Способ прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом

Авторы патента:

ПЛОТНИКОВА СВЕТЛАНА ВЛАДИМИРОВНА (RU)

G01N33/533 - с флуоресцентными метками

Владельцы патента RU 2521372:

ПЛОТНИКОВА СВЕТЛАНА ВЛАДИМИРОВНА (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом. Для этого проводят определение содержания CD16+ нейтрофилов в костном мозге больного. При содержании CD16+ нейтрофилов в костном мозге менее 50% прогнозируют развитие инфекционного синдрома с клиническими проявлениями. Использования данного способа позволяет прогнозировать развитие инфекционного синдрома при манифестации острого лейкоза до проведения химиотерапии. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и иммунологии, может быть использовано для прогнозирования в ранние сроки развития инфекционных осложнений у больных острым лейкозом.

Острые лейкозы (ОЛ) представляют собой гетерогенную группу опухолевых заболеваний системы крови - гемобластозов, которые характеризуются первичным поражением костного мозга морфологически незрелыми кроветворными (бластными) клетками с вытеснением нормальных элементов гемопоэза и инфильтрацией ими различных тканей и органов [Клиническая онкогематология. / Под редакцией Волковой М.А. М., Медицина, 2007. - 1120 с].

Клиническая манифестация острых лейкозов разнообразна и неспецифична, но она обычно четко ассоциируется с лейкемической инфильтрацией костного мозга. При остром лейкозе вследствие нарушения гранулоцитопоэза и лимфопоэза (вытеснение опухолевым клоном нормального миелопоэза) отмечается резкое снижение как клеточного, так и гуморального иммунитета, что делает больных беззащитными перед инфекциями. Синдром инфекционных осложнений (ИО) нередко является самым первым проявлением острого лейкоза. При этом необходимо обратить внимание на рефрактерное течение инфекций, несмотря на адекватную антибактериальную терапию. Инфекции у больных ОЛ характеризуются рядом особенностей, которые включают скудность клинических проявлений, стремительность в развитии, полиэтиологичность. Инфекционные процессы, наблюдаемые у 80-85% больных ОЛ, являются грозным, труднокупируемым осложнением. Наиболее многочисленная группа инфекционных осложнений бактериального происхождения 70-80%, включающая пневмонии, сепсис, гнойные процессы. Тяжелые инфекционные осложнения вирусного и грибкового генеза наблюдаются реже у 4-18 и 18-30% больных. В последнее время уменьшилась роль стафилококковой инфекции, и возросло значение грамотрицательной флоры [http://rukavitsin.ru/gematologiya/articles/ostrye-lejkozy-soavtor-s-v-shamanskij-/tp3].

К основным факторам, обеспечивающим элиминационные механизмы противоинфекционной иммунной защиты, в том числе противобактериальной направленности, относятся фагоциты (макрофаги и нейтрофилы) и антитела. Антителозависимая цитотоксичность фагоцитов осуществляется посредством рецепторов на клетках - CD16. CD16 - низкоаффинный рецептор для иммуноглобулина (Ig) G (FcγIII-рецептор) связывает агрегированные Ig (Fc rill), способствует активации процессов фагоцитоза, выявляется практически на всех нейтрофилах, сбрасывается рецептор при апоптозе клетки [S.K. Butcher, Н. Chahal, L. Nayak et al. Senescence in innate immune responses: reduced neutrophil phagocytic capacity and CD 16 expression in elderly humans / Journal of Leukocyte Biology - 2001. - vol.70. №6. - P.881-886].

Известно, что фактором риска развития тяжелых инфекционных осложнений у детей с ОЛЛ являются наличие в анамнезе перенесенных бактериальных инфекций, аллергических реакций, а также повышение уровня СРБ при манифестации заболевания [Кадричева Т.Г. Инфекционные осложнения острого лимфобластного лейкоза у детей: клиническая картина и функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов крови: Дис.… канд. мед. наук. - Красноярск, 2011. - 132 с].

Известен способ определения снижения устойчивости организма больных лейкозами к инфекции по соотношению основных морфологических типов лимфоцитов: рассчитывается индекс супрессии как отношение Т-тотальных лимфоцитов к сумме Т-супрессоров и Fc+-клеток и при величине этого индекса ниже 48% судят о снижении устойчивости организма больных лейкозами к инфекции [Гусева С.А. "Способ определения снижения устойчивости организма больных лейкозами к инфекции", патент RU 2063041, 27.06.1996].

