Способ диагностики мужского фактора невынашивания беременности в первом триместре
Изобретение относится к области медицины. Способ диагностики мужского фактора невынашивания беременности в первом триместре, основанный на определении качественно-количественных характеристик эякулята. Проводят исследование эякулята при помощи проточной цитофлуорометрии. В качестве флуорохрома используют этидия бромид. Анализируют гистограммы, отражающие распределение клеток по малоугловому светорассеянию и по интенсивности флуоресценции ДНК в красной области спектра (λ=620 нм). В гистограммах, отражающих распределение клеток по малоугловому светорассеянию, определяют процентное содержание в эякуляте клеток доминирующей популяции, коэффициент вариации светорассеяния в этой популяции. В гистограммах, отражающих распределение клеток по интенсивности флюоресценции ДНК, определяют коэффициент вариации интенсивности флуоресценции в доминирующей популяции. С помощью математической обработки полученных результатов выведено решающее правило определения диагностического индекса (MF). Получив MF>0, диагностируют мужской фактор риска прерывания беременности в первом триместре, при MF<0 считают мужской фактор несущественным. Способ обеспечивает эффективность и специфичность диагностики прогноза мужского фактора невынашивания беременности.
Область применения: Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.
Уровень техники
Аналоги
1. Способ определения фертильности мужчин (А.С. №1389758, П.С. №5009816/14 от 20.11.91) [1, 2]. Данный метод рекомендован к применению в практической деятельности лечебным учреждениям. Однако применение белков фертильности для определения мужского фактора патологического течения беременности раскрывает патогенетический механизм развития этого фактора, не выявляя при этом морфологическую сущность явления. Методика не учитывает количественно-качественную характеристику эякулята.
2. Определение мужского фактора при внутриутробной гибели плода и эмбриона [4]. Способом проточной цитофлуорометрии определялось количество гаплоидных сперматозоидов в эякуляте. Определены критерии риска неблагоприятного исхода беременности. Однако предложенная методика также не учитывает качественно-количественные показатели эякулята, состояние хроматина сперматозоидов.
Прототип
Прототипом предложенного способа является метод Drudy L. and al. [5]. Методика носит описательный характер, учитывает не все качественно-количественные показатели эякулята, в ней не выделены критерии риска неблагоприятного исхода беременности.
Сущность изобретения
Цель изобретения заключается в разработке способа диагностики мужского фактора невынашивания путем определения влияния качественно-количественных характеристик эякулята на течение беременности в первом триместре.
Способ осуществляют следующим способом:
Проводят исследование эякулята, полученного способом мастурбации после 4-6-дневного воздержания, по методике «Руководства ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью» [3]. После приготовления нативного мазка и окраске его по способу Папаникалау, используя строгий критерий Крюгера (Kruger T.F., 1986, 1993), оценивают морфологию сперматозоидов. Определяют следующие показатели:
- содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией (%),
- количество в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией (млн),
- концентрация сперматозоидов с нормальной морфологией (млн/мл).
Затем проводят исследование эякулята при помощи проточной цитофлуорометрии. В качестве флуорохрома используют этидия бромид. Анализируют гистограммы, отражающие распределение клеток по малоугловому светорассеянию и по интенсивности флуоресценции ДНК в красной области спектра (λ=620 нм). В гистограммах, отражающих распределение клеток по малоугловому светорассеянию, определяют процентное содержание в эякуляте клеток доминирующей популяции, коэффициент вариации светорассеяния в этой популяции. В гистограммах, отражающих распределение клеток по интенсивности флюоресценции ДНК, определяют коэффициент вариации интенсивности флуоресценции в доминирующей популяции.
С помощью математической обработки полученных результатов выведено решающее правило определения диагностического индекса:
MF=1,203-0,043·N1+0,005·N2-0,013·N3-0,026·N4+0,054·N5+0,027·N6
где MF - диагностический индекс (male factor),
N1 - содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, (%),
N2 - количество в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией (млн),
N3 - концентрация сперматозоидов с нормальной морфологией (млн/мл),
N4 - содержание клеток доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния (%),
N5 - коэффициент вариации светорассеяния доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния,
N6 - коэффициент вариации интенсивности флуоресценции ДНК в доминирующей популяции.
Получив MF>0, диагностируют мужской фактор риска прерывания беременности в первом триместре, при MF<0 - считают мужской фактор несущественным.
