствор А) разбавляют дистиллированной водой в 10 раз и получают раствор новокаина с концентрацией
10 мкг/мп (раствор Б). В пять мерных колб емкостью 25 мл помещают 0,1 мл (1 мкг/мл); 0,3 ип (3 мкг); 0,5 мл (5 мкг)1 0,7 мл (7 мкг); 1,0 мл (10 мкг) раствора Б, добавляют в каждую колбу по 0,1 мп 0,2Х-ного раство- 40 ра д-ДИАКА в .этиловом спирте и по
1 мл 10 M раствора ДСЯа. После этого доводят объем в каждой колбе до
25 мл цитратным буферным раствором с рН - 3,0. Оптические плотности 45 полученных реакционных смесей измеряют на ФЭК-56М-У.4.1, с-ф У 6 в кюветах с толщиной поглощающего слоя
1 5 см. Раствор сравнения готовят аналогично примеру 1. Градуировочная характеристика прямолинейная в интервале концентрации 1-10 мкг/25 мп или
0,04-0,4 мкг/мл новокаина. Предел обнаружения новокаина 0,04 мкг/мл.
Табл. I показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить 0,11,0 мп 0,2Х-ного раствора и-ДМАКА в этиловом спирте. Данные, приведенные в табл. 1, показывают, что ошибки определения новокаина при концентрации и ДМАКА О, I l 0 мл 0,2Х (С
М раб
= 4,5 10 — 4,5 10 М) не превышают
4, 5/.
Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации реагента и-диметиламинокоричного альдегида (рН 3,0; С,4сяо = 1 мл;
10 М; С мак = О, 2 -ного р-ра; 1
1 см, Voaä„= 25 мл) приведены в табл. l .
Табл. 2 показывает, что в реакционную смесь необходимо вводить также
1 мл 1--10 — 1,0 M раствора додеципсульфата натрия.
Результаты определения содержания новокаина при различной концентрации додецилсульфата натрия (рН = 3,0, Сдммя = Оэ1 мл 02Х1 Ч„= 25 мл;
1 = 1 см) приведены в табл.2.
Диапазон определяемых содержаний новокаина (C+M<<> 0,1 мл 0,2Х-ного р-ра; Cp,cuba = 1 мп; 10 М, рН = 3,0;
Чо,„ = 25 мл) показан в табл.3.
Анализ экспериментальных данных, приведенных в табл.3 показывает, что при использовании кюветы с толщи! ной поглощающего слоя 1 = 1 см возможно определение новокаина в интервале концентраций 10,0-140,0 мкг/
/25 мл (0,4-5,6 мкг/мл) с погрешностью, не превышающей 2 6Х. При концентрациях новокаина больше 140,0 мкг/
/25 мл и меньше 10 мкг/25 мп ошибки определения новокаина возрастают до
16,0-)8,0 ° Определяемые содержания новокаина можно понизить, если в эксперименте увеличить толщину поглощающего слоя, т.е. использовать кювету толщиной 1 = 5 см. При этом условии становится возможным с ошибкой
+ 8,0Х определить 1,00-10,00 мкг/
/25 мл новокаина (0,04-0,4 мкг/мп).
Результаты определения новокаина в зависимости от рН среды (Cp qq =
= 0,1 мп 0,2 -ного р-ра; Сд я, 2 мл ° 10 М, Ч ) щ - 25 мпу 1
5 см) показаны в табл.4.
Дпя исследования селективности реакции выбран широкий круг лекарственных препаратов, которые используются совместно с новокаином,,Соотношение концентраций различных сопутствующих
1529086 компонентов (К) и новокаина (Н) составляет 1:1.
Результаты йсследовання влияния различных сопутствующих компонентов на результаты определения новокаина (рН 3,0;
Сд д д 0,1 мл 0,2Х-ного р-ра;
С 4,cNa мп ° 10 М, С С д 1;11
1 1 см) приведены в табл.5.
Анализ табл. 5 показывает, что совместно применяемые с новокаином лекарственные препараты не оказывают мешающего влияния на результаты его определения, ошибка определения новокаина не превышает 3. 2,0Х.
Пример 3. Определение содержания новокаина в сложных лекарственных формах. Анализируемые порошки сложных лекарственных форм, содержа- 20 щих новокаин, тщательно растирают в фарфоровой ступке. Точные навески количественно переносят в мерные колбы соответствующей емкости и растирают в дистиллированной воде. Далее 25 проводят определение новокаина указанным способом аналогично примерам 1 и 2.