Наиболее близким техническим решением является способ прогнозирования ИО после химиотерапии у больных острым лейкозом на основе исследования активности ферментов лимфоцитов периферической крови с помощью биолюминесцентного метода. Определяют активность двух дегидрогеназ - глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ) и НАДФ-зависимой декарбоксилирующей малатдегидрогеназы (НАДФМДГ). О возможности возникновения инфекционных осложнений у больных судят по сочетанию величин активности этих дегидрогеназ в лимфоцитах крови. При сочетании активности Г6ФДГ в пределах от 10,02 до 32,74 мкЕ и НАДФМДГ в пределах от 8,29 до 15,37 мкЕ прогнозируют развитие инфекционных осложнений у больных острыми лейкозами после химиотерапии, а при сочетании активности Г6ФДГ в пределах от 0,01 до 4,45 мкЕ и НАДФМДГ в пределах от 0,01 до 3,21 мкЕ прогнозируют отсутствие осложнений [Савченко А.А., Смирнова О.В., Манчук В.Т., Москов В.И. «Способ прогнозирования инфекционных осложнений после химиотерапии у больных острым лейкозом», патент RU 2315305, 20.01.2008]. Однако данный способ распространяется на больных, получивших специфическое лечение, и не позволяет прогнозировать развитие ИО до проведения химиотерапии.

Технический результат - раннее прогнозирование развития инфекционного синдрома при манифестации острого лейкоза.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом, включающем исследование биологического материала, согласно изобретению в качестве биологического материала используют костный мозг, проводят определение содержания CD16+ нейтрофилов и при его значении менее 50% прогнозируют развитие инфекционного синдрома с клиническими проявлениями.

Предлагаемый способ прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом осуществляется следующим образом. Производят забор костного мозга методом стернальной пункции. На нейтрофилах костного мозга определяют наличие CD16 (FcγIII) и CD45 (панлейкоцитарный антиген) методом проточной цитофлюориметрии с использованием моноклональных антител против CD16 и CD45 и учетом размеров клеток. При содержании CD16+ нейтрофилов в костном мозге больных менее 50% прогнозируют развитие инфекционного синдрома с клиническими проявлениями.

Применение предлагаемого способа обеспечивает раннее (до проведения химиотерапии) выявление больных, требующих дополнительных лечебных и диагностических мероприятий, с целью предупреждения развития инфекционного синдрома.

Под наблюдением находились больные с острым лейкозом, атака I (n=50), получавшие стационарное лечение в гематологическом отделении РКБ им. Г.Г. Куватова (г.Уфа), в том числе 25 больных с инфекционным синдромом. В качестве группы контроля выступали пациенты (n=10) с различными инфекционными проявлениями с подозрением на ОЛ без подтвержденного диагноза, проживающие на территории Республики Башкортостан. Фенотипирование нейтрофилов проводили с помощью моноклональных антител против CD 16 и CD45 (производство Beckman Coulter, США) с использованием проточного цитофлюориметра Cytomics FC 500 (производство Beckman Coulter, США).

Достоверность отличий оценивали при попарном сравнении частот выявляемых критериев в группах больных и контроле, используя критерий Пирсона - χ2 для таблиц сопряженности 2×2 с поправкой Йетса на непрерывность. Значения статистических критериев определялись по программе в составе пакета «Statistic for Windows 5.0» (StatSoft).

Оценка содержания CD16+ нейтрофилов в костном мозге показала, что среди больных с наличием инфекционного синдрома, но без подтверждения диагноза острый лейкоз, количество CD16+ составило 74,21±5,43%, в группе больных с острым лейкозом, но без ИО - 52,06±6,91%, тогда как при наличии ИО показатель составлял только 35,35±7,08%. Расчет низких значений содержания CD16+ нейтрофилов в костном мозге проводился согласно формуле М±33% [Лившиц В.М. Медицинские лабораторные анализы: Справочник. / В.М. Лившиц, В.И. Сидельникова. - М.: Триада-Х, 2000. - С.137]. За М брали среднеарифметические данные больных с наличием инфекционного синдрома, но без подтверждения диагноза острый лейкоз 74,21-24,48=50%). Было установлено, что у больных с манифестацией острого лейкоза без проявлений инфекционного синдрома количество CD16+ клеток менее 50% выявлялось в 28% случаев наблюдения, у пациентов с температурной реакцией, но без клинических проявлений - в 41,7% (χ2=0,21). В группе больных с клиническими проявлениями ИО (ангина, паратонзиллярный абсцесс, пневмонии и т.д.) снижение количества CD16+ нейтрофилов менее 50% отмечалось практически у всех - 92,3% (χ2=11,69, при р=0,0014, RR=3,29 (1,65-4,11)).

