Способ определения репарационной способности радиопротекторов

 

Изобретение относится к радиационной химии и может быть использовано в молекулярной радиобиологии для отбора соединений , способных репарировать углеводную часть ДНК на радикальной стадии от радиационных повреждений, приводящих к разрывам полинуклеотидных цепей. Цель изобретения - упрощение и повышение чувствительности способа, Цель достигается тем, что в качестве реагента для определения продуктов облучения используют 0,6%-ный раствор 2-тиобарбитуровой кислоты (ТБК), а в качестве компонента ДНК используют моль- 2-дезокси-Д-рибозу, причем соотношение концентраций-2-дезокси-Д-рибозыи радиопротектора составляет 1 :(0,005-0,05) соответственно. 1 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

Ы2 1693552 А1 (si)s G 01 N 33/483

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ts,1t Ф) .g, Ppg

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, "

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4681294/14 (22) 20.04.89 (46) 23.11.91. Бюл. N. 43 (72) М.И.Амирагова и Н,П.Крушинская (53) 547(088.8) (56) Ward J.F. Int. J. Radiat. — Phys. Chem., 1971, ч. 3, р. 239-249. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕПАРАЦИ, ОННОЙ СПОСОБНОСТИ РАДИОПРОТЕКТОРОВ (57) Изобретение относится к радиационной химии и может быть использовано в молекулярной радиобиологии для отбора соединений, способных репарировать углеводную часть ДНК на радикальной стадии от радиаИзобретение относится к радиационной химии и может быть использовано в молекулярной радиобиологии для отбора соединений, в том числе радиопротекторов, способных репарировать углеводную часть

ДНК на радикальной стадии радиационных повреждений, приводящих к разрывам полинуклеотидных цепей.

Цель изобретения — упрощение и повышение чувствительности способа.

Указанная цель достигается тем, что в способе определения репарационной способности радиопроетекторов (т.е, способности восстанавливать первоначальную структуру поврежденной молекулы), включающем облучение растворов компонента

ДНК и смеси его с радиопротектором, добавление реагента к облученным растворам для спектрофотометрического определения продуктов облучения и оценку эффекта репарации по уменьшению оптической плотционных повреждений, приводящих к разрывам полинуклеотидных цепей. Цель изобретения — упрощение и повышение чувствительности способа. Цель достигается тем, что в качестве реагента для определения продуктов облучения используют

0,6%-ный раствор 2-тиобарбитуровой кислоты (ТБК), а в качестве компонента ДНК используют 10 -2 10 моль дм 2-дезокси-Д-рибозу, причем соотношение концентра ц и й-2-де зо к си-Д-р иб оз ы и радиопротектора составляет 1:(0,005-0,05) соответственно. 1 ил. ности раствора в присутствии радиопротектора, в качестве продуктов облучения измеряют ТБК-активные продукты, а в качестве компонента ДНК используют 10 -2 10 моль дм 2-дезокси-Д-рибозу, причем соотношение концентраций 2-дезоксирибозы и радиопротектора составляет 1:(0,005-0,05) соответственно.

Пример. Для оценки репарационных свойств протектора (цистеина) в отсутствие кислорода водные растворы смесей дезоксирибозы (ДР) (2 10 моль/л) и L-цистеина (5 10 -1. 10 моль/л), насыщенные аргоном или N20, облучают гамма-квантами Со в дозах 100-200 г.

Анализ продуктов радиолиза ДР проводят следующим образом.

1 мл раствора дезоксирибозы, облученного гамма-квантами Со, в дозах 100-200

r, смешивают с 2 мл раствора тиобарбитуровой кислоты(ТБК) (0,6%. рН 2). Смесь нагре1693552 ме того, имеет более высокую чувствительность, чем известный способ.

Формула изобретения

Составитель А.Донцов

Техред M. Мо ргентал Корректор Т.Палий

Редактор M.Áëàíàð

Заказ 4076 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская иаб., 4/5

Проиаеодстеен но издательский коиоинат "Патент", г. Уагго род, уе Гагарина, 101 вают в течение 20 мин на кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры. Определяют оптическую плотность розового пигмента на спектрофотометре при

532 нм относительно контроля — прогретой 5 смеси ТБК с необлученным раствором дезоксирибозы. Используя молярный коэффициент экстинкции, равный 1,45 10 л моль см, рассчитывают концентрацию продуктов радиолиза ДР и их радиационно-химический 10 выход (G, молекул/100 эВ).

На чертеже приведена зависимость относительного радиационно-химического выхода (6/6О) продукта радиолиза ДР от концентрации цистеина (ЦИС1/2). 15

С ростом концентрации цистеина выход продуктов радиолиза ДР уменьшается, Иэ

Экспериментальных зависимостей определяют концентрацию цистеина (Цис1!2), при которой за счет репарации выход продуктов 20 радиолиэа ДР уменьшается в два раза, т.е.

ЬЗр/С =0,5.

Предлагаемый способ для реализации требует меньшее количество реактивов, времени, концентрации протектора и, кро- 25

Способ определения репарационной способности радиопротекторов, включающий облучение растворов компонента ДНК и смеси его с радиопротектором, добавление реагента к облученным растворам для спектрофотометрического определения продуктов облучения и оценку эффекта репарации по уменьшению оптической плотности раствора в присутствии радиопротектора, отличающийся тем, что, с целью упрощения и повышения чувствительности способа, в качестве продуктов облучения используют ТБК-активные продукты, а в качестве компонента

ДНК используют 10 -2 102 моль дм з

2-дезокси-Д-рибозу, причем соотношение концентраций 2-дезокси-Д-рибозы и радиопротектора составляет 1:(0,005-0,05) соответственно.