Пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил) фосфиноксидов, обладающие противотуберкулезной активностью

Настоящее изобретение относится к пиридиноилгидразонам диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов (Ia-в) для лечения туберкулеза, которые могут применяться в медицине и ветеринарии:

Ia Py=4-Py,R=Et;

Iб Py=4-Py, R=Рr;

Iв Py=3-Py, R=Et.

Предложены новые эффективные противотуберкулезные препараты с низкой токсичностью, не проявляющие нейротоксического действия. 1 з.п. ф-лы, 3 пр., 2 табл.

 

Изобретение относится к области органической химии, в частности к синтезу новых химических соединений с практически полезными свойствами, а именно к пиридиноилгидразонам диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидам общей формулы I:

Ia Py=4-Py, R=Et;

Iб Py=4-Py, R=Pr;

Iв Py=3-Py, R=Et;

обладающих высокой противотуберкулезной активностью и низкой токсичностью. Заявляемые соединения могут найти применение в медицине и ветеринарии. Их свойства и способ получения в литературе не описаны.

Туберкулез остается большой угрозой, в то время как устойчивость микобактерий к лекарствам продолжает увеличиваться. Известно, что микобактерии отличаются сложным строением клеточной мембраны, препятствующей проникновению терапевтических агентов, существованием латентных, «дремлющих» форм, а также способностью вырабатывать резистентность. Это приводит к тому, что туберкулез занимает первое место в структуре смертности больных с инфекционными заболеваниями [Л.А. Каюкова, К.Д. Пралиев. Основные направления поиска новых противотуберкулезных средств. Хим.-фарм. журнал, 2000. Т.34, №1. стр.12-19; K.E.A. Lougheed, D.L. Taylo, S.A. Osborne, J.S. Bryans, R.S. Buxton. New anti-tuberculosis agents amongst known drugs. Tuberculosis, 2009, vol 89, S1, S5-S9.].

Особую угрозу представляют резистентные и мультирезистентные (MDR) штаммы, последние устойчивы одновременно к нескольким лекарственным препаратам. Заболевания, вызванные MDR-штаммами М. tuberculosis, имеют остро прогрессирующий характер и плохо поддаются лечению существующими препаратами, поэтому необходим поиск новых соединений обладающих противотуберкулезной активностью.

По рекомендации ВОЗ, основу антимикобактериальной терапии составляет специальный направленный краткосрочный курс химиотерапии (DOTS), ключевыми противотуберкулезными препаратами которого являются изониазид, рифампицин, пиразинамид, стрептомицин и этамбутол. Однако необходимо иметь в виду факторы, ограничивающие применение существующих терапевтических средств: (1) устойчивость некоторых штаммов микобактерий к применяемым противотуберкулезным препаратам, в том числе и к изониазиду; (2) серьезные побочные эффекты, вызываемые при продолжительном лечении данными препаратами; и (3) отсутствие эффективного лечения туберкулеза у ВИЧ-инфицированных пациентов [Пресс-релиз международной конференции "Разработка противотуберкулезных терапевтических агентов нового поколения. Проблемы, подходы, перспективы" ЦВТ ХИМРАР, Химки, Моск. обл., 28.12.2006, chem-rar.ru; R.С. Goldman, В.Е. Laughon. Discovery and validation of new antitu-bercular compounds as potential drug leads and probes. Tuberculosis. 2009, vol 89, 331-333; D.A. Mitchison, P.B. Fourie. The near future: Improving the activity of rifamycins andpyrazinamide. Tuberculosis 2010, vol 90, 177-181].

Существует большое количество противотуберкулезных препаратов, и их современная классификация основана на эффективности их влияния на возбудителя. Наиболее эффективные препараты: изониазид (ГИНК, тубазид) и антибиотик рифампицин; препараты средней эффективности: антибиотики стрепомицин, канамицин, флоримицин (биомицин), циклосерин, химиопрепараты этамбутол, этионамид, протионамид, пиразинамид (тизамид) и препараты умеренной эффективности: ПАСК (пара-аыино-салициловая кислота), тибон (тиоцетазон).

