Противовирусное средство при гриппозной инфекции

 

Изобретение относится к медицине, в частности к лечению вирусной (гриппозной) инфекции Цель - создание химиотерзпевтического средства, обладающего противогриппозным лечебным действием Для этого предлагается использовать сукцинат - 3-5-диамино-12,4-тиадмазоп, у которого выявлена прогивогриппозная актизность 1 таба

(в) ГК ()i) 2000786 1 (51) А 1 K 31 41

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам

ВСЕС098..4ХЕИВО- ТЕХН

К mmmm

I / (21) 4717118/14 (22) 25.07.89 (46) 15.1 0.93 Бюл. Мю 37-38 (71) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины AMH СССР; Военно-медицинская академия им.С.М.Кирова (72) Поляк P.ß„. Иноземцева П.И„Четверикова Л К;

Разоренов Г.И.; Крамская ТА; Смирнов АВ.; Томчин

АБ. (73) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН (54) ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО ПРИ

ГРИППОЗНОЙ ИНВЕКЦИИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к лечению вирусной (гриппозной) инфекции

Цель — создание химиотерапевтическпго средства, обладающего противогриппозным ле ебным действием. Для этого предлагается использовать сукцинат — 3-5-диамино-1 2,4-тиадназоц у которого выявлена про тивогриппозная акгизност . 1 табл.

2000786

Изобретение относится к медицине, а именно к лекарственным препаратам, и может найти применение для профилактики и лечении вирусных заболеваний, в первую очередь гриппозной этиологии.

Борьба с вирусными заболеваниями крайне затруднена в связи с особенностями биологии этих возбудителей, их облигатным внутриклеточным паразитизмом. Одним иэ самых распространенных возбудителей вирусных заболеваний современного человечества, вызывающих регулярные эпидемии и даже пандемии, является вирус гриппа. До настоящего времени не существует эффективных и надежных средств профилактики и лечения гриппозной инфекции.

Широким антивирусным спектром действия обладают различные интерфероны.

Имеются сведения об их противогриппозном эффекте. Трудность производства этих биологических препаратов ограничивает возможность их широкого применения, кроме того изучением системы интерферонов показало, что они является гормоноподобными веществами, что служит существенным показанием для ограничения их применения в качестве противовирусных средств. Наиболее широко применяемым средством профилактики гриппа являются живые и убитые вакцины, Однако главным недостатком вакцин является необходимость регулярного приготовления новых вакцинных штаммов вируса по мере возникновения в циркуляции новых антигенных вариантов вируса.

Другим специфическим противогриппоэным средством является ремантадин.

Этот препарат обладает в основном профилактическим действием в отношении гриппа А, в связи с чем остается актуальной проблем поиска лечебных противовирусных средств.

Целью изобретения является использование в качестве противовирусного средства сукцината 3,5-динамино-1-2,4-тиадиазола.

3,5-Диамино-1,2,4-тиадиазол (амтиэол) описан в имической литературе в качестве промежуточного продукта органического синтеза. Известны радиопротекторная активность амтизола и его и-толуолсульфоната, а также антигипоксическое действие амтизола. Амтизол разрешен для клинического изучения в качестве антигипоксического средства.

Иэ антигипоксических свойств амтизола никак не вытекает обнаруженная противогриппоэная активность. тем более, что известен очень широкий круг антигипоксантов, однако ни у одного из них ан1ивирусная активность не выявлена. Противогриппоз5

55 ная активность амтизола обнаружена в экспериментах. посвященных поиску средств предотвращения постстрессорного усугубления гриппозной инфекции у мышей. Обнаруженное антигриппозное свойство амтизола послужило основанием для проведения целенаправленного исследования, которое наиболее полно выполнено с использованием его солисукцината 3,5-диамино-1,2,4-тиадиаэола, названного сунамолом. Это вещество получено смешиванием эквимолярных количеств амтизола и янтарной кислоты.

Эксперименты выполнены на беспородных белых мышах самцах, массой 16-18 г, полученных из питомника "Рапполово". В работе использован патогенный для мышей вирус гриппа А/PR/8/34 с антигенной структурой H1N1, Вирус получали заражением развивающихся 10-дневных куриных эмбрионов (КЭ).

Инфекционную активность вируса определяли стандартным титрованием 10-кратных разведен ий вируссодержащего материала на развивающихся КЭ и рассчитывали по известной методике и выражали в lg эмбриональных инфицирующих доз (ig ЭИДю).

Определение летальной для мышей дозы аллантоисного вируса проводили путем их интраназального заражения под легких эфирным наркозом соответствующими разведениями вируссодержащего материала (в объеме 0,05 мл), используя на каждую точку определения не менее" 10 мышей. За одну летальную дозу принимали разведение вируссодержащего материала, обеспечивающее гибель 50 животных (1 Ово), В соответствии с поставленными задачами экспериментальную гриппозную инфекцию моделировали интраназальным заражением мышей известными дозами вируса гриппа, обеспечивающими заданный уровень гибели животных. Для оценки эффективности противовирусной защиты исследуемого препарата использовали метод математического планирования эксперимента с последующей обработкой на ЭВМ по разработанной программе.

