Способ определения водорастворимых полисахаридов в препаратах, выделенных из листьев мать-и-мачехи и подорожника
Изобретение относится к аналитической химии полисахаридов и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Изобретение позволяет сократить время определения водорастворимых полисахаридов в препаратах, выделенных из листьев мать-и-мачехи и подорожника, со 150 до 11-16 мин, что достигается тем, что препарат растворяют в воде, в раствор вводят этилгидразин и гидроксид натрия до PH 8-9, полученный раствор выдерживают при температуре кипения 1-2 мин, охлаждают и фотоколориметрируют. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ соцИАлистичесних
РЕСПУБЛИК (5 l ) 5 G 01 Н 21/78
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 ) 4242120/31-05 (22) 05. 05. 87
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (46) 15.01.90. Бюл. ¹ 2 (71) Пятигорский фармацевтический институт (72) В.Г.Сбежнева (53) 543.831 (088.8) (56) Мелентьева Г.А. Фармацевтическая химия, т.1 М.: Медицина, 1976, с.197-201. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИMbIX ПОЛИСАХАРИДОВ В ПРЕПАРАТАХ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ЛИСТЬЕВ МАТЬ- И- МАЧЕХИ
И ПОДОРОЖНИКА
Изобретение относится к "аналитической химии полисахаридов и может быть использовано в фармацевтической промышленности.
Цель изобретения — ускорение определения водорастворимых полисахаридов.
Пример 1 (по известному способу). К 0,01092 r препарата-полисахарида выделенного из листьев матьи-мачехи (точная навеска), прибавляют 10 мл разведенной соляной кислоты (12,5X). Полученную смесь нагревают до температуры кипения и выдерживают 2 ч. Затем прибавляют
0,01 r фенилгидразина. Выделяется осадок желтого цвета. Выделившийся осадок (гидразоны моносахаров) отделяют фильтрованием на фильтре Шотта, промывают водой и растворяют в
50 мл диметилсульфоксида (ДМСО). Полученный раствор фотоколориметрируют при Л„ „с =370 нм на фотоколориметре
„„SU„, l536282 А1
2 (57) Изобретение относится к аналитической химии полисахаридов и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Изобретение позволяет сократить время определения водорастворимых полисахаридов в препаратах, выделенных из листьев матьи-мачехи и подорожника, со 150 до
11-16 мин, что достигается тем, .что препарат растворяют в воде, в раствор вводят зтилгидразин и гидроксид натрия до рН 8-9. Полученный раствор выдерживают при температуре кипения
1-2 мин, охлаждают и фотоколоримет рируют. 2 табл. марки ФЗК-56. Оптическая плотность раствора препарата 11 равна -0,12.
Содержание полисахарида х рассчитывают по формуле
Dx х = — — .100 7
1 ст где D с, — оптическая плотность стандарта.
Оптическую плотность стандарта определяют так же, как оптическую плотность препарата. В качестве стандарта берут очищенный полисахарпд, дающий на хроматограмме одно пятно, П,„= 0,13
0 12 х = - --.— .100 = 92,3Х
0,13
Продолжительность определения
150 мин, Чувствительность — 0,019мг/
/мл. Пример 2 (по известному способу).
К 0,01001 препарата — полисахарида, выделенного из лиг гнев подорож)536282
Таблица!!
Нанеска, г 1 рН,ПродолСодер- Примечание жанне полиса
ОптичесПродолжительность
Препарат житель- кая плотпримера кость ность термооб работки мин аналиэа, мин ха рида, 7.
Полисахарид мать †имачехи
93,4
93,7
93,3
93,5
93,2
93,2
93,0
93,С
93,2
12
13 !
12
12
12
12
13
8 2
8,5 2
9 ?
8 1
8,5
3 1,5
8,5 1,5
9 1,5
0,140
О,!38
0,140
О,!37
0,140
0,138
0,139
0,I4!0
0,!410
О, 01024
0,01018
0,01047
0,01024
0,01002
0,01003
0,01047
0 01054
0,01037
5 ..
7
9
11 ника (точная навеска), прибавляют
10 мл разведенной соляной кислоты (12,5%). Полученную смесь нагревают до температуры кипения и выдержива5 ют 2 ч. Затем прибавляют 0 01 r фенилгидразина. Выделяется осадок желтого цвета. Выделившийся осадок (гидразоны моносахаров) отделяют фильтрованием на фильтре Шотта, промывают 10 водой и растворяют в 50 pHìåòHëсульфоксида (ДМСО). Полученный раствор фотоколориметрируют при =370 нм на фотоколориметре марки
ФЭК-56. Оптическая плотность раствора препарата равна — О,ill. Оптичес кая плотность стандарта — 0 12.
