Вакцина для профилактики некробактериоза крупного рогатого скота
Использование; ветеринарная микробиология , профилактика и лечение некробактериоза крупного рогатого скота. Сущность изобретения: вакцина включает инактивированные формалином возбудители Ctostrldlum perflngens типа A, Staphyfococcus aureus, Corynebacterium pyogenes, Fusobacterlum necrophorum в определенных соотношениях, ,c добавлением адъюванта - гидроокиси алюминия и анатоксина Clostrldlum perflngens типа А, табл.4.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4864625/13 (22),22.06.90 (46) 23.08.93, Бюл. ЬЬ 31 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им, Я,Р,Коваленко и Институт биоорганической химии им. М.M.Øåìÿêèía (72) Г.Ф.Коромыслов, А.А.Сидорчук, Г.И.Установа. О.В.Жукова. В.T.Èâàíîâ, Т.М,Андронова, С.Д,Панасюк и B.À.Ôèëàòoâ (56) Katotch ВМ. Matltch Bull. Soc, Sci. Vet; Med. Compane Liyon. 1977, 7, р. 519. Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности, к способу изготовления вакцины для специфической профилактики некробактериоза крупного рогатого скота. Профилактика некробактериоза направлена на соблюдение ветеринарно-санитарных мероприятий, которые не являются эффективными. Специфическая профилактика данного заболевания крупного рогатого скота в кашей стране не разработана. B связи с этим становится очевидным актуальность специфических мер профилактики и борьбы с некробактериозом круп ного рогатого скота. Цель работы — получение вакцины, . обеспечивающей повышение напряженности иммунитета против возбудителей некробактериоза и расширения спектра профилактического действия. Для этого в качестве антигенов в состав вакцины дополнительно вводят инактИвированные формалином антигены Staphilococcus aureus u Clostridium perfringens типа А при „„Я2„„18352у5 А1 (54) ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ НЕКРОБАКТЕРИОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (57) Использование; ветеринарная микробиология, профилактика и лечение некробактериоза крупного рогатого скота, Сущность изобретения: вакцина включает инактивированные формалином возбудители Clostrldium perflngens типа А, Staphylococcus aureus, Corynebacterlum руоцепез, Fusobacterlum necrophorum в определенных соотношениях, с добавлением адъюванта — гидроокиси алюминия и анатоксина Clostrldlum perflngens типа А, табл.4. следующеМ соотношении компонентов мл): инактивированный формалином атиген Роsobakterium necropho rum, содержащий l...2х10 микробных тел в мл 40,0...50,0 инактивированный формалином антиген Corunebacterlum puogenes, содержащий 10 микробных тел в мл 20,0...30,0 инактивированный формалином антиген Staphylococcus aureus,, содержащий 2 х 10 микробных тел в мл 40,0...50,0 инактивированный формалином антиген Clostridlum регЫпдепз, тип А, содержащий 2х10 микробных тел в мл 60,0...70,0 содержащий 2х10 ми1835295 60,0...70,0 5,0...6,0 кробных тел в мл гидроокись алюминия ГМДП (N-ацетилглюкозаминил (P 1-4)-Nацетилмурамил-аланин-Д-изоглутамин -100 р-р 60,0...240,0 анатоксин Staphylococcus aureus типа А активностью 15...20 единиц связывания в мл с 0,2)(, формалина до 1000,0 Способ осуществляется следующим образом; После выращивания вакцины на питательных средах (по общепринятым методикам) проводят инактивацию возбудителей Oostridium perfringens тип 3, Staphylococcus aureus, Corynebacterlum pyogenes, Fucobacterlum necroforum . В табл.1 приведены данные по выбору режима инактивации возбудителей формалином. Как видно из табл.1, полная инактивация микобактерий, Cl.perfringens, Е necrophorum достигается при высевах на МПБ, МПА, МППБ и тиогликолевую среду C добавлением 0,2 4 формалина при 36 — 37 С в течение 42-48 часов; St. aureus — при добавлении 0,2, при 26 — 27 С в течение 20-24 часов. После инактивации возбудителей проводят центрифугирование при 3 тыс, об/мин в течение 30 мин с целью получения антигенов. Надосадочную жидкость octae ляют только у С!,perfrlngens тип А для получения анатоксина, у всех остальных возбудителей удаляли, Оптимальные соотношения концентрированных инактивированных антигенов определяют по титру антител (PA) в сыворотке крови, полученной на 21 день после вакцинации кроликов (табл,2). Из данных табл.2 следует, что при изготовлении вакцины концентрированные антигены Fusobacterium necroforum, Corynobacterium pyogenes, St. aureus, Clostrldlum prfrlngens Тип А берут в соотношении 0,8...1,0; 0.8.