Способ моделирования геморрагического инсульта

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в изучении патофизиологии геморрагического инсульта, а также для экспериментальной фармакотерапии Способ позволяет повысить воспроизводимость модели . Для этого в мозг по стереотаксическим координатам билатерально иживают полые иглы, в которые вводят изогнутые мандрены и 4-6 вращательными движениями разрушают ткань мозга и проходящие в ней сосуды, после чего в образовавшиеся очаги деструкции и микрокровоизлияний вводят 0,2-0,3 мл аутокрови животного, а через 2-3 мин в инсультные очаги дополнительно вводят 0,1-0,2 мл крови 19 ил

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 09 В 23/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ6СТВУ (21) 4884671/14 (22) 23,11.90 (46) 07,10,92. Бюл. N 37 (71) Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии АН СССР (72) А.Н.Макаренко, Н,С.Косицын, С.В,Карпенко и В.А,Мишина (56) Легнер Э,Н. и Бибелейшвили Ш.И. Электрическая активность головного мозга при экспериментальной модели геморрагического инсульта. Электрофизиология нервной системы, Издательство Ростовского университета, 1963, с, 226 — 228. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

Изобретение относится к экспериментальной медицине.

Известны способы моделирования геморрагического инсульта путем звукового воздействия, введения крови в различные структуры мозга.

Наиболее близким решением по цели к заявляемому является способ моделирования геморрагического инсульта путем введения 1,2 — 1,5 мл аутокрови животного, смешанной с 0,2 мл гепарина, под давлением 120 — 150 мм рт.ст. во внутреннюю капсулу одного из полушарий мозга через иглу, вживленную по стереотаксическим координатам.

Однако известный способ имеет следующие недостатки; высокая летальность (80%) в ранние сроки из-за прорыва крови в желудочки или нарастающей компрессии при повреждении близлежащих крупных сосудов большим количеством инъецируемой

„.,5U 1767518 А1 (57) Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в изучении патофизиологии геморрагического инсульта, а также для экспериментальной фармакотерапии, Способ позволяет повысить воспроизводимость модели. Для этого в мозг по стереотаксическим координатам билатерально аживают полые иглы, в которые вводят изогнутые мандрены и 4 — 6 вращательными движениями разрушают ткань мозга и проходящие в ней сосуды, после чего в образовавшиеся очаги деструкции и микрокровоизлияний вводят 0,2 — 0,3 мл аутокрови животного, а через 2 — 3 мин в инсультные очаги дополнительно вводят 0,1 — 0,2 мл крови, 19 ил, крови, что не удовлетворяет требзваниям хронического эксперимента. Неопределенность поражения структур мозга вследствие присоединения общемозговых симптомов, возникающих при ретроградном проникновении избытка крови вдоль иглы под мозговые оболочки, что неприемлемо в экспериментальной невропатолдгйи, Возникновение гемсррагий, нежелательных в эксперименте, из-за гепаринизации крови. Невысокая надежность способа при погрешностях в технике моделирования монолатеральных кровоизлияний.

"Целью изобретения является повышение воспроизводимости модели.

Поставленная цель достигается тем, что животному предварительно разрушают участок мозга и последовательно с интэрвалом

2 — 3 минуты вводят эутокровь в количестве соответственно 0,2-0,3 и 0,1 — 0,2 мл, разру1767518 шение участка мозга производят вращающими движениями изогнутого мандрена.

Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что впервые двухстронний геморрагический ин- 5 сульт моделируется путем предварительного механического. разрушения локальных кровеносных сосудов 4 — 6 вращательными движениями мандренов, введенных в билатерально вживленные иглы с последующим через 3-4 мин введением 0,2 — 0,3 мл и через

2 — 3 мин 0,1 — 0,2 мл аутокрови животного, Таким образом, заявляемый способ соответствует критерию "новизна".

Известны случаи моделирования двухстрон него геморрагического инсульта звуковым воздействием, Однако предлагаемый способ отличается от известного тем, что впервые двухсторонний геморрагический инсульт моделируется путем предварительного разрушения ткани и сосудов мозга вращением мандренов, проведенных через стереотаксически вживленные иглы с последующими — через 3 — 4 мин и через 1 — 2 мин инъекциями аутокрови животного по 0,2 — 0,3 мл

25 и 0,1 — 0,2 мл соответственно.

Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа "критерию" "существенные отличия".

Пример 1. Кошка массой 3,2 кг, самец, 30 анестезирована гексеналом 160 мг внутрибрюшинно. Голова животного фиксирована в стереотаксическом аппарате. Скальпелем произведен разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении, По 35 передней и латеральной координатам AP

2,5, L 7,0 найдена точка, в которой бормашиной просверлено отверстие. Через него в правое полушарие мозга введена полая игла на глубину Н 18,0 мм, что соответст- 40 вует расположению внутренней капсулы.

Игла фиксирована протакрилом в колодке, закрепленной на своде черепа, Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 1), ведущей в которой была альфа — активность, Частота дыхания 25 в мин, пульс 195 уд. в мин,, Во всех случаях проводилась запись

ЭКОГ сенсорной зоны коры головного мозга.

Шприцем с 0,2 мл гепарина взято 1,5 мл венозной крови животного и введено через иглу, вживленную во внутреннюю капсулу, под давлением 120 мм рт,ст,:Контролем давления служили показания манометра, подсоединенного через тройник, У животного возникли кратковременные судороги.

На электрокортикограмме — резкое угнетение активности (Фото 2), Частота дыхания

16 в мин, пульс 181 в мин, Через 1 ч — прогрессивное снижение частоты дыхания до 8 в мин, пульса до 119 в мин, депрессия биоэлектрической активности мозга (Фото 3).

Смерть через 1,5 после инсульта.

На срезе макропрепарата мозга — массивное кровоизлияние в правую гемосферу мозга с проникновением крови в желудочек. (Фото 4).

Пример 2. Кошка массой 3,1 кг, самец, анестезирована гексеналом 155 мг внутрибрюшинно. Голова животного фиксирована в стереотаксическом аппарате, Скальпелем произведен разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении. По передней и латеральной координатам AP 2,5, L7 0 справа и слева найдены точки, в которых бормашиной просверлены отверстия. Через них билатерально введены полые иглы на глубину Н 16,0 мм. Иглы фиксированы протакрилом в колодке, закрепленной на своде черепа. Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 5), в которой доминируют альфа и тета-активность. Частота дыхания

22 в мин, пульс 158 в мин, Во вживленные иглы введены изогнутые мандрены, выступающие над срезом иглы на 2-2,5 мм (Рис. 1) и 4 вращательными движениями разрушены участки внутренних капсул мозга и проходящие в них сосуды. Через 3 мин мандрены удалены. На электрокортикограмме — отсутствие выраженных изменений (Фото 6). Частота дыхания 20 в мин, пульс 146 в мин. В течение последующих 3 часов состояние без динамики.

На следующие сутки — животное адинамично, слабо реагирует на покалывание иглой. Походка шаткая, Снижена бета-активность электрокортиграммы (Фото 7). Частота дыхания 22 в мин, пульс 182 в мин. B течение 7 дней состояние животного стабализировалось, нормализовалась чувствительность и двигательная активнос".ь, Животное выведено из эксперимента, При макроскопическом исследовании мозга — двухсторонние точечные кровоизлияния, мелкие очагй деструкции в области внутренних капсул (Фото 8).

Пример 3, Кошка массой 3,3 кг, самец, анестезирована гексеналом 165 мг внутрибрюшинно, Голова животного фиксирована в стереотаксическом аппарате. Скальпелем произведен разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении. По передней и латеральной координатам А Р 2,5, L 7,0 справа и слева найдены точки, в которых бормашиной просверлены отверстия, Через них билатерально введены полые иглы на глубину Н 16,0 мм. Иглы фиксированы протакрилом в колодке, закрепленной на своде

1767518 черепа. Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 9), ведущей в которой является альфа — активность. Частота дыхания 20 в мин, пульс 159 в мин.

В иглы введены изогнутые мандрены 5 (Рис, 1) и 5 вращательными движениями разрушены участки внутренних капсул мозга и проходящие в них сосуды. Через 3 мин мандрены удалены и через иглы в правый и левый очаги деструкции введено по 0,3 мл 10 крови животного. На электрокортикограмме — десинхронизация бета- и тета-ритмов (Фото 10). Частота дыхания 16 в мин, пульс

146 в мин. Через 1 ч — резкое снижение бета-активности, менее выраженное снижение амплитуды альфа-ритмов (Фото 11). Частоты дыхания и пульс без изменений.