Несмотря на наличие большого количества противотуберкулезных средств, изониазид, представляющий собой гидразид изоникотиновой кислоты, является лучшим из существующих препаратов и входит в состав практически всех схем профилактики и лечения туберкулеза животных и людей [А.А. Визель. Лечение туберкулеза органов дыхания. Казань, ГПВЭО «Саламат», 1998, 119 с.; М.Д. Машковский. Лекарственные средства. Т.2. Москва, Медицина, 1993, с.368]. Изониазид продолжает широко использоваться в химиотерапии туберкулеза, хотя является токсичным препаратом, а некоторые штаммы, например H37Rv, быстро приобретают резистентность к нему. Так С.П. Булавин относит его к высокотоксичным соединением (для мышей - ЛД50 равна 178.0±6.79 мг/кг массы) [С.77. Булавин. Фармакологическая характеристика тубазида. // Бюлл. ВИЭВ. М., 1982. Вып.48, с.61-62], а в справочнике Г.П. Беспамятнова и Ю.А. Кротова токсичность изониазида оценивается как LD50 150 мг/кг [Г.П. Беспамятное, Ю.А. Кротов, Предельно допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде. Ленинград, «Химия», 1985].

Значительное время считалось, что изомер изониазида, гидразид никотиновой кислоты, не обладают антитуберкулезной активностью. Даже в учебниках утверждалось, что «гидразид 4-пиридинкарбоновой (изоникотиновой) кислоты обладает очень высокой противотуберкулезной активностью, а гидразид 3-пиридинкарбоновой (никотиновой) кислоты совершенно лишен этого действия» [Г.Н. Першин, Е.И. Гвоздева. Учебник фармакологии, Медицина, Москва (1967), с 22]. Однако в 2011 году появилась статья [R.V. Sidhaye, А.Е. Dhanawade, K. Manasa, G. Aishwarya. Current Pharma Research, 1(2), 135-139 (2011)], в которой сообщалось, что гидразид никотиновой кислоты все же проявляет активность против штамма H37RV, хотя и слабее изониазида: 6.25 мг/мл против 1.25 мг/мл у изониазида (сопоставительный анализ).

Наиболее близкими по структуре и назначению к заявляемым пири-диноилгидразонам диалкил(2-метил-4-оксо-пент-2-ил)фосфиноксидам 1а-в являются производные изониазида общей формулы (II), такие как фтивазид (IIa), салюзид (IIб), ИНГА-17 (IIв) и ларусан (IIг), содержащие при терминальном атоме азота гидразидного фрагмента остаток соответствующего карбонильного соединения:

фтивазид (IIа), R1=Н, R2=4-НО-3-Н3СОС6Н3;

салюзид (IIб), R1=Н, R2=2-НООС-3,4-(Н3СО)2С6Н2;

ИНГА-17 (IIв), R1=Н, R2=4-H3C(=O)NHC6H4;

ларусан (IIг), R1=СН3, R2=-CH=CH-Furyl-2

Фтивазид (IIа), салюзид (IIб), ИНГА-17 (IIв) и ларусан (IIг), ранее были предложены как антитуберкулезные препараты с меньшей токсичностью, чем у изониазида. Однако с уменьшением токсичности у приведенных производных изониазида IIа-г уменьшилась и антитуберкулезная активность и наибольшее применение из них получил только фтивазид (IIа). Например, для ларусана МИК составляет 1.57 мкг/мл [Г.П. Беспамятное, Ю.А. Кротов, Предельно допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде. Ленинград, «Химия», 1985] по сравнению с 0.1-0.6 мкг/мл для изониазида. Для фтивазида МИК оценивается около 1 мкг/мл, а токсичность его менее 100 мг/кг [А.В. Сыроешкин, Н.А. Степанова, П.И. Попов, А.В. Балышев, Т.В. Плетнева. Прогнозирование токсичности химических соединений группы противотуберкулезных лекарственных средств методом количественных корреляций структура-активность. СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА, 2009, №4, 28-31].

Известно, что изониазид и его производные IIа-г, используемые для профилактики и лечения туберкулеза, не только токсичны, но и не свободны от ряда побочных эффектов. Как фармакологические средства они поражают печень, центрально-нервную, сердечнососудистую и эндокринную системы, способны вызывать изменение показателей обмена веществ и вызывать местные аллергические реакции, а при передозировке могут приводить к отравлениям и даже к летальному исходу [A. Lee, et al. Novel mutations in isoniazidresistant Myco-bacterium tuberculosis isolates. Antimicrob Agents Chemother, 2001, vol. 145, 2157-2159;. Л.А. Саджа. Биохимическое обоснование путей снижения гепатотоксичности изониазида на основе сочетания с полисахаридами: Автореф. дис.канд. фарм. наук., Пятигорская гос. фарм. академия. Пятигорск, 1999, 21 с; Хоменко А.Г, Авербах М.М., Алексамндрова А.В. Туберкулез органов дыхания. Москва, медицина. 1988]. Важно отметить, что токсичность изониазида связана в основном с его метаболитами [Н.П. Скакун, В.В. Шманъко. Сущность гепатотокси-ческого действия изониазида. Врачебное дело, 1984, №1, с.49-52], поэтому синтез аналога изониазида, возможно, с другим типом метаболизма, приводящим к снижению токсичности, вызывает особый интерес и является перспективной задачей.