Результаты определения содержания новокаина в сложных-лекарственных 30 смесях (рН 310;,Сп-дм д = 0,1 мп
0,2Х-ного р-ра; С <> ** l мл к
«10 М; 7 ш 25 мл) приведены в табл.б.
Пример 4. Определение содержания новокаина в крови. При подготовке крови в анализу белки крови осаждают трихлоруксусной кислотой. К пробе донорской крови 2,0-3,0 мл прибавляют 40 новокаин и сразу осаждают белок крови
2 мл 20Х-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют
5 мин на центрифуге при скорости 45
3000 об/мии. Фильтрат аккуратно переносят в мерную колбу на 25 мл. Осадок промывают 2 мл буферного раствора с рН 3,0 и еще раз центрифугируют, Второй фипьтрат сливают в ту же мерную колбу на 25 мл. К объединенным фильтратам добавпяют 5-8 мп буферного раствора с рН 3,0; 0,1 мл 0,2Х-ного раствора и-ДМАКА; мп 10 И раствора
ДСНа и доводят до метки буферным раствором. Полученные смеси фотометрируют аналогично примеру 2. Содержание новокаина определяют по градуировочиой характеристике.
Результаты определения новокаина в донорской крови приведены в табл.7.
Результаты сравнения предлагаемого способа с известным приведены в табл.8.
Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен при определении
Ъ новокаина и селективен при его определении в смесях с другими лекарственными формаин. Кроме того, показана воэможность определения ультрамалых количеств новокаина в крови, что черезвычайно важно для рационального применения указанного способа с лечебной целью.
Формула изобретения
Способ количественного определения новокаина путем обработки анализируемой пробы органическим реагентом в присутствии додецилсульфата натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повыпения чувствительности и селективности способа, в качестве органического реагеита используют раствор и-диметиламинокричиого альдегида в зтиловом спирте в количестве 4,5-10 —
4,5 ° 10 4 М,додецилсульфат натрия ис- пользуют в количестве 4,О Й !0
4,0 ° 10 М и обработку ведут при рН 3,0 - 4,0.
1529086
Таблица 1
ОтносиНовокаин, мкг тельная
Добавлено, С мп погрешность» " Ж
Найдено
Взято
2,28 10
4,56 10
2,28 10
4,56 ° 10
6,84-10
14,40
2,50
4,00
4,50
13,50
20,00
20,00
20,00
20,00
20,00
17, 10
20,50
20,80
19,10
22,70
0,05
0,10
0 50
1,00
1,50
Таблица 2
ДСКа
Относительная овокаин, мкг
Добавлено, p06. » 1 1 Взято по грешНайдено ность, 2 ° 10
4-10
2 ° 10
4 10
1,2.10
18,0
1,50
3,5
3,0
l3»O
16,4
20,3
20,7
19,4
22,6
20,0
20,0
20,0
20,0
20,0
0 5
1,0
5,0
10,0
3iO
Таблица
Взято ново" Найдено Относитель- Толщина каина, мкг новокаина, ная погреш- кюветы, мкг ность, «+ Х см
Т а б л и ц а 4 рН среды Новокаин, мкг тносиельная
Взято Найдено агрешость, 18,0
6,0
3,0
4,0
14,0
1,0 0,82
1,0 1,06
1,0 1,03
1,0 0,96
1,0 0,86
2,0
3,0
3,5
4,0
5 0
5,0
10»0
50 0
100iO
140,0
160 0
0 5
1,0
5,0
10,0
15,0
5,8
9,42
49,20
99 20
140,56
131,20
0,39
0,92
5,2
9,74
l7 1
16,0
5,8
l,6
0,8
0,4
18,0
22,0
8,0
4,0
2,6
14,0
Тв блица 5
1529086
Относительная
Сопутствующие Новокаин, мкг компоненты
Взято Найдено погрешность, +Х
49,2 l!6
50 0
2,0
50,0 51 0
50,85 1,7
49,7 0,6
48,0 2,0
50,2 0,4
50,0
50,0
50 0
50 0
5l,05 2,1
49,35 1,3
SO,S 1,0
49,8 0,4
50,8 1,6
51,0 2,0
50,0
50 0
50 0
50 0
50 0
50,0
50 0 49,5 1,0 кислота
Альбумин лнофи-. зированный
Мочевина
Борная кислота
Кофеина бензоат
Натрия бромид
Тальк
Трихлоруксусная кислота
Цинка сульфат
50,35 0,7
49,15 1,7
48,95 2,1
50,8 1,6
50,25 0,5
49,90 0,2
50 0
50 0
50 0
50,0
50 0
50,0
50,30 0,6
49,80 0,4
50,0
50 0
Таблица 6
«Г
ОтносиНавеска, г/
/Объем, мл
Состав лекарственной формыэ
Новокаин, г х+ х тельная ошибка, f.Х
Содержа- Найдение в но в навеске навеске
Новокаин 0,2
Цинка сульфат 0,05
Борная кислота 0,4
О 6500
А
0,2!!
