Способ определения концентрации жизнеспособных спор бактерий bacillus тнuringiеnsis в концентрате, содержащем сульфат алюминия

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для количественного определения жизнеспособных микроорганизмов в биомассе после концентрирования ее методом коагуляции с применением электролитов. Целью изобретения является получение достоверных результатов количественного анализа жизнеспособных микроорганизмов. Способ заключается в том, что микроорганизмы дважды отмывают в физиологическом ртстпоре путем периодического центрифугирования и регуспенлирования в физиологическом растворе до стабилизации рН раствора в области 6,0-6,5. Способ позволяет получить учет жизнеспособных микроорганизмов после коагуляции биомассы практически 100% и достоверна оценить эЛЛективность процесса коагуляции с применением электролитов. 1 тлбл. V с

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) (51)5 С 12 О 1/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬП ИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К А8ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4377555/13 I (22) 15,02.88 (46) 23.0! < 91. Бюл. Р" 3 (71) Институт тепло- и массообмена им.А.В.Лыкова (72) Э.Г.Тутпва, Л.A.Никифорова, И.В.Жавнерко и R.Ê,Òóòîâ (53) 576 .8(088 .8) (56) Доклары ВАСХНИЛ, 1987, ((5, с.23.

Методы общей бактериологии. — М.:

Мир, 1984, т 3, с 231.

Дендробацилин концентрированный.

ТУ 64-15-02-087. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНПВНТРАПИИ

ЖИЗНЕСПОСОБНЬ(Х СПОР БАКТЕРИЙ ВАСШЛБ

THURINGIENSIS В КОНПРнтРАтВ, COJ(FPЖАВЕМ СУЛЬФАТ АЛ1ОМИНИЯ (57) Изобретение относится к микробиологической промьш|ленности и может

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано рля количественного определения жизнеспособных микроорганизмов в биомассе после концентрирования ее методом коагуляцни с применением электролитов.

Бель изобретения - получение достоверных результатов количественного анализа жизнеспособных микроорганизмов<

Способ заключается в том, что микроорганизмы дважды отмывают в физиологическом растворе путем периодического центрифугирования и ресуспендирования в физиологическом растворе до стабилизации рН раствора в области 6,0-6,5.

2 быть использовано для количественного определения жизнеспособных микроорганизмов в биомассе после концентрирования ее методом коагуляции с применением электролитол. Целью изобретения является получение достоверных результатов количественного анализа жизнеспособных микроорганизмов.

Способ заключается в том, что микроорганизмы дважды отмывают в физиологическом растворе путом периодического центрифугировапия и ресуспенрирования в физиологически растворе до стабилизации рН раствора в области

6,0-6,5 ° Способ позволяет получить учет жизнеспособных микроорганизмов после коагуляции биомассы практически !007, и достоверно оценить эффективность процесса коагуляции с применевием электролитов. 1 табл .

Проводят определение концентрации жизнеспособных спор в сухом концентрате дендробациллина (культура— продуцент Bacillus thurittgiensie штамм °

49-8), полученном з результате распыпительной сушки скоагулированной культуральной жидкости.Коагуляцию Яю производят сульфатом Al концентрация электролита составляет 1Х от объема биомассы. Определение производят следуют(им образом.

:Ь

Навеску в 1 r суспенрируют в

100 мл стерильной воры, гомогениэируют суспензию на микроизмельчителе и по стандартной методике (метод последовательных разведений) осуществляют анализ. Высев пробы производят на твердую агариэованную среду.

1622399

Формула и э о б р е т е н и я

Ъ тр исаолиой

2-а от>оеаа рй посл аоа гула пии

Титр посл» аоагуТитр

104 „ / р8 (8мхад, 1 рн 8мо»! Ти р

10 / сус- лапии> п»и»ии> to ал/

10 ил/ил (ttt 7) 223

ЗЗ7

291

182

196

574

263

206

267

421

42 125

51,6 247

47,4 195

36,8 137

40,3 118

57,5 387

33,8 176

57 176

34,5 153

66 342

6,4 105

6,5 102

6,5 99

6,5 98

6>4 107

6,4 102

6,5 105

6,6 98

6,5 92

6,4 97

289

179

209

583

218

246

4О7

6,1 95,6

6,0 89>б

6,1 75,4

6,5 107

6,4 104

6,1 85,4

5,8 79,8

6,4 108

6,3 101

6,2 94,5

5,1 56 213

5 3 73 302

5,2 67 254

5,4 75,2 196

4,9 60,2 203

5,2 67,5 490

5 ° 1 67 210

5,5 85>4 223

5,2 57 271

5,3 81 398

4,0

4,!

3,9

4,1

I,o

4,2

3,9

4,3 а,о

4,2

94

174

1З8

68

79 эзо

89

118

92

278

Составитель П. Иванов

Техред JI.0ëèäíûê Корректор С.Шевкун

Редактор H.Яиола

Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Рау18ская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", f Ужгород, ул. Гагарина,101

Параллельно проводят анализ этого же концентрата по предлагаемому способу.

В этом случае навеску в 1 r суспендируют в 100 мл физиологического раствора и полученную суспензию гомогенизируют на микроизмельчителе в течение

5 мин. Затем суспензию центрифугируют

5 мин при 1000 g, фугат сливают и добавляют свежий физиологический раст- 0 вор до первоначального объема. Описанную операцию отмывки спор микроорганизмов повторяют до тех пор, пока рН раствора не стабилизируется в области

6,0-6,5. Результаты опыта приведены 15

s таблице.

Анализ данных, приведенных в таблице, показывает, что одна отмывка, как правило, не дает окончательного положительного результата ° В отдель- 20 ныл случаях требуется три раза промывать скоагулироваиную биомассу, но в основном достаточно провести двукратную промывку физиологическим раствором, чтобы получить достоверный результат.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно оценить эффективность процесса коагуляции с примег>ением электролитов.

Способ определения концентрации жизнеспособных спор бактерий Bacillus thuringiensis в концентрате, содержащем сульфат алюминия, предусматривающий отбор пробы, приготовление суспензии, гомогениэацию, вы» . . сев на твердую питательную среду с последующцм подсчетом колоний, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повьинения достоверности результатов, суспенэию пробы готовят на физиологическом .растворе, сульфат алюминия удаляют многократным центрифугнрованием и ресуспендированием осадка физиологическим раствором до получения суспенэии с рН

6,0-6,5.