В связи с тем, что изониазид и его структурные аналоги строения IIа-г относятся к достаточно токсичным препаратам и обладают рядом нежелательных побочных эффектов, то поиск новых эффективных противотуберкулезных соединений с низкой токсичностью, близких по строению и фармакологическому действию к лекарствам, применяемым в медицинской практике и с лучшим терапевтическим индексом является актуальной задачей.

Задача изобретения - новые менее токсичные производные изониазида и его изомера - гидразида никотиновой кислоты, обладающие противотуберкулезным действием, расширяющие арсенал известных средств указанного назначения.

Технический результат изобретения - новые противотуберкулезные средства, обладающие высокой активностью (на уровне туберкулостатиков первого ряда) и низкой токсичностью.

Технический результат достигается заявляемыми новыми соединениями, а именно изоникотиноилгидразоном (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида формулы Iа, изоникотиноилгидразоном (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфиноксида формулы I,б и никотиноилгидра-зоном (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида формулы Iв.

Сущность способа получения заявляемых соединений Ia-в заключается во взаимодействии гидразида изоникотиновой кислоты с (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксидом или с (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфиноксидом и, соответственно, во взаимодействии гидразида никотиновой кислоты с (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксидом.

Синтез предлагаемых пиридиноилгидразонов диалкил(2-метил-4-оксопечт-2-ил)фосфиноксидов Ia-в проводится в соответствии со следующей схемой:

Исходные (2-метил-4-оксопент-2-ил)диалкилфосфиноксиды получены по способу, описанному в патенте [RU №2374260 «Способ получения диалкил(арил)-1,1-диметил-1-ил-фосфиноксидов», опубл. 27.11.2009].

Чистоту полученных целевых соединений контролировали методом ТСХ на пластинках «Silufol», их структура установлена с использованием нескольких физико-химических методов: ИК-спектрометрия, ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия.

Для лучшего понимания изобретения приводим примеры получения заявляемых соединений Ia-в и результаты изучения токсичности и антитуберкулезной активности.

Пример 1. Изоникотиноилгидразон (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида (Iа). Смесь 5.9 г (0.0292 моль) (1-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида и 4 г (0.0292 моль) гидразида изони-котиновой кислоты и 50 мл бензола нагревают в круглодонной колбе, снабженной насадкой Дина-Старка и магнитной мешалкой в течение 1.5 ч, затем растворитель удаляют перегонкой. Полученное масло постепенно переходит в порошкообразную массу, которую промывают абсолютным диэтиловым эфиром, порошок отфильтровают и высушивают в вакууме (12 мм. рт.ст., 60°C). Получают 8.8 г (93%), изоникотингидразона (1-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида (1а) в виде белого порошка, т.пл 144-146°C.

Найдено, %: C 59.57(59.32); H 7.96; N 12.36. C10H21N3O2P.

Вычислено, %: C 59.43; H 8.10; N 12.99.

ИК, FT-IR spectrometer "Vector-22" (Bruker), вазелин, см-1: 412, 453, 483, 509, 538, 617, 656, 671, 702, 748, 762, 791, 845, 887, 916, 954, 990, 1031, 1064, 1136, 1171, 1191, 1215, 1245, 1301, 1324, 1370, 1408, 1436, 1465, 1538, 1593, 1609, 1666, 1964, 2821, 2885, 2948, 2976, 3036, 3145, 3428.