Чувствительность метода прогноза мужского фактора невынашивания беременности составляет 89,3%, специфичность - 94%, эффективность - 91,2%.
Пример I
Глотов Д.А., амбулаторная карта №85. Беременность у супруги осложнилась выраженной угрозой прерывания беременности в первом триместре, произошел самопроизвольный выкидыш в 10 недель.
N1 (содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, %) - 18,
N2 (количество в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, млн) - 31,75,
N3 (концентрация сперматозоидов с нормальной морфологией, млн/мл) - 11,34,
N4 (содержание клеток доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния, %) - 7,99,
N5 (коэффициент вариации светорассеяния доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния) - 20,18,
N6 (коэффициент вариации интенсивности флуоресценции ДНК в доминирующей популяции) - 24,78,
MF=1,203-0,043·N1+0,005·N2-0,013·N3-0,026·N4+0,054·N5+0,027·N6=1,99.
Учитывая положительное значение индекса MF, диагностируется мужской фактор невынашивания беременности. При подготовке супружеской пары к следующей беременности требуется провести курс терапии, направленный на улучшение качества половых клеток мужа.
Пример II
Братчиков Ф.И., амбулаторная карта №118. Беременность у супруги осложнилась выраженной угрозой прерывания беременности в первом триместре, произошел самопроизвольный выкидыш в 9 недель.
N1 (содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, %) - 54,
N2 (количество в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, млн) - 129,06,
N3 (концентрация сперматозоидов с нормальной морфологией, млн/мл) - 49,64,
N4 (содержание клеток доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния, %) - 98,52,
N5 (коэффициент вариации светорассеяния доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния) - 26,35,
N6 (коэффициент вариации интенсивности флуоресценции ДНК в доминирующей популяции) - 37,62,
MF=1,203-0,043·N1+0,005·N2-0,013·N3-0,026·N4+0,054·N5+0,027·N6=-1,2.
Отрицательное значение индекса MF указывает на отсутствие мужского фактора прерывания беременности. Супружеской паре показано проведение общепринятой предгравидарной подготовки.
Таким образом, определение мужского фактора невынашивания беременности в первом триместре позволяет качественно проводить подготовку супружеской пары к последующей беременности.
Источники информации
1. Комплексная оценка состояния генеративной функции в супружеской паре при невынашивании беременности и способы коррекции ее нарушений: Методические рекомендации /Посисеева Л.В., Борзова Н.Ю., Сотникова Н.Ю., Жукова Т.П., Сидоров А.Н., Голубев А.В./ - Иваново, 1996. - 18 с.
2. Организация профилактики невынашивания беременности в супружеской паре: Методические рекомендации / Городков В.Н., Посисеева Л.В., Васильева Т.П., Татариновым Ю.С., Олефиренко Г.А. - Иваново, 1991. - 11 с.
3. Руководство ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью. 4-е издание - М.: МедПресс, 2001. - 144 с.
4. Салов И.А., Клечан М.М., Маринушкин Д.Н. Мужской фактор риска внутриутробной гибели плода или эмбриона.//Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. - 2000. №3. - С.28-30.
5. Drudy L., McCaffrey M., Mallon E., Harrison R. Spermatozoal DNA flow cytometry and recurrent miscarriage. Arch Androl. 1996 Nov-Dec; 37 (3): 143-7.
Способ диагностики мужского фактора невынашивания беременности в первом триместре путем исследования эякулята, отличающийся тем, что оценивают морфологию сперматозоидов, определяя содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией в процентном и количественном отношениях и гистограммы проточной цитофлуорометрии эякулята и вычисляют диагностический индекс по формуле:
MF=1,203-0,043·N1+0,005·N2-0,013·N3-0,026·N4+0,054·N5+0,027·N6,
MF - диагностический индекс (male factor);
N1 - содержание в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, %;
N2 - количество в эякуляте сперматозоидов с нормальной морфологией, млн;
N3 - концентрация сперматозоидов с нормальной морфологией, млн/мл;
N4 - содержание клеток доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния, %;
N5 - коэффициент вариации светорассеяния доминирующей популяции в гистограмме малоуглового светорассеяния;
N6 - коэффициент вариации интенсивности флуоресценции ДНК в доминирующей популяции,
при MF более 0 диагностируют мужской фактор невынашивания беременности, если же MF менее 0, считают мужской фактор несущественным в невынашивании беременности в первом триместре.