Содержание полисахарида равно х = -т — 100 = 91,6%
0 11
0,12 20
Продолжительность определения
150 мин. Чувствительность — 0,020мг/
/мл.
Пример 3. 0.01029 г препарата — полисахарида, выделенного из 25 листьев мать-и-мачехи растворяют в
20 MJI QHcTHJLTIHpoBR""ой воды,, бавляют 0,01 r зтилгидразина и 0,1 мл
2%-ного раствора гидроксида натрия (рН=Я). Смесь нагревают до температуры кипения и выдерживают в течение !
2 мин. Затем раствор охлаждают и доводят объем раствора до 100 мл. Полученный раствор фотоколориметрируют на фЭК-56 при Л =410 нм. Оптичесе<х кс 35 кая плотность полученного раствора—
О, 14. Оптическая плотность стандарта — 0,15.
Содержание полисахарида в препарате равно 40
0 14 х=- — 100= 934%
0,15
Продолжительность анализа 12 мин.
Чувствительность — 0,002 мг/мл.
Примеры 4-17 определения полисахарида в препарате, выделенном иэ листьев мать-и-мачехи, выполнены аналогично примеру 3, но при других значениях рН и продолжительностях термообработки. Примеры 18-32 определения полисахарида в препарате, полученном иэ листьев подорожника, выполнены аналогично примерам 4-17. Данные представлены в табл,l. Метрологические характеристики способа определения полисахаридов по данному изобретению и известному способу представлены в табл,2, формула изобретения
Способ определения водорастворимых полисахаридов в препаратах, выделенных из листьев мать-и-мачехи и подорожника, обработкой препарата производным гидразина с образованием окрашенного соединения и последующим фотоколориметрированием его раствора, отличающийся тем, что, с целью ускорения определения, в качестве производного гидразина используют зтилгидразин, при этом препарат растворяют в воде, в раствор вводят этилгидразин и гидроксид натрия до рН 8-9,, полученный. раствор выдерживают при температуре кипения 1-2 мин и охлаждают.
1536282
Продолжение табл.! б
6 7 8 9
Результаты saниженные,так как реакция при данных условиях идет не до конца
Результаты заниженные так как реакция при этих условиях идет не до конца
П р и м е ч а н и е: к — контрольный пример; н) — к примерам 3-17; нк) — к примерам 18-32.
Таблица 2
Определение полисахарида из листьев мать-и мачехи
Определеление поХарактеристики лисахарида из листьев подорожника
По данному изобретению
0,5818
0,7628
0,3114
0,80
По известному способу
82
Sx
0,2931
0,5441
0,2210
0,57 г ,S
Sx
Е,!
0,6318
0,83
0,35
0,92
Составитель А.Салин
Редактор И.Касарда Техред М.Ходанич Корректор
В.Кабаций, Заказ 104 Тираж 50I Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям н открьггиям при ГКНТ (:(.(.1
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.уятороп, ул. Гагарина,ll)1
12 к
13 к
14 к
l5 к
16 к
17 к
18 » Полисахарид
19 подорожника
2!
22
23
24
26
27 к
28 к
29 к
30 к
31 к
32 к
0,01019
0,01024
OiOI023
О,OIO)7
0iOI0I2
0,010)7
0,010)7
0,01034
0,0)024
0,01028
0,01020
0,01031
0,010)7
0,01024
0,0) 031
0,01084
0,01071
0901072
О, 0)034
0,0104!
0,01034
7,5
9,5
7;5
8,5
8,5
9,0
8,0
8;5
9,0
8,0
8,5
9,0
8,0
8,5
9,0
7,5
9,5
7,5
8,5
8,5
9 0
1
l,5
0,5
5
2
1
1
I 5
1,5
l,5
1
l,5
0,5
5 о,!зо
0,129
0,)26 о,!зо
О,)ЗО
О,)ЗО
О,) IO о,!!з
0,112
0,112
0,1 12
О, I I O
О, I I O
О,IIO
0,112
О,IOO
О,IOO
0,108
О,)О7
0,106
О,)О7! з
12
l2
)2
Il
l2
12 ! з
Il
12
)г
II
13
)З
14
1l
ll
11
16
14
86,9
86,9
86,8
86,9
86,9
86,9
91,7
9l,7
9I,6
9I 5
91,6
9l 6
91,7
9I,6
9l,6
83, 3.
8З,З
83,4
83,2
83,4
83,3