Таким образом, выявление низкого содержания CD16+ нейтрофилов (менее 50%) у больных острым лейкозом является неблагоприятным маркером развития воспалительного процесса и повышает риск развития инфекционного синдрома более чем в 3,3 раза. Тактика ведения и лечения таких больных требует дополнительных лечебных и реабилитационных мероприятий.

Информативность способа доказывается тем, что среди пациентов с клиническими проявлениями инфекционного синдрома и наличием температурной реакции выявляемость признаков (снижение количества CD16+ нейтрофилов менее 50%) составила 92,3% против 28% в группе без признаков инфекционного процесса.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Больной А., 58 лет, поступил в стационар с жалобами на повышение температуры тела до 39°C, боли в горле, высыпания на деснах. Клинический диагноз: Острый лейкоз, миелобластный (M1) вариант, атака I.

При исследовании крови по предлагаемой методике - содержание CD16+ нейтрофилов составило 0% (менее 50%). Прогноз в отношении течения заболевания неблагоприятный.

Больному проведено лечение по схеме «5+2». Исход лечения - летальный исход на 16 день после постановки диагноза.

Пример 2.

Больной Ф., 50 лет, поступил в стационар с жалобами на умеренную слабость, при обследовании выявлены изменения в анализах крови. Анамнез - без особенностей. Клинический диагноз: Острый лейкоз, миелобластный (МО) вариант, атака I.

При исследовании крови по предлагаемой методике - содержание CD16+ нейтрофилов составило 88,7% (более 50%).

Прогноз исхода заболевания - благоприятный.

Больному проведена индукция ремиссии по схеме «7+3». Исход лечения - улучшение состояния, достигнута клинико-гематологическая и спинномозговая ремиссия.

Таким образом, способ оценки реагирования иммунной системы у больных острым лейкозом способом изучения содержания CD16+ нейтрофилов в костном мозге с целью прогнозирования развития инфекционного синдрома является актуальным, достоверным, информативным диагностическим методом, показанным на ранних сроках лечения всем больным острым лейкозом. Использование изобретения помогает своевременно оценить вероятность неблагоприятного исхода инфекционного процесса, предпринять своевременные лечебные и реабилитационные мероприятия.

Способ прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в качестве биологического материала используют костный мозг, проводят определение содержания CD16+ нейтрофилов и при его значении менее 50% прогнозируют развитие инфекционного синдрома с клиническими проявлениями.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа через 3 ч после перорального введения препарата «Аласенс» в дозе 15 мг/кг массы тела получают трехканальное RGB флуоресцентное изображение зоны интереса.

Способ количественного определения клеток-предшественников (cd34+) в кроветворной ткани // 2513511

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для количественного определения клеток-предшественников в кроветворной ткани.

Способ количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма "москва 3253" // 2511440

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253». Способ предусматривает обеззараживание и выделение РНК из вируссодержащего материала, постановку реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме «реального времени» с использованием специфичных праймеров RV5-5'-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3', RV6-5'-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3' и зонда RV7-5'-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2.

Способ определения протеолитической модификации клеточных рецепторов на модели выделенных лимфоцитов периферической крови // 2510026

Изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано для определения протеолитической модификации клеточных рецепторов на модели выделенных лимфоцитов периферической крови.

Способ прогнозирования туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью // 2504787

Изобретение относится к области медицины, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью у впервые выявленных больных туберкулезом легких (ТБ).

Способ прогнозирования раннего рецидива у больных гемобластозами после аутологичной трансплантации стволовых кроветворных клеток // 2498312

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано у больных гемобластозами для прогноза развития рецидива заболевания после проведения аутологичной трансплантации стволовых кроветворных клеток (АТСКК).

Способ прогнозирования эффективности интерферонотерапии хронических гепатитов с у детей // 2486526

Изобретение относится к медицине, а именно к детской гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогноза эффективности интерферонотерапии гепатита С. .

Способ оценки эффективности антибактериальной терапии chlamydophila pneumoniae и mycoplasma pneumoniae у детей раннего возраста, больных острыми респираторными заболеваниями с бронхообструктивным синдромом // 2486525

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, иммунологии, и может быть использовано для оценки эффективности антибактериальной терапии С. .