На следующие сутки — животное адинамично, передвигается с трудом, снижена чувствительность по типу тетраанестезии.

На электрокортикограмме — увеличение амплитуды бета- и тета- ритмов (Фото 12), Нормализация состояния в течение 10 сут.

Животное выведено из эксперимента.

При изучении макропрепарата мозга; била- 25 теральные очаги кровоизлияний во внутренние капсулы (Фото 13), Пример 4, Кошка массой 3 2 кг, самец, . анестезирована гексеналом 160 мг внутрибрюшинно, Голова животного фиксирована 30 в стереотаксическом аппарате, Скальпелем произведен разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении, По переднезадней и латеральной координатам AP 2,5, L7,0 справа и слева найдены точки, в которых 35 бормашиной просверлены отверстия. Через них билатерально введены полые иглы на глубину Н 16,0 мм, Иглы фиксированы протакрилом в колодке, закрепленной на своде черепа, Записана фоновая электрокорти- 40 кограмма (Фото 14 ). Частота дыхания 24 в мин, пульс 183 в мин, В иглы введены изогнутые мандрены. (Рис. 1) и 4 вращениями разрушены участки правой и лерой внутренних капсул мозга и 45 проходящие в ней сосуды, Через 3 мин мандрены удалены и через иглы в образовавшиеся очаги деструкции введено по 0,2 мл аутокрови животного. Через 1 мин в инсультные очаги дополнительно введено по 0,1 мл крови. На электрокортиокграмме — резкое

50 угнетение бета-, альфа- и тета-ритмов, десинхронизация их с дельта-ритмом (Фото 15).

Пульс аритмичен, 110-140 в мин, частота дыхания 11 в мин. Через 1 ч — восстановление биоэлектрической активности мозга (Фото 16), нормализация дыхания — 19 в мин и пульса — 242 в мин.

На 1 сутки — у животного тетрапорез, тетраанестезия, вольтаж ритмов электрокортикограммы снижен, по сравнению с предыдущим этапом изменений нет. Частота дыхания 27 в мин, пульс 143 в мин, На 7 сутки - животное самостоятельно передвигается, походка шаткая. Сохраняется нарушение чувствительности по типу тетаанестезии, На электрокортикограмме— активация альфа-и бета -активности (Фото

17).Дыхание и пульс стабилизировать в пределах нормы.

На 21 сутки — удовлетворительное восстановление нарушенных функций.

Животное выведено их эксперимента.

На срезе макропрепарата мозга билатеральные очаги кровоизлияний во внутренние капсулы (Фото 18).

Пример 5, Кошка массой 3,4 кг, самец, Методика воспроизведения модели аналогична описанной в примере N. 4,но ткань мозга разрушалась 6 вращательными движениями изогнутых мандренов, а количество инъецируемой аутокрови в первое и второе введение составляло 0,3 мл и 0,2 мл соответственно. Реакция сердечно-сосудистого, дыхательных систем, изменения электрокортикографической картины и неврологическая симптоматика не отличалась от описанных в примере N. 4.

Гибель животного наступила на 5 сутки после инсульта. При макроскопическом исследовании — билатеральные инсультные очаги в области внутренних капсул, мозг отечен (Фото 19).

Моделирование геморрагического инсульта заявляемым способом позволяет добиться характерной для кровоизлияния во внутреннюю капсулу мозга неврологической симптоматики, отсрочить гибель животных для удовлетворения требований хронического эксперимента и повысить воспроизводимость способа до 93,3 / .

Формула изобретения

1. Способ моделирования геморрагического инсульта путем стереотаксического вживления иглы и введения аутокрови, о тлича ю щи йс я тем, что, с целью повышения воспроизводимости модели, предварительно разрушают участок мозга и последовательно с интервалом 2-3 мин вводят аутокровь в количестве соответственно 0,2-0,3 и 0,1 — 0,2 мл.

2. Способ по п,1, отличающийся тем, что разрушение участка мозга производят вращающими движениями изогнутого мандрена, 1767518! М

К

-L.

, 1

1 767518

/ I

1767518

1767518

1767518

1767518

Составитель Н.Косыцин

Редактор С,Кулакова Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор 3.Салко

Заказ 3550,Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СCCp

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, "01