Штамм низших грибов реniсilliuм снrysоgеnuм как тест- культура для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость

 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость. Целью изобретения является повышение достоверности оценки грибостойкости алюминиевых сплавов. В качестве тест-культуры предлагается использовать впервые выделенный из продуктов коррозии алюминиевых сплавов штамм PENICILLIUM chrYSOGENUM BKMF-3068D, обладающий высокой коррозионной активностью по отношению к алюминиевым сплавам. Так, площадь пораженной поверхности образца алюминиевого сплава Д-16Т составляет в среднем 38,2%, потери в массе 14,5 г/мм<SP POS="POST">2</SP>. Штамм P. chrYSOGENUM BKMF-3068Д депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов ИБФМ АН СССР. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕтСХИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABVOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ХОМИТЕТ по изов етениям и отнРытиям

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4498434/30-13 (22) 25,08,88: (46) 15.11,90, Бюл. У 42 (72) В.Г,Борисова, Н.Л,Немченко и Т,А.Карташева (53) 58 2.282:578.084(088,8) (56) ГОСТ 9-048-75, Изделия технические. Метод испытаний на устойчивость к воздействию плесневых грибов, М, Госстанцарт СССР, 1977, с. 23.

Фомина Н.В,, Туркова З.А., Анализ элементного состава культуральной среды грибов при биодеструкции металлов, В кн.: Третья Всесоюзная конференция по биоповреждениям. Тезисы докладов, ч, 1, М.: 1987, с. 171-172, (54) ШТАММ НИЗШИ(ГРИБОВ PFNICILLIUN

CHRYSNENUM КАК ТЕСТ-КУЛЬТУРА ДЛЯ ИСПЫТАНИИ АЛККИНИЕВЫХ СПЛАВОВ НА ГРИБОСТОИИОСТЬ

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма грибов, используемого для определения грибостойкости металлических материалов, а именно алюминиевых сплавов, может быть использован в качестве тест-культуры для испытаний на грибостойкость различных конструкций техники, выполненных иэ алюминиевых сплавов, Цель изобретения — получение активного штамма грибов, использование которого в качестве тест-культуры позволяет повысить достоверность оценки при определении грибостойкости алюминиевых сплавов. (!9) Я U О1) 1 (g1)g С 12 N 1/14, С 12 Q 1/02

2 (57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость. Целью изобретения является повышение достоверности оценки грибостойкости алюминиевых сплавов, В качестве тест-культуры предлагается использовать впервые выделенный из продуктов коррозии алюминиевых сплавов штамм Penicillium chiysogenum

ВКМР-30680, обладающий высокой коррозионной активностью по отношению к алюминиевым сплавам, Так, площадь пораженной поверхности образца алюминиевого сплава D-16Т составляет в среднем 38,2Х, потери в массе

14;5 г/мм . Штамм P.chrysogenum.

BKNF-3068D депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов ИБФМ АН

СССР. 1 табл.

Для получения штамма Penicillium

chrysogenum BIQIF-3068D были исследованы биоповреждения деталей иэ алюми- ниевых сплавов (D16 B95) В93, 19, АК4 и др.), входящих в состав технических изделий, эксплуатировавшихся в различных климатических районах. В составе выделенной из продуктов коррозии алюминиевых сплавов микрофноры наиболее часто встречались грибы рода Penicillium Лабораторные испытания выделенных культур электрохимическим методом показали наиболее высокую коррозионную активность у штамма

Р.chrysogenum ВКМР=ЗО680.

1606530

Морфолого-культуральные свойства.

Колонии на агаризованной.среде Чапека растут довольно быстро, на 10-й день роста достигая 3,5-4,0 см в диаметре, бархатистые, радиально-бброздчатые, край погруженный, Конидиальная эона колоний серосине зеленого цвета, позднее становится оливковой, Край роста около

2 мм шириной, белый. В центре колонии стерильная зона в виде бугорка белого (желтоватого) цвета. Зксудат обильный, в виде капель лимонно-желтого цвета. Запах слабый, неопределенный. Обратная сторона колонии желтая, Выделяет в питательную среду желто-зеленый пигмент.

Конидиеносцы гладкие, неокрашен-. ные, ассиметрические, обычно с одной или несколькими веточками, отходящими от главной оси, с 2-5 метулами, несущими стеригмы. Конидиальные цепочки объединены в колонку. Веточки

15-20х3-3,5 мкм, метулы 10-13хЗ. 3,5 мкмжд стеригмы 8-9х2 ° 5-3 мкм. Ко— индии эллипсоидные, Зх4 мкм, гладкие, в массе серо-сине-зеленые.

Физиолого-биохимические свойства.

