Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением
Владельцы патента RU 2311189:
Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный Институт Нечерноземной зоны РФ Российской Академии сельскохозяйственных наук (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии. В качестве биологически активного стимулятора используют спиртовой экстракт смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки. Данный стимулятор назначают телятам для коррекции вторичных иммунодефицитов в виде водного раствора 7-8% концентрации в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного в течение 10-15 суток с интервалом в 24 часа. Стимулятор назначают в дополнение к инъекции зоолана, который вводят внутримышечно в виде 0,3% водного раствора. Изобретение позволяет повысить защитные реакции организма у клинически здоровых телят и сократить сроки лечения и возникновение рецидивов у больных. 2 н.п. ф-лы, 6 табл.
Изобретение относится к ветеринарии, касается средства растительного происхождения, обладающего иммуностимулирующим действием, и может быть использовано как основной или дополнительный компонент стимуляции иммунной системы молодняка сельскохозяйственных животных, преимущественно телят, для повышения общей резистентности и иммунологической реактивности к действию различных повреждающих агентов.
Применение иммуномодулирующих препаратов направлено преимущественно на коррекцию вторичных иммунодефицитов, которые проявляются в частых, рецидивирующих, трудно поддающихся лечению инфекционно-воспалительных заболеваниях различной локализации. Для молодняка крупного рогатого скота первые дни жизни и начало выпойки сборного молока (в 20-дневном возрасте) являются критическими иммунологическими периодами, что связано с физиологическими особенностями организма телят, в частности иммунодефицитным состоянием организма телят до первой выпойки молозива, а в 20-дневном возрасте - с расходыванием молозивных защитных белков при недостаточности собственного иммунопоэза, а также стрессами из-за смены кормления и перехода от индивидуального к групповому содержанию. Так, наши исследования, проведенные в хозяйствах Нижегородской области, длительно неблагополучных по желудочно-кишечным и респираторным инфекциям, выявили иммунодефицитные состояния у клинически здоровых телят как 3-5-, так и 20-дневного возраста (таблицы 1 и 2).
| Таблица 1 | ||
| Иммунный статус телят 3-5-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия 1 | ||
| Показатели | Клинически здоровые телята | Здоровые телята из благополучного хозяйства |
| Лейкоциты, 109\л | 6,2±0,1 | 7,1±0,1 |
| Эритроциты, 1012/л | 5,7±0,2 | 6,6±0,2 |
| Функциональная активность нейтрофилов крови, %: | ||
| - спонтанный тест | ||
| - индуцированный тест | 3,2±0,2 | 4,8±0,4 |
| 6,7±0,4 | 10,4±0,7 | |
| Бактерицидная активность сыворотки крови, % | 39,4±3,0 | 52,1±2,4 |
| Лизоцимная активность сыворотки крови, % | 1,5±0,2 | 2,5±0,2 |
| Общий белок, г % | 5,0±0,2 | 6,12±0,1 |
| Таблица 2 | ||
| Иммунный статус телят 20-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия | ||
| Показатели | Клинически здоровые телята 20-дневного возраста | Здоровые телята 20-дневного возраста из благополучного хозяйства |
| Лейкоциты, 109/л | 7,1±0,1 | 7,5±0,1 |
| Эритроциты, 1012/л | 7,6±0,1 | 8,0±0,1 |
| Функциональная активность нейтрофилов крови, %: | ||
| - спонтанный тест | 3,8±0,2 | 4,8±0,1 |
| - индуцированный тест | 12,8±1,0 | 25,6±1,2 |
| Бактерицидная активность сыворотки крови, % | 51,4±1,3 | 76,0±1,6 |
| Лизоцимная активность сыворотки крови, % | 1,5±0,2 | 3,8±0,1 |
| Общий белок, г % | 5,86±0,12 | 8,36±0,04 |
Известен ряд неспецифических стимуляторов иммунитета (синтетического, бактериального, растительного происхождения), различающихся по структуре и механизмам действия.
Из известных препаратов растительного происхождения иммуностимулирующие свойства наиболее изучены у препаратов элеутерококка, пустырника, препаратов из семян тыквы, травы эхинацеи пурпурной, левзеи сафлоровидной. Однако данные об иммунотропном действии этих препаратов отличаются противоречивостью /1, 2, 3, 4, 5, 6/.
Известен также препарат растительного происхождения тетраиммунофит-фитоэкстракционный препарат из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающий иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ /7/.
Наиболее близким к заявленному является средство, обладающее иммуностимулирующим действием, представляющее собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L), тимьяна ползучего (Thymus serpyllum), мяты перечной (Mentha piperita L.) и мать-и-мачехи (Tussilago farfara), взятых в равных количествах /8/.
С целью расширения арсенала средств, обладающих иммуностимулирующим действием, предлагается использовать экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной (Echinazea purpurea), мать-и-мачехи (Tussilago farfara), травы тимьяна ползучего (Thymus serpyllum) и корней солодки (Glycyrrhiza glabra), взятых в равных количествах.