В результате проведенных исследований установлен наряду с профилактическим и лечебный эффект сунамола с отношении гриппа мышей, Отработаны оптимальные дозы и схема введения препарата.

Схема получения и физико-химические свойства сунамона.

Пример 1. Амтизол получается в результате окисления 2-амидннотиомочевины перекисью водорода и i. дентичен по свойствам известному.

2000786

10 г амтизола и 10 г янтарной кислоты в измельченном состоянии смешивают с 80 г безводного этилового спирта, кипятят с обратным холодильником 10 мин и выпаривают под вакуумом досуха, Получают с почти количественным выходом сукцинат 3,5-диамино-1,2,4-тиадиаэола в виде блестящих белых кристаллов, т.пл. 150 С. Строение заявляемого соединения подтверждено данными элементарного анализа и ПМРспектром.

Найдено,g: С30,61; Н 4,19; N 23,97.

СеН toN0

3,93 с (NH), с ДМФА: d 7 8,26 с (NH), 10,00 с (NH).

Результаты биологического исследования сунамола.

Критерием оценки противогриппозного действия препарата служило снижение гибели животных (мышей) при гриппозной инфекции. В результате проделанной работы установили противогриппоэное действие сунамола, выражающееся в снижении гибели мышей при гриппе. С помощью метода математического планирования эксперимента найдены оптимальная доза и схема введения препарата, Показано, что максимальный защитный эффект сунамола при гриппе мышей развивается при его использовании в диапазоне 3 — 13 мг/кг массы мышей в случае как профилактического, так и лечебного применения сунамола, В таблице представлены данные нескольких типичных опытов, иллюстрирую цие профилактическое и лечебное противогриппоэное действие сунамола при внутрибрюшинном и пероральном способах введения препарата.

Установленo, что использование сунамола оказывает выраженный защитный эффект — снижает гибель животных при

35 гриппозной инфекции на 30-60$ (см. тИлица. графа 6).

Наибольшего внимания эаслуживаки два экспериментальных факта. Вп-первых, сведения о наличии лечебного эффекте у исследуемого препарата, поскольку в настоящее время не существует химио1ерапевтических противогриппозных средств, обладающих лечебными свойствами. Вовторых, существенно, чго способность сунамола снижать гибель мышей при гриппе проявляется независимо от способа введения препарата интроперитонеально или перорально. Последнее является ценным свойством при разработке в дальнейшем широкодоступных и удобных лечебных форм, Сведения о токсичности сунамола, Определение токсичности сунамола при внутрибрюшинном введении проводили по Беренсу. Величина LDm составила 160 мг/кг. LDgo сунамола при пероральном введении беспородным белым мышам составила 1120 мг/кг. Данный nоказàTåëь определяли по методике Проэоровского, По сравнению с известными противогрип пози ьили средствами предлагаемое имеет ряд существенных преимуществ.

Основное достоинство сунамола заключается в том, что в отличие от известных противогриппозных средств, он является единственным химиотерапевтическим npenapaтом лечебного действия. По сравнению с протигриппоэными препаратами биологической природы, какими являются интерфероны и вакцины, сунамол как синтетический продукт более доступен для промышленного производства и стабилен при хранении, (56) M,/t.MàUjêoâñêèé, Лекарс1ленные средства. М.: 1988, ч. 2, с, 380.

К.Stratton et al. — Intern J.Rarllation

B iolog, 1962, ч. 5, р, 105 — 121.

2000786

Снижение гибели беспородных мышей при гриппозной инфекции под влиянием сунамола

Применение сукцината < 3,5 диамино-1,2,4тиадиазола в качестве противовирусного средства при гриппозной инфекции, Составитель Л.Столярова

Тех ред М.Моргентал Корректор С. Шекмар

Редактор

Тираж Подписное

НПО "Поиск Роспатента

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Заказ 3096

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Г;«,.<««<л 101

*Доза препарата 5 мг/кг или 10 мг/кг, соответственно при введенци внутрибрюшинно и перорально

Примечание. Сведения, содержащиеся в графах таблицы: 1 — порядковый номер эксперимента;

2 — группа зараженных вирусом животных нелеченных (контроль) и леченных (опыт);

3 и 4 способ введения препарата, соответственно, внутрибрюшинно или перораль (лечебная или проифлактическая схема);

5 — гибель мышей в каждой группе животных на 14-е сут. после заражения, ;

6- разница в гибели мышей в каждом отдельном опыте между контрольной.или опытной группами животных.

Формула изобретения

; ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО ПРИ ГРИППОЗНОИ ИНФЕКЦИИ