Аэробы, активно растут при 20—

30 С и нейтральной или сйабокислой реакции среды. Подкисляют среду до рН 3,5, t

Половое размножение: не выявлено.

Покоящиеся структуры не обнаружены.

Антагонистические свойства по отношению к другим культурам, выделенным в тех же условиях, отсутствуют.

Хранение штамма осуществляют в лиофильно высушенном состоянии в стерильных ампулах. Непродолжительное . время (до 6 мес без пересева) может храниться в холодильнике в пробирках с агаризованной средой.

Культура не является патогенной, Пример 1. Выделение штамма.

Измельченные в ступке продукты коррозии алюминиевого сплава массой

0,1 г, содержащие споры штамма

P.chrysogenum BKMF-3O68D, переносят с соблюдением стерильности в чашку

Петри с застывшей средой Чапека Докса и тщательно растирают шпателем, Затем этим же шпателем протирают поверхность среды последовательно во

2-й и 3-й чашках, Чашки закрывают крышками и инкубируют в термостате при 28 С в течение

5-7 сут, Обычно в первой чашке после инкубации наблюдают сплошной рост

5 микроорганизмов, тогда как в последующих можно обнаружить изолированные колонии.

Получение чистой культуры осуществляют по методу Коха. Для этого не-, большое количество спор из изолиро— ванной колонии переносят микробиологической петлей в чашку Петри с за". стывшей средой Чапека Докса уколом в

3 точки и инкубируют при 28ОС в течение 7-10 сут, Пересев повторяют 1-2 раза до получения чистой культуры. Проверку на чистоту осуществляют путем визуаль20 ной оценки и микроскопирования. Кроме того, посевом на среду БСА (1 часть сусло-агара +1 часть мясо-пептонного агара) выявляют бактериальные эагрязнения.

25 Чистую культуру переносят в пробирку со скошенным сусло-агаром и инкуби.руют 7-10 сут при 28 С. Полученную культуру используют для заражения питательной среды при испытаниях

30 алюминиевых сплавов на биостойкость.

Пример 2, Испытания алюмини-. евых сплавов на грибостойкость, Испытания проводят контактным методом сущность которого состоит в вы35 держивании образцов металлов на поверхности агаризованной среды, инокулированной тест-культурой.

Расплавленный сусло-агар разливают в чашки Петри и дают застыть. На

40 поверхность среды в каждую чашку помещают небольшое количество (1 микробиологическую петлю) спор гриба

P.chrysogenum BKNF-3068D из 7-14-суточной культуры и растирают шпателем. о

45 Культуру инкубируют при 22-25 С, Через 5-7 сут, когда в чашках наблюдается сплошной рост грибного мицелия со спорами, на его поверхность кладут образцы из алюминиевого сплава

59 размером 30х15х2 мм.

Образцы предварительно обрабатывают следующим образом: двухкратно промывают в ацетоне, высушивают на воздухе, затем протирают влажным тампоном, смоченным этиловым спиртом и фламбируют (несколько раз обжигают над пламенем горелки), Количество образцов должно быть не менее. 5. Контролем служат такие же образцы, поме,1606530 щенные на поверхность стерильного сусло"агара.

Чашки помещают в эксикатор, в котором поддерживается влажность 96-

98 за счет налитой на дно эксикатора стерильной дистиллированной во-. ды, для предотвращения высыхания среды.

Продолжительность экспозиции опытных и контрольных образцов 60 сут при 22-25 С. По окончании испытаний образцы извлекают из чашек Петри и дезинфицируют в 50%гном растворе фенола или формальдегида в течение 3 ч. Затей образцы с помощью скальпеля очищают от продуктов коррозии, промывают в зтиловом спирте,высушивают и проводят исследование их поверхности на профилографе, Гри- 20 бостойкость материала обратно пропорциональна площади пораженной поверхности образцов.

Результаты испытаний на грибостойкость образцов из алюминиевого сплава D-16Т с использованием в качестве тест-культуры штамма P.chrysoдеппш ВКМР-3068D представлены в таблице.

Контрольные образцы коррозии не подвергались, убыли в массе не отмечено.

Использование активного штамма

Penicillium chiysogenum в качестве тест-культуры повышает достоверность, испытаний алюминиевых сплавов на биостойкость.

Формула изобретения

Штамм низших грибов Penicillium

chrysogenum-30689 как тест-культура для испытаний алюминиевых сплавов на грибостойкость.

Испытанный образец

3 А 5 (Определяемый параметр

1 ) 2

Среднее

Площадь пораженной поверхности образца, Массовые потери, г/мм

474352 235 438 41 2 382

17 0 80 134 148 196 145

Составитель И.Болотина

Редактор Н,Киштулинец Техред М.Ходанич

Корректор Т.Малец

Заказ 3528 Тираж 495 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул. Гагарина, 101