Эхинацея пурпурная (Echinazea purpurea) - многолетнее травянистое растение с коротким корневищем, плод - серовато-бурая семянка. Разводится в южной и средней полосах европейской части России. Собирают цветочные корзинки в июле-августе, корневища с корнями - поздней осенью. Химический состав: эфирное масло (в цветочных корзинках 0,13-0,48%), в состав которого входит нециклический секвитерпен, гликозид, бетаин, смола, органические кислоты (пальмитиновая, линолевая, церотиновая), фитостерины (в корнях). В народной и научной медицине эхинацею пурпурную применяют в комплексной терапии рецидивирующих инфекционно-воспалительных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Противопоказания к применению: гиперчувствительность, аутоиммунные заболевания, туберкулез, лейкоз, беременность, период лактации, детский возраст, хронические заболевания печени.
Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, уроновые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.
Тимьян ползучий (Thymus serpyllum) естественно растет в лесной зоне. Собирают надземные части растений в период цветения. Химический состав: эфирное масло, дубильные вещества, горечи, флавоноиды, урсоловая и олеаноловая кислоты. В народной и научной медицине чабрец применяют как отхаркивающее, антисептическое, противосудорожное и болеутоляющее средство.
Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее корнеотпрысковое травянистое растение семейства. В диком виде произрастает на юге Западной Европы, в Средиземноморье, Передней Азии, Иране, Турции, Афганистане, Китае, в России - на юге европейской части и в Западной Сибири. Собирают корневища с корнями весной или летом. Химический состав: тритерпеновый сапонин глицирризин - кальциевая и калиевая соли глицирризоновой кислоты (23%), флаваноиды, производные флаванона и халкона, полисахариды (крахмал, пектиновые вещества), аскорбиновая кислота. Препараты корня солодки применяют как отхаркивающее и слабительное (порошок, экстракты сухой и густой, сироп, эликсир грудной), как противовоспалительное, спазмолитическое и антисекреторное средство при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, антиаллергическое, противовоспалительное при бронхиальной астме, экземах, аллергических дерматитах.
Экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки готовится фармакопейным способом в соотношении сырья и извлекателя 1:10. В качестве экстрагента используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.
Пример. В стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°С в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье.
Для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят на фоне внутримышечной инъекции зоолана применяют биологически активный стимулятор в виде раствора 7-8% концентрации, который готовят на охлажденной кипяченой воде и дают внутрь в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1. Стимулирующее влияние биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на иммунологический статус новорожденных телят изучали в хозяйстве, длительно неблагополучном по болезням молодняка телят (заболеваемость 50-70%, смертность - 20-40%). В условиях неполноценности (дефицит макро- и микроэлементов) кормления коров-матерей (зимний стойловый период) по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, породы и массы тела по принципу аналогов формировали 2 группы новорожденных телят живой массой при рождении 28-30 кг для опыта и контроля. Телятам первой группы (опытной - 14 голов) применяли внутрь биологически активный стимулятор в виде водного раствора 7% концентрации в дозе 2,0 мл/кг массы животного в течение 10 дней с интервалом в 24 часа. Телята контрольной группы (16 голов) препарата не получали. Параметры иммунологического статуса телят изучали на 1, 6 и 12 сутки по общепринятым в биологии современным тестам. Результаты представлены в таблице 3.
| Таблица 3 | |||
| Иммунобиологические показатели крови телят. | |||
| Показатели | Возраст, сут | ||
| 1 | 6 | 12 | |
| Т-лимфоциты, % | |  |  |
| В-лимфоциты, % |  |  |  |
| Бактерицидная активность, % |  |  |  |
| Лизоцимная активность, % |  |  |  |
| Бетализинная активность, % |  |  |  |
| Иммуноглобулины, мг/мл | |||
| G |  |  |  |
| М |  |  |  |
| Общий белок, г % |  |  |  |
| Примечание: в числителе - показатели подопытных животных, в знаменателе - контрольных |
При анализе иммунобиологических показателей (таблица 3) подопытных и контрольных телят установили, что в возрасте 1 суток различия практически отсутствовали. У животных опытной группы к 6-дневному возрасту происходило повышение основных показателей клеточного и гуморального иммунитета, которое продолжилось до 12-дневного возраста. Важное практическое значение имело увеличение количества иммуноглобулинов в сыворотке крови подопытных телят, что свидетельствовало о лучшей усвояемости новорожденными молозивных и более раннем начале синтеза собственных иммуноглобулинов.
Пример 2. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят (заболеваемость 50-70%, летальность - 20-40%). По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 1-3-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Телята опытной группы дополнительно применяли внутрь биологически активный стимулятор в виде водного раствора 7% концентрации в дозе 2,0 мл/кг массы животного в течение 10 дней с интервалом в 24 часа. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 4).