ЯМР спектры, Bruker «Avans 400»: Спектр ЯМР 31Р-{1H}: δp 62.73 м.д., 62.53 м.д. Спектр ЯМР 1H (5 м.д., JГц): 1.20 д. т (H8, 6H, 3JPCCH 15.0, 2JHCCCH 7.7), 1.36 д (H1,6, 6H, 3JPCCH 14.0), 1.62-1.84 м (H7, 4H, 2JPCH 15.6, 3JHCCH 7.9), 2.28 с (H5, 3Н), 2.50 д (H3, 2Н, 3JPCCH 14.6), 8.07 д (H12, 1H, 3JHCCH 6.1), 8.76 д (H11, 1H, 3JHCCH 5.9). Спектр ЯМР 13C (150.9 МГц, CDCl3, 5 м.д., J Гц, 32°C): 6.62 к.д. (д) (C8, 1JHC 129.5, 2JPCC 5.1), 17.69 т.д. (д) (C7, 1JHC 127.4, 1JPC 62.0), 24.83 к.д.т.(д) (C1,6, 1JHC 128.4, 2JPCC 4.1, 3JHCCC 4.3), 27.03 уш. с. (с) (C5), 36.74 д. м. (д) (C2, lJPC 63.5), 41.49 д.м. (с) (C3, 1JHC 129.3, 2JPCC 3.0), 122.10 д.д.д.д. (c) (C12, 1JHC 166.8, 2JHCC 5.0, 3JHCNC 4.3, 4JHCCCC 1.2), 140.86 т. (с) (С10, 2JHCC 6.6, 2JHCC 6.4), 150.45 д.д.д. (с) (C11, lJHC 179.3, 3JHCNC 10.5, 2JHCC 2.4), 157.43 м. (с) (C4), 163.34 м. (с) (С9).

Пример 2. Изоникотиноилгидразон (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфиноксида (16). В условиях примера 1 из 1.7 г (0.0073 моль) (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфиноксида и 1 г (0.0073 моль) гидразида изоникотиновой кислоты получают 1.9 г (74%), соединения 16 в виде белого порошка с т.пл. 122-124°C. Найдено, %: С 61.57; Н 8.54; N 12.01. C10H21N3O2P. Вычислено, %: C 61.52; H 8.60; N 11.96.

Масс-спектр, m/z: 301 [М+Н]+•, 300 [М]+•, 285 [М-СН3], 257 [М-C2H3O], 244 [М-С3Н4О], 243 [М-C3H5O], 219 [М-С6Н9], 202 [М-С6Н10О], 201 [М-С6Н11О], 155 [С12Н11], 154 [С12Н10], 125 [С6Н7ОР], 124 [C6H6OP], 99.0 [C6H11O], 81 [С6Н9], 77, 57, 55, 43, 29.

ИК спектр, FT-IR spectrometer "Vector-22" (Bruker), вазелин, см-1: 670, 722, 756, 782, 846, 1078, 1128, 1166, 1216, 1247, 1271, 1297, 1377, 1462, 1527, 1552, 1598, 1632, 1680, 2726, 2852, 2925, 2955, 3036, 3234, 3417.

ЯМР спектры, Bruker «Avans 400»: Спектр ЯМР 31P-{1H}: δр 60.11 м.д., 56.01 м.д. Спектр ЯМР 1Н (8 м.д., J Гц):, 1.06 м (Н11,12, 10H, 3JHCCH 7.5), 1.31 д (H1,6, 6H, 3JPCCH 14.1), 1.35 д (Н1,6, 6H, 3JPCCH 14.1), 1.65 и 1.75 два м (Н10, 4H, AB-часть спектра АВМХ2), 2.20 с (Н5, 3H), 2.29 с (Н5, 3H), 2.59 д (Н3, 2H, 3JPCCH 14.5), 2.71 д (Н3, 2H, 3JPCCH 7.9), 7.64 д.д (H8, 2H, 3JHCCH 4.4, 4JHCCCH 1.7), 8.07 д.д (H8, 2H, 3JHCCH 4.5, 4JHCCCH 1.7) 8.76 д.д (H9, 2H, 3JHCCH 4.5, 4JHCCCH 1.7), 8.77 д.д (Н9, 2H, 3JHCCH 4.5, 4JHCCCH 1.7).

Пример 3. Никотиноилгидразон (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида (1в). В условиях примера 1 из 5.0 г (0.0245 моль) (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида и 4 г (0.0245 моль) гидразида никотиновой кислоты получают 7.5 г (94%) соединения 1в в виде белого порошка, т.пл. 144-146°C.

Найдено, %: C 59.82(59.71); H 8.27(8.47); N 12.45(12.27). C16H26N3O2P. Вычислено, %: С 59.43; Н 8.10; N 12.99.

ИК, FT-IR spectrometer "Vector-22" (Bruker), вазелин, см-1: 540, 616, 644, 707, 739, 756, 789, 839, 919, 940, 980, 1028, 1058, 1134, 1166, 1199, 1262, 1281, 1322, 1378, 1463, 1525, 1586, 1624, 1668, 2725, 2854, 2923, 3195, 3439.