Способ определения летального фактора сибирской язвы на основе иммунодетекции, сопряженной с полимеразной цепной реакцией // 2486524

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно - к областям диагностической медицинской микробиологии, медицинской биохимии, прикладной иммунохимии и разработки диагностических тест-систем, касается разработки нового способа для высокочувствительного определения белка летального фактора сибирской язвы (LF) в инфицированных образцах биологического происхождения и окружающей среде.

Способ диагностики гнойно-септических заболеваний у новорожденных детей // 2484479

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики гнойно-септических заболеваний у новорожденных детей. .

Способ прогнозирования эффективности противовирусной терапии у взрослых больных хроническим гепатитом с с генотипом 1b // 2522500

Изобретение относится к области медицины, а именно к гепатологии, и может использоваться для прогнозирования эффективности противовирусной терапии у взрослых больных хроническим гепатитом C с генотипом 1b. Для этого определяют относительные количества содержания субпопуляций лимфоцитов крови и рассчитывают прогностический показатель, при этом подсчет процента субпопуляций лимфоцитов осуществляют методом проточной цитофлуориметрии. При значении показателя ПП<350 прогнозируют достижение быстрого вирусологического ответа на противовирусную терапию ХГС, при значении показателя ПП>350 прогнозируют отсутствие быстрого вирусологического ответа на противовирусную терапию хронического гепатита C с генотипом вируса 1b. Использование данного способа позволяет получить точный прогноз быстрого вирусологического ответа у больных хроническим гепатитом C с генотипом вируса 1b на противовирусную терапию 2 пр., 1 ил.

Комплексный способ определения циркулирующих опухолевых клеток в крови больных раком молочной железы // 2522923

Изобретение относится к диагностическим методам в медицине и может быть использовано в онкологии при адъювантной терапии опухолей, а также при длительном наблюдении за пациентами после оперативного удаления опухолей. Способ описывает определение циркулирующих раковых клеток, чувствительных к адъювантной гормональной терапии, в крови больных раком молочной железы, включает выделение и обогащение циркулирующих опухолевых клеток с использованием антител с магнитными метками, получение лизатов циркулирующих опухолевых клеток, извлечение мРНК из лизатов циркулирующих опухолевых клеток, получение кДНК, получение амплифицированной ДНК, определение экспрессии маркерных генов, при этом в случае наличия одного из маркеров GA733-2, MUC-1, HER2 делается заключение о наличии циркулирующих опухолевых клеток, и при обнаружении маркеров ESR1, PGR делается заключение о наличии циркулирующих опухолевых клеток, чувствительных к гормональной терапии. Способ позволяет значительно увеличить вероятность обнаружения циркулирующих опухолевых клеток, чувствительных к адъювантной гормональной терапии, повысить точность измерений и увеличить число анализируемых характеристик циркулирующих опухолевых клеток, повысить чувствительность методов анализа и эффективность диагностики при работе с больными раком молочной железы для оценки прогноза и эффективности терапии, улучшить эффективность лечения и выживаемость онкологических больных. 5 ил., 1 пр.

Технология получения костного мозга от доноров-трупов с бьющимся и не бьющимся сердцем // 2523563

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для получения костного мозга (КМ) от доноров-трупов. Для этого пунктируют крылья подвздошных костей в передней и задней трети крыльев, устанавливая в каждое по два троакара. Сбор КМ выполняют методом простой аспирации, аспирации-промыванием или их комбинированием при разряжении 0,6 Атм при помощи устройства. Устройство для заготовки КМ включает одноразовую многоканальную закрытую систему, модуль аспирации-накопления и модуль перфузии. Группа изобретений также относится к способу оценки заготовленного костного мозга. Использование данного способа получения костного мозга (КМ) обеспечивает заготовку стерильного богатого жизнеспособными мультипотентными мезенхимальными стромальными и гемопоэтическими прогенеторными клетками КМ, при этом результат достигается за счет автоматизации миелоаспирации, путем заготовки биоматериала специальным разработанным устройством для сбора КМ. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 пр., 1 ил., 1табл.