Как видно из таблицы 4, во всех опытных группах проявилась тенденция к нормализации иммунобиологических показателей. Более выраженные изменения нормализующего характера установлены в первой группе.
| Таблица 4 | |||
| Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора | |||
| Показатели | Группы телят | ||
| Первая | Вторая | Третья | |
| Способ воздействия | Зоолан + заявленное средство | Зоолан + фитоэкстракт (аналог) | Зоолан (базовый способ) |
| Т-лимфоциты, % |  |  |  |
| В-лимфоциты, % |  |  |  |
| Бактерицидная активность, % |  |  |  |
| Лизоцимная активность, % |  |  |  |
| Бетализинная активность, % |  |  |  |
| Иммуноглобулины, мг/мл | |||
| G | |  |  |
| М |  |  |  |
| Общий белок, г % |  |  |  |
| Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - через 5 дней после окончания опыта |
Пример 3. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по респираторным болезням телят вирусно-бактериальной этиологии с заболеваемостью до 60%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) подтвердили их выделением в сыворотках телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 77,5, 87,5 и 85,7% случаев соответственно. Бактериальная микрофлора была представлена стрептококками, сальмонеллами и протеями. Иммунологический статус характеризовался снижением на 10-12% относительного содержания В-лимфоцитов, популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов с нарушением их соотношений, функциональной активности нейтрофилов, снижением уровня иммуноглобулинов G и М, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 10-15-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 5).
| Таблица 5 | |||
| Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора | |||
| Показатели | Группы телят | ||
| Первая | Вторая | Третья | |
| Способ воздействия | Зоолан + заявленное средство | Зоолан + фитоэкстракт (аналог) | Зоолан (базовый способ) |
| Т-лимфоциты, % |  |  |  |
| В-лимфоциты, % |  |  |  |
| Бактерицидная активность, % |  |  |  |
| Лизоцимная активность, % |  |  |  |
| Бетализинная активность, % |  |  |  |
| Фагоцитарная активность нейтрофилов крови (НТС-тест), % | |||
| - спонтанный |  |  |  |
| - индуцированный |  |  |  |
| Иммуноглобулины, мг/мл | |||
| G |  |  |  |
| М |  |  |  |
| Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - показатели после окончания опыта |
Пример 4. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по вирусным респираторным болезням телят с заболеваемостью 70-80%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) подтвердили их выделением в сыворотках телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 77,5, 87,5 и 85,7% случаев соответственно. Иммунологический статус характеризовался снижением на 10-12% относительного содержания В-лимфоцитов, популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов с нарушением их соотношений, функциональной активности нейтрофилов, снижением уровня иммуноглобулинов G и М, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 6).
Как видно из таблицы 6, после применения биологически активного стимулятора повышались все показатели естественной резистентности, в частности бактерицидная активность сыворотки крови на 31,2 и 32,6%, лизоцимная активность сыворотки крови на 31,8 и 36,4%, β-лизинная активность сыворотки крови на 35,6 и 36,6%, функциональная активность нейтрофилов крови в спонтанном НСТ-тесте на 5,1% и в индуцированном тесте на 21,5 и 22,7% соответственно. Клинические наблюдения за животными вели до 2-месячного возраста. После курса обработки заявленным средством телята не заболевали. Заболеваемость телят во второй группе составила 90%, заболевший теленок переболел в легкой форме. В контроле из 3 заболевших телят один пал, еще один был вынужденно убит.
Проведенные нами исследования показали, что экстракт смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки обладает иммуностимулирующей активностью, которая может быть использована для коррекции вторичных иммунодефицитов и стимуляции естественной резистентности при инфекционных заболеваниях, патогенетически связанных с недостаточностью иммунной системы. Эффективность заявленного биологически активного стимулятора обеспечивается наличием в его составе веществ, повышающих функциональную активность антиоксидантной и иммунной систем, в частности макрофагальных клеток. Средство является нетоксичным, содержит биодоступные полезные биологически активные вещества, включающие, например, эфирное масло, флавоноиды, картиноиды, фитостерин, сапонины, обладает экологической чистотой.
Источники информации
1. А.Д.Алтунин и др. // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: Материалы 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000.
2. И.Ф.Горлов и др. // Ветеринария, 1996, №7.
3. А.А.Ивановский // Ветеринарный врач, 2000, №2.
4. А.В.Коробко // Ветеринария, 2000, №5.
5. В.П.Николаенко // Ветеринария, 1990, №4.
6. Ш.Б.Садыков // Ветеринария, 1990, №4.
7. Л.А.Макарадзе // Ветеринария, 1999, №3.
8. RU 22501101 С1, 2005.
1. Биологически активный стимулятор, содержащий спиртовой экстракт растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют смесь равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки
2. Способ коррекции вторичных иммунодефицитов, включающий внутримышечную инъекцию зоолана в виде 0,3% водного раствора, отличающийся тем, что дополнительно назначают для применения внутрь спиртовой экстракт равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки в виде водного раствора 7-8% концентрации в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 ч.