ЯМР спектры, Bruker «Avans 400»: Спектр ЯМР 31Р-{1Н}: δp 62.85 м.д. Спектр ЯМР 1Н (5 м.д., J Гц): 1.20 д. т (Н8, 6H, 3JPCCH 15.5, 2JHCCCH 7.8), 1.35 д (Н1,6, 6H, JPCCH 13.8), 1.76 м (Н7, 4H, 2JPCH 14.6, 3JHCCH 7.8), 2.28 с (Н5, 3H), 2.61 д (Н3, 2H, 3JPCCH 14.5), 7.41 д. д (Н15, 1H, 3JHCCH 8.0, 4JHCCCH 1-6), 8.51 д (Н13, 1H, 3JHCCH 7.6), 8.72 д (Н14, 1H, 3JHCCH 4.9), 9.40 уш. с (Н11, 1H, 4JHCCCH 1.2). Спектр ЯМР 13С (150.9 МГц, CDCl3, 5 м.д., J Гц, 32°C): 6.63 к.д.т. (д) (С8, 1JHC 129.1, 2JPCC 5.37, 2JHCC 5.14,), 17.69 д.т.м. (д) (С7, lJHC 126.2, 1JPC 61.7), 24.86 к.д.м. (д) (С1,6, 1JHC 128.0, 2JPCC 4.4), 27.07 к.т. (с) (С5, 1JHC 127.6, 3JHCCC 4.0), 41.43 т.м. (с) (С3, 1JHC 126.5), 73.39 д.м. (д) (С2, 1JPC 63.1), 123.37 д.д. (с) (С14, 1JHC 164.7, 2JHCC 8.1), 129.62 д.д. (с) (С10, 2JHCC 6.24, 2JHCC 6.97), 136.04 д.д.д. (с) (C15, 1JHC 164.7, 2JHCC 5.9, 3JHCCC 5.87), 149.88 д.д.д. (с) (С11, 1JHC 182.7, 3JHCCC 11.0, 3JHCNC 5.5), 152.02 д. м. (с) (С13, 1JHC 179.0), 163.56 м. (с) (С9).

Заявляемые по данному изобретению соединения Ia-в четко отличаются от описанных аналогов изониазида IIа-г наличием в своей структуре (диалкил)фосфорил-2-метилпент-4-илиденового фрагмента. Гидразоны на основе гидразидов пиридиновых кислот, содержащие в илиденовом фрагменте фосфиноксидные группировки не описаны.

Изучение бактериостатической активности полученных пириди-ноилгидразонов диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Ia-в в отношении микобактерий туберкулеза штамма H37Rv проводили в Казанском тубдиспансере министерства здравоохранения Республики Татарстан, используя стандартную радиометрическую ростовую систему ВАСТЕС MGIT 960 (Becton Dickinson).

Содержимое пробирки MGIT - это питательный бульон, благодаря которому достигается ускоренный рост микобактерий. Пробирка содержит 7 мл стерильного питательного бульона Мидлбрук 7Н9, в который перед использованием вносится обогатительная добавка ВАСТЕС MGIT OADC (олеиновая кислота, альбумин, декстроза и каталаза). Для предотвращения контаминации необходимо добавить MGIT PANTA.

Кроме жидкой среды, в пробирке содержится бескислородный флюорохром - пентагидрат трио4,7-дифенил-1,10-фенантролин хлорид рутения, помещенный на дно пробирки и покрытый силиконом. Во время бактериального роста внутри пробирки происходит поглощение свободного кислорода и его замещение углекислым газом. По мере расходования свободного кислорода прекращается ингибирование флюорохрома. Флюоресценция становится видимой при облучении пробирки УФ светом и автоматически регистрируется фотодатчиками, встроенными в прибор. Интенсивность свечения прямо пропорциональна уровню расходования кислорода и регистрируется в единицах роста (GU). Система ВАСТЕС MGIT 960 расценивает пробирку как положительную, если количество живых микроорганизмов в ней достигло 100000 на 1 мл среды (GU>75). Пробирка инкубируется при температуре 37 градусов с последующим анализом.

Для определения бактериостатического действия соединений Iа-в готовили исходные растворы в воде и добавляли в пробирки MGIT в количествах, обеспечивающих получение конечной концентрации 0.1 мкг/мл среды.

Суспензию микобактерий туберкулеза штамма H37Rv в количестве 1 мкг добавляли в каждую из исследуемых пробирок. В качестве контроля использовали индивидуальные пробирки со средой радиометрической системы ВАСТЕС MGIT 960 с культурой микроорганизмов без содержания химических соединений, а также с физиологическим раствором. Для сравнения проводили аналогичные исследования с туберкулостатиком первого ряда - изониазидом. МИК использованного образца изониазида составил 0.5 мкг/мл. Все пробирки инкубировали при 37 C° в приборе. Наличие или отсутствия роста микобактерий прибор регистрировал ежедневно в течение 41 суток. Результаты анализа бактериостатического действия заявляемых соединений на приборе ВАСТЕС MGIT 960 приведены в таблице 1. Для сравнения в тех же условиях определяли так же и активность гидразида никотиновой кислоты.