„1,0; 2,0...2,5; 2,0Ä.2,5, Антигены разводят в анатоксине CI, perfrlngens. содержащем 0,2 формалина, добавляют адъювант — гидроокись алюминия в 0,5 — 0,6, ГМДП в 6-24 к общему объему, Полученную вакцину после проверки на стерильность, безвредность в лабораторных условиях проверяют на активность на крупном рогатом скоте. Эффективность способа оценивали по снижению количества вновь заболевших 50 животных, показателям иммунологических и серологических исследований, Предложенная вакцина апробирована на 1695 коровах и нетелях с положительными результатами в 1988 — 1989 гг. Конкрет-"ные примеры отражены в табл.3, 4, Анализируя данные таблицы 3 видно, что вакцина ВИЭВ профилактирует это заболевание у животных. Во 2-ой группе заболело одно животное, в 3-ей (где вводили вакцину в ГМДП) — вновь заболевших не было тогда, как в 1-ой (вакцина "Памавак"— прототип) заболело 3 животных, а в контроле — 8, Показатели клеточного иммунитета (табл.4) коррелируют с данными клинического исследования животных, которые показывают, что применение вакцины ВИЭВ против некробактериоза в сочетании с ГМДП активизирует систему фазоцитоэа, которая является центральным звеном в развертывании иммунологических реакций. Так в группах 2, 3 после вакцинации фагоцитарная активность была в среднем в 1,5-2 раза выше, чем в группах 1 — 4. Активизация макрофагов оказывает стимулирующее воздействие на субпопуляции лимфоцитов. Содержание Т-лимфоцитов в группах 2 — 3 в среднем в 1,5 раза выше, чем в 1 — 4 группах,. В связи с этим закономернО повышение уровня иммуноглобулинов М и С в сыворотке крови животных. Предложенный способ изготовления вакцины из возбудителей иекробактериоза, циркулирующих на территории страны. расширяет ее спектр действия, введение препарата ГМДП совместно с вакциной повышает ее иммуногенность, резко сократит число заболевших коров "",. тяжелой и средней степенью поражения конечностей, Вакцина, полученная из возбудителей некробактериоза, циркулирующих на территории СССР и способ ее использования совместно с иммуностимулятором ГМДП (или препаратом) при профилактике некробактериоэа крупного рогатого скота найдет применение в животноводческих хозяйствах по выращивйнию рогатого скота. Формула изобретения Вакцина для профилактики некробактериоза крупного рогатого скота, включающая инактивированные формалином антигены Fusobacterlum necrophorum u Corynebacterlum pygenes,о-.л и чаю ща я с ятем. что, с целью повышения напряженности иммунитета против возбудителей некробактериоза и расширения спектра профил.арктического 1835295 — 40,0 — 50,0; 10 — 40,0-50,0; — 20,0-30,0; Таблица 1 Режим инактивации возбудителей формалином Таблица 2 Определение оптимального соотношения инактивированных антигенов в вакцине действия. в качестве антигенов в состав вакцины дополнительно вводят инактивированные формалином антигены Staphylococcus aureus u Clostridium perfingens типа А, гидроокись алюминия, анатоксин Clostrldlum регйп9епз типа А и N-ацетилглюкозоминил ф 1-4)-й-ацетилмурамил-аланин-О-изоглутамин, 100-ный раствор и ри следующем соотношении компонентов, мл: инактивированный формалином антиген Fusobacterium necropftorum, содер.жащий 1...2 х 10 микробных тел в 1 мл инактйвированный формалином антиген Corynebacterlum pyogenes, содержащий 10 микробных тел .в 1 мл инактивированный формалином антиген Staphylococcus aureus. содержащий 2х10 микробных тел в1 мл инактивированный формалином антиген Clostrldium perfingens типа А, содержащий 2х10 микробных тел в 1 мл — 60,0 — 70,0; гидроокись алюминия — 5,0-6,0; 1фацетилглюкозоминил (P 1 — 4)-Й-ацетилмурамилаланин-О-изоглутамин, 100 -ный раствор — 60-240; анатоксин Clostrldlum perfingens типа А активностью 15-20 единиц связывания в 1 мл с 0,2ф, формалина — до 1000,0. 1835295 таблица 3 Сравнительная профилактическая эффективность вакцины ВИЭВ при некробактериозе крупного рогатого скота hk группы Кол-во живот. Доза вводимого б/и епа ата Кратность ГМДП вакцина среднее -2 среднее 2/1 2/1 2/1 среднее IV здоровые животные (контроль): 10 в ь Примечание: — тяжелая степень заболевания, "о- среДняя степень заболевания. Таблица 4 уровень еатоцитарное активности, солермамие T-, Влимфоцнтоа а крови и иммуноглобулиное Си М ° сыворотке крови олытнык животнык Составитель В, Свиридова Редактор Н. Козлова Техред М.Моргентэл КоРРектоР М Самборская Заказ 2970 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Характеристика животных и вводимого препарата здоровые животные, иммунизированные вакциной "Памавак" здоровые животные иммунизированные вакциной ВИЭВ здоровые животные иммунизированные вакциной ВИЭВ+ГМДП 5 5. 3 2 2 5/ 1 10/1 . 20,/1 2 Количество животных вновь заболевших 8 (в т.ч. 4*; 2х) 