t!
t! !!
О, 211 О, 008
Новокаин 1,0
Глюкоза 5,0
С,Н ОН 50
6 О
25
l,0!! !
t! !!
1!05 0!026
1 О
200
0,2
0,2
Новокаин 0,2
Кофеин бензоат 0,8
Эуфиллни
Папаверина гидро хлорид
Строфантина сульфат
Димедрол
Дибазол
Ю
Дроперидол
Натрия оксибутират
Глюкоза
Калий хлористый
Окситоцин
Но-шпа
Этиоиамид
Глютаминовая
0,204
0,22
0,206
0,214
0,210
l,03
l 08
1 05
1,04
1,07
0,21
0!20
2,0
10,0
3,0
7,0
5 0
3,0
8,0
5 0
4,0
7,0
5 0
0,0
1529086
Продолжение табл.6
Навеска; г/
/Объем, мп
Новокаин, г тносн х+ дх ел ьная шибка, QX
Содержа- Найдение s но в навеске навеске
О, 204+01,007!
1 °
1,0
5 0
200
Новокаин 1,0
ЯаВт 4,0
1,02
11 !
11
1,03+0,035
0,1
0 3
20
Новокаин 0,1
Папаверина гидрохлорид 0,2
«и»
«11» и
0,10210,08
Та блица 7
Объем донорской крови мл
Новокаин
OTB0 CHTGJIh ная погрешВзято, мк Найдено, мкг ность, g Й
Т аблица 8
Показатели
Предлагаемы способ
Известный
Ъ
0,04 мкг/мл
0,2 мкг/мп
0,4 - 5,6 мкг/мп
11см
0,04-0,4 мкг/мп
1 5см
2-20 мкг/мл
1a I,cM
Состав лекарственной формы, г
Ыикний предел обнаружения
Диапазон определяемых содержаний
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0
5 0
5 0
5,0
5,0
5 0
l,88
2,20
1,94
l,80
1,98
5,05
4,80
4,65
5,10
4,75
0,194
0,216
0,198
1 06
1,02
1,02
0,991
1,090
1,030
0i 11
0,093
0,105
0,096
0,108
3,00
8,0
2,0
6,0
2,0
2,0
9,0
9,0
3,0
10,0
7,0
5,0
4,0
8,0
6,0
10,0
3,0
10,0
I 0
1,0
4,0
7,0
2,0
5 0
14!
529086 Продолзениа табл.8
Не мешает глюкоза, кофеин, С Н1 ОН, аВ
Не оказывают мешающего влияния: эуфиллин, папаверина, гидрохлорид, атропина суль фат, димедрол, дибазол, дроперидол, натрия оксибутират, глюкоза, KCl окситорен, но-шпа, этионамид, глютаминовая кислота, альбумин лиофизироваиный,i борная кислота, NaBr, тальк, ZnSOg
СС1
Цитратный раствор буферный 10X HCl
3-4
Окраска устойчива в тече- Окраска устойчива ние 6-8 ч в течение 5 ч
Селективность
Среда
Устойчивость сигналов аналитической формы
Объекты анализа
Сложные лекарственные Сложные лекарственформы, содержащие новокаин ные формы, содержащие
Определение новокаина в, новокаин присутствии параллельно применяемых сложных лекарственных форм
Биологическая жидкость крови и-диметиламинокоричный аль- Ванилин в присутствии дегид (n-ДМАКА) при концент- додецилсуль|ата натрия рации его в реакционной смеси 4,5"10 -4,5 10 М в присутствии 4 10 З-4 10 M додецилсульфата натрия
Органические реагенты
Со ст авит ель С. Хов анская
Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни .
Редактор С.Лисина
Подписное
Заказ 7633/38
Тираж 789
BN5GIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина, 101