По результатам исследования заявляемых соединений Ia-в на ВАСТЕС MGIT 960 (таблица 1) минимальная ингибирующая концентрация (МИК) в отношении микобактерий водного раствора изоникотиноилгидра-зона (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфин-оксида Iб и никотиноил-гидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида Iв составила 5 мкг/мл. Изоникотиноилгидразон (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида 1а обладает более высокой активностью - его МИК равна 1 мкг/мл.

Изучение общетоксического действия пиридиноилгидразонов диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Iа-в.

Острую токсичность заявляемых соединений Ia-в определяли на белых беспородных мышах обоего пола при внутрибрюшинном способе введения [Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ». М., Медицина. 2005. Под ред. Р.У. Хабриева]. Результаты исследований обрабатывали по методу Беренса [Л.М. Беленький. «Элементы количественной оценки фармакологического эффекта». Л. 1963]. Мышам шести групп (по 6 животных в каждой) вводили водные растворы препаратов, приготовленные стерильно непосредственно перед введением. Пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Ia-в представляют собой кристаллы, хорошо растворимые в воде. Разные дозы соединений Ia-в вводили с равными интервалами (+250 мг) между ними. После введения соответствующих доз вели наблюдение за поведением животных, регистрировали число погибших. Обработка полученных данных графическим методом показала, что LD50 изоникотиноилгидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида 1а равна 3073±87 мг/кг, LD50 изоникотиноилгидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфин-оксида Iб - 1703±82 мг/кг и LD50 никотиноилгидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида Iв 2164±43 мг/кг (табл.2).

По характеру токсичности соединения Ia-в не отличаются друг от друга. При наблюдении над животными было установлено, что через 4-6 минут после инъекции исследуемых пиридиноилгидразонов диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Ia-в в токсико-летальных дозах у животных наблюдалось резкое снижение двигательной активности и затрудненное дыхание. Через 8-12 минут развиваются судорожные подергивания тела, наблюдается повышенный тонус хвоста. Перехода в боковое положение нет. Животные погибают на фоне асфиксии.

Сравнительное изучение проявления токсичности изониазида проведено на 6 мышах при внутрибрюшинном способе введения в дозе его LD50=178 мг/кг. Установлено, что в указанной концентрации изониазид оказывает местно-раздражающее действие, вызывая симптомы «корчи» (втягивание живота, периодические изгибания тела, а через 55-65 мин после инъекции препарата у мышей развиваются бурные клонико-тонические судороги (нейротоксическое действие). Нейротоксическое действие изониазида связывают с нарушением синтеза в структурах центральной нервной системы тормозного медиатора гамма-аминомасляной кислоты [С.П. Булавин. Фармакологическая характеристика тубазида. // Бюлл. ВИЭВ. М., 1982. Вып.48, с.61-62].

По характеру, токсичности заявляемые пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Ia-в в отличие от изониазида не вызывает симптомов нейротоксического действия при остром отравлении экспериментальных животных.

Таким образом, новые производные гидразидов пиридинкарбоновых кислот - заявляемые пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)фосфиноксидов Iа и Iб-в 10-20 раз менее токсичны по сравнению с изониазидом, к тому же они очень хорошо растворимы в воде и не проявляет нейротоксического действия. Никотиноилгидразон (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида Iв в 14 раз менее токсичен, чем изониазид, хотя немного уступает ему по противотуберкулезной активности. Никотиноилгидразон Iв превосходит по противотуберкулезной активности гидразид никотиновой кислоты, МИК которого в сопоставительном эксперименте составила 10 мкг/мл.

Кроме того заявляемые соединения не уступают по противотуберкулезной активности другому антитуберкулезному препарату первого ряда -пиразинамиду (МИК=12 мкг/мл).

Для выявления наиболее перспективного соединения среди заявляемых пиридиноилгидразонов Ia-в сравнивали соотношение их токсичности и активности, т.е. LD50/MHK (табл.2). У используемого в качестве контроля изониазида это соотношение составляет 356. Для изоникотиноилгидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)дипропилфосфиноксида (I,б) и никотиноил-гидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида (Iв) это соотношение соответственно 340 и 430, т.е. очень близко к показателю изониазида. У соединения-лидера изоникотиноилгидразона (2-метил-4-оксопент-2-ил)диэтилфосфиноксида (Iа) соотношение LD50/MHK более 3000.

