Способ получения модели растворимого кровезаменителя - переносчика кислорода

 

Использование: относится к области медицины , а именно к гематологии. Цель изобретения: увеличение времени циркуляции в кровяном русле нативного гемоглобина. Сущность изобретения: нэтивный гемоглобин модифицируют по тему гидрофильными полимерами, например, полисахарид конденсируют в гомогенной фазе с гемином, а геминсодержащий полимер вводят во взаимодействие с глобином с образованием модифицированногогемоглобина. Положительный эффект: изобретение позволит создать нетоксичные кровезаменители - переносчики кислорода. 2 з.п. ф-лы.

союз соВетских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСГ1УБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

"и3 М

j! Л "i: !ИВ%6

"ATE

»»

00 (гд (7

О (Л

00 (21) 1571148/14 (22) 08.10.73 (46) 30.08.93. Бюл, M 32 (71) Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (72) Г.Я,Роэенбеог, А.Е.Васильев, А,fl,Àíäреева, А.А.Хачатурьян, А,С,Полякова, А.А.Левина, B.M.Шлимак, M,Ã.Äìèòðèåâà, Ю.Г,Иванов, А.M.Ïëýòoøêèí, В.M.Áåëîстоцкий и Н.К.Кочетков (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ РАСТВОРИМОГО КРОВЕЗАМЕНИТЕЛЯ - ПЕРЕНОСЧИКА КИСЛОРОДА

Изобретение относится к области медицины, а именно к гематологии.

Целью изобретения является увеличение времени циркуляции в кровяном русле нативного гемоглобина.

Гемоглобин-декстран.

А/Геминсдекстран.

К охлажденному ледяной водой раствору 1 г/6,17 мэкв/ высушенного до постоянной массы декстрана с мол, м. 60.000 в 10 мл безводного диметилсульфаксида и 10 мл безводного пиридина последовательно до-. бавляют 0,1 г/0,48 ммоль/ дициклогексил карбодиимида и 0,04 г/0,06 ммоль/ гемина.

Реакционную массу перемешивают 4 ч при охлаждении и 20 ч при 20 С и обрабатывают этиловым спиртом до полного осаждения продукта реакции. Осадок многократно растирают со спиртом до образовани мелкого порошка и бесцветной промывной жидкости, суспензию центрифугируют. и осадок сушат в вакууме при 50 С. Сухой порошок растворяют в небольшом объеме 0,005 М натрий-фосфатного буфера и пропускают

„,. Ж,, 1836958 Al (st>s А 61 К 37/14, С 07 К 15/22 (57) Использование: относится к области медицины, а именно к гематологии. Цель изобретения: увеличение времени циркуляции в кровяном русле нативного гемоглобина.

Сущность изобретения: нэтивный гемоглобин модифицируют по гему гидрофильными полимерами, например, полисахарид конденсируют в гомогенной фазе с гемином, а геминсодержащий полимер вводят во взаимодействие с глобином с образованием модифицированного гемоглобина.

Положительный эффект: изобретение позволит создать нетоксичные кровеэаменители — переносчики кислорода. 2 з.п. ф-лы. через колонку с ДЕАЕ-целлюлозой в ОН- ° форме в том же буфере. Окрашенный элюат собирают и лиофилизуют. Получают 0,8 г окрашенного порошка, содержащего 14-20 мг гемина на 1г высушенного до постоянного веса продукта / определено по содержанию железа в веществе после гель-фильтрации или спектрофотометрически, по экстинкции при 605 нм /. С декстранами других мол. весов реакцию проводят аналогично, Б/ Метгемоглобин-декстран.

К 0,6 г геминодекстрана добавляют 3 2 мг 0,1 M натрийфосфатного буфера с рН 7,25 и перемешивают до растворения, Образовавшийся окрашенный раствор фильтруют.

Фильтрат охлаждают льдом и при осторожном перемешивании по каплям добавляют 8 мл 37; ного раствора нативного глобина в том же буфере и оставляют на 18 ч. Раствор метгемоглобин -декстрана либо лиофилизуют для длительного хранения, либо восстанавливают в окси-форму.

B/ Гемоглобин-декстран.

1836958

Составитель Е.Дубовицкая

Техред М.Моргентал Корректор Л,Пилипенко

Редактор С. Кулакова

Заказ 2849 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35. Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

На колонку с Сефадексом G-25 /тонкий/, уравновешенную с 0.1 M натрийфосфатным буфером рН 7,2 наносят раствор

30-40 мг гидросульфита натрия в 2 мл того же буфера, дают пробе впитаться в гель и наносят смесь 0,6 мл буфера и полученного выше раствора метгемоглобин-декстрана.

Колонку элюируют буфером, окрашенные фракции собирают и получают 1-1,2;(,-ный раствор гемоглобин-декстрана.в окси-.форме, пригодный для физико-химических и биологических исследований. При использовании для. восстановления лиофилизированного гемоглобин-декстрана его наносят на колонку с Сефадексом G-25 в виде 4 " -ного раствора в указанном выше буфере.

Использование изобретения позволит создать нетоксичные кровезаменители" переносчики кислорода.

Формула изобретения

1. Способ получения модели растворимого кровезаменителя — переносчика кислорода модификацией гемоглобина полимерами по гему, отличающийся тем, что, с целью увеличения времени циркуляции в кровяном русле нативного гемоглобина, его модифицируют по гему гидрофильными полимерами.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что гидрофильный полимер, например полисахарид, конденсируют в гомогенной фазе с гемином, например, с помощью дициклогексилкарбодимида, а гемин, содержащий полимер, вводят во взаимодействие с глобином с образованием модифицированного гемоглобина.

3. Способ пои. 1, отличающийся тем, что используют декстран с мол.м. 10000100000,предпочтительно 50000-70000,