Получены новые низко токсичные производные изониазида и его изомера - гидразида никотиновой кислоты, обладающие противотуберкулезным действием, расширяющие арсенал известных средств указанного назначения.

Таблица 1
1. Результаты исследования бактериостатической активности соединений Ia-в в отношении микобактерий туберкулеза штамма H37Rv
Соединение Концентрация мкг/мл Сутки
1 2 3 4 7 8 9 10 11 41
Изониазид 0.1 0 0 2 10 15 25 29 30+
0.5 0 0 0 5 10 15 15 15 15 15
1 0 0 0 0 5 5 5 5 5 5
Гидразид никотинов ой кислоты 0.1 3 10 15 22 28 30+
0.5 5 10 15 22 25 30+
1 5 10 15 20 25 30+
5 5 10 12 20 25 28 31+
10 5 5 10 18 18 18 18 18 18 18
20 0 5 10 11 11 11 11 11 11 11
0.1 0 0 0 10 15 28 31+
0.5 0 0 0 5 14 28 28 30 30+
1 0 0 0 5 10 18 20 25 25 25
5 0 0 0 5 10 15 21 21 21 21
10 0 0 0 5 8 12 15 15 15 15
20 0 0 0 0 4 15 15 15 15 15
0.1 0 0 0 5 12 18 27 31+
0.5 0 0 0 5 10 18 25 25 28 31+
1 0 0 0 8 15 24 25 28 30 30+
5 0 0 0 5 10 18 20 25 29 29
10 0 0 0 5 8 15 18 20 20 20
20 0 0 0 5 5 10 18 18 18 18
0.1 0 0 5 15 21 29+
0.5 0 0 5 10 22 25 29 30 31+
1 0 0 5 8 15 20 25 28 29 30+
5 0 0 5 5 10 11 15 15 15 15
10 0 0 0 0 10 11 11 11 11 11
20 0 0 0 0 5 10 10 10 10 10
Таблица 2
Оценка острой токсичности и соотношение LD50/МИК изониазида и соединений Iа-в.
Соединение LD50 LD50/МИК
изониазид 178 мг/кг 356
Гидразид никотиновой кислоты 300-350 мг/кг 30-35
3073.7±86.8 мг/кг >3000
1702.7±81.8 мг/кг -340
2164.2±43.0 мг/кг -430

1. Пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)-фосфиноксидов (Iа-в):

Ia Py=4-Py,R=Et;
Iб Py=4-Py, R=Рr;
Iв Py=3-Py, R=Et.

2. Пиридиноилгидразоны диалкил(2-метил-4-оксопент-2-ил)-фосфиноксидов (Ia-в) по п.1, обладающие противотуберкулезной активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области химической технологии производства радиоизотопов медицинского назначения, а конкретно к составу жидкостной экстракционной системы, на основе фосфорилсодержащих подандов, в 1,1,7-тригидрододекафторгептаноле, которая может быть использована для селективного извлечения молибдена из мультикомпонентных азотнокислых растворов.

Изобретение относится к новым гетероциклическим радикалам формул I и II, обладающим бактерицидными и фунгицидными свойствами, которые могут найти применение в ветеринарии и медицине, а также в качестве меток при исследовании путей метаболизма лекарственных препаратов в живых организмах.

Изобретение относится к новым нейропротекторам, представляющим собой бис-диалкиламиды фосфорилзамещенных 1,4-дикарбоновых кислот формулы [I] и способу их получения из соответствующих кислот формулы [II].

Изобретение относится к органическим электролюминесцентным устройствам на основе соединений формулы (1) где Y, Z выбраны из N, P, P=O, C=O, O, S, S=O и SO2; Ar1, Ar2, Ar 3 выбраны из бензола, нафталина, антрацена, фенантрена, пиридина, пирена или тиофена, необязательно замещенных R 1; Ar4, Ar5, Ar6, Ar 7 выбраны из бензола, нафталина, антрацена, фенантрена, пиридина, пирена, тиофена, трифениламина, дифенил-1-нафтиламина, дифенил-2-нафтиламина, фенилди(1-нафтил)амина, фенилди(2-нафтил)амина или спиробифлуорена, необязательно замещенных R1; Е - одинарная связь, N(R1), О, S или C(R1 )2; R1 представляет собой Н, F, CN, алкил, где СН2 группы могут быть заменены на -R2 C=CR2-, -C C-, -О- или -S-, и Н может быть заменен на F, необязательно замещенные арил или гетероарил, где R1 могут образовывать кольцо друг с другом; R2 - Н, алифатический или ароматический углеводород; X1, X4, X2, X 3 - выбраны из C(R1)2, C=O, C=NR 1, О, S, S=O, SO2, N(R1), P(R 1), P(=O)R1, C(R1)2-C(R 1)2, C(R1)2-C(R1 )2-C(R1)2, C(R1) 2-O и C(R1)2-O-C(R1) 2; n, о, p, q, r и t равны 0 или 1; s=1.

Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений, а именно к способу получения фосфиноксидов общей формулы (I): Известно, что фосфиноксиды обладают высокими экстракционными (комплексообразующими) свойствами по отношению к ионам редких, редкоземельных и цветных металлов и часто являются исходными соединениями для получения фосфинов, которые в свою очередь применяются как лиганды в металлокомплексном катализе ([1] Phosphine Oxides, Sulphides, Selenides and Tellurides, Vol.2, The Chemistry of Organophosphorus Compounds.

Изобретение относится к фосфиноксидам, которые можно применять в качестве хелатирующих агентов для экстракции лантанидов из кислых водных растворов, и может применяться для экологического мониторинга сточных вод в районах переработки и захоронения радиоактивных отходов.
Изобретение относится к противотуберкулезным лекарственным средствам для перорального применения. Данное средство выполнено в форме гранулы с кишечнорастворимым покрытием и содержит: пара-аминосалицилат натрия - 500 до 900 мг; изониазид от 19 до 26 мг; масло растительное гидрогенизированное - 1,1-1,5 мг; кросповидон - 22-31 мг; дисульфит натрия - 4-12 мг; метилцеллюлоза - 11-19 мг, при этом плотность гранулы варьирует от 0,9 до 1,05 г/мл, толщина кишечно-растворимого покрытия составляет 0,2-0,3 мм, размер частиц изониазида в 2-3 раза превышает размер частиц пара-аминосалицилата, размер частиц кросповидона в 2-3 раза превышает размер частиц пара-аминосалицилата натрия и дисульфита натрия.

Изобретение относится к области ветеринарии и клеточных технологий. Предложен способ лечения экспериментального туберкулеза легких у мышей с использованием трансплантации стволовых клеток путем введения в хвостовую вену мышей один раз в неделю суспензии стволовых клеток, выделенных из костей мышей гибридов, резистентных к туберкулезу, с генотипом "k" в области H-2E.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтическим композициям и фармацевтическим наборам для лечения бактериальных инфекций и нового способа лечения заболеваний, связанных с бактериальными инфекциями, в том числе туберкулеза.

Изобретение относится к медицине и фармацевтической технологии и касается комбинированного противотуберкулезного средства, содержащего гидразид изоникотиновой кислоты (изониазид) и 2-бензилбензимидазол (дибазол), и в качестве полимерного носителя - интерполимерный комплекс поли(мет)акриловой кислоты и полиэтиленгликоля, а также способа его получения.

Изобретение относится к ветеринарии. .
Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и касается лечения туберкулезного экссудативною плеврита. .
Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и касается лечения больных туберкулезом легких. .

Изобретение относится к биологически активным веществам, в частности к производным замещенных хинолинов, обладающих цитостатической и цитотоксической активностью в отношении микобактерий, а именно к замещенным производным 1-(2-хлорхинолин-3-ил)-4-диметиламино-2-(нафталин-1-ил)-1-фенилбутан-2-олов общей формулы (I), к способу их получения, а также к применению их в качестве антимикобактериальных агентов, в частности субстанций лекарственных препаратов (средств) с целью лечения туберкулеза и других инфекционных заболеваний микобактериальной природы.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики и касается ингибиторов роста Mycobacterium tuberculosis, представляющих собой (+) и (-)-энантиомеры производных усниновой кислоты, содержащих тиазольный цикл.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в ветеринарии при лечении паразитарных болезней кожи животных, вызванных чесоточными клещами. Средство для лечения от чесоточных клещей в ветеринарии включает четвертичную соль фосфония, замещенный динитробензофураксан, ксимедонгидрохлорид и диметилсульфоксид при их весовом соотношении 0.1:1:10:100.

Настоящее изобретение относится к пиридиноилгидразонам диалкилфосфиноксидов для лечения туберкулеза, которые могут применяться в медицине и ветеринарии:Ia Py4-Py,REt;Iб Py4-Py, RРr;Iв Py3-Py, REt.Предложены новые эффективные противотуберкулезные препараты с низкой токсичностью, не проявляющие нейротоксического действия. 1 з.п. ф-лы, 3 пр., 2 табл.

Наверх