Способ прогнозирования течения бактериальных гнойных менингитов у детей // 2526177

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исходов бактериальных гнойных менингитов (БГМ) различной этиологии у детей. Для этого определяют в цереброспинальной жидкости иммуноцитохимическим методом наличие CD31 и S100 позитивных клеток в 1-2 день заболевания. При содержании CD31 более 0,5% и наличии S100 позитивных клеток прогнозируют неблагоприятное течение БГМ. При содержании CD31 менее 0,5% и отсутствии S100 позитивных клеток прогнозируют благоприятное течение заболевания. Применение предложенного способа ликворо-цитологического прогноза течения БГМ у детей позволяет прогнозировать на ранних сроках болезни благоприятное и неблагоприятное течение заболевания, проводить мониторинг состояния сосудов микроциркуляторного русла головного мозга в ходе заболевания и корректировать терапию. 1 табл., 2 ил., 3 пр.

Способ прогнозирования задержки внутриутробного роста плода // 2526178

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3+CD16+56+-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R). Вычисляют прогностический индекс (PI) по формуле: PI=-0,8911X1-0,0321Х2-2,3669Х3+11,0779, где X1 - относительное содержание CD3+CD16+CD56+-лимфоцитов, %; X2 - концентрация С3-компонента комплемента, мг/дл; Х3 - концентрация sTNF-R, нг/мл. При PI<0 прогнозируют задержку внутриутробного роста плода во второй половине беременности, а при PI>0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния. Предлагаемый способ является малоинвазивным, позволяет с ранних сроков гестации выявить группу риска по формированию задержки внутриутробного роста плода, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику данного патологического состояния. 5 пр.

Способ прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения рака почки // 2528100

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения при раке почки. Для этого в ткани опухоли определяют экспрессию NF-kB p50, HIF-1α содержание сосудистого эндотелиального фактора роста VEGF. Рассчитывают дискриминантные функции Y1, Y2 по уравнениям: Y1=-3,2+0,026·Х1+0,03·Х2-0,02·Х3+0,34·Х4+0,3·Х5; Y2=-33,3-0,01·Х1+0,11-Х2-1,2·Х3+1,57·Х4+1,8·Х5, где X1 - тотальная активность протеасом ·10-3 МЕ/мг белка; Х2 - содержание VEGF, пг/мг белка ; Х3 - экспрессия HIF-1, УЕ/мг белка в лунке; Х4 - экспрессия NF-kВ p50, УЕ/мг белка в лунке. При значениях Y1>Y2 прогнозируют отсутствие, а при Y1<Y2 - развитие гематогенных метастазов. Использование данного способа позволяет прогнозировать прогрессирование рака почки, а следовательно, назначить своевременное назначение наиболее адекватных лечебных мероприятий. 1 табл., 2 пр.

Способ дифференциальной диагностики злокачественной и доброкачественной патологии молочной железы // 2530557

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и клинической биохимии. Сущность способа заключается в том, что фиксированные клетки периферической крови обрабатывают первичными антителами к эстроген-связываюшему белку, специфически взаимодействующими с антигенами на поверхности сегментоядерных гранулоцитов, затем к полученному комплексу антиген-антитело добавляют вторичные антивидовые флуоресцентно-меченные антитела, и при наличии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют злокачественные новообразования, а при отсутствии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют доброкачественные новообразования. Способ неинвазивен, позволяет быстро и со 100%-ной точностью дифференцировать пациенток, имеющих злокачественные опухоли молочной железы, от пациенток с доброкачественными новообразованиями и здоровых женщин. Данный тест может быть использован для экспресс-диагностики наличия рака молочной железы. 6 пр., 6 ил.

Способ прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа // 2531947

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у пациентов с постинфарктной хронической сердечной недостаточностью, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа. Для этого проводят измерение циркулирующих в периферической крови прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD 133 dim, CD45-. При снижении вышеуказанных клеток ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов прогнозируют неблагоприятный прогноз течения заболевания, проявляющийся в прогрессировании сердечной недостаточности и увеличении риска сердечно-сосудистой летальности. Изобретение обеспечивает прогнозирование показателей выживаемости у данной группы больных путем использования нового биомаркера крови. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Способ определения биологической активности эмбрионированных яиц trichuris // 2540145

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного. Представленное изобретение может быть использовано при получении безопасных фармацевтических продуктов, терапевтически эффективных при применении у человека. 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 6 пр.

Способ определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ммр9-1562 с>т (rs3918242) // 2548811

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242). Способ основан на снятии кривых плавления с флуоресцентно-мечеными аллель-специфичными олигонуклеотидными пробами. В способе используют общую для всех аллелей пару праймеров, отличающиеся для каждого аллеля флуоресцентно-меченые аллель-специфичные олигонуклеотидные пробы и универсальный олигонуклеотид, меченый гасителем флуоресценции следующего нуклеотидного состава: MMP9-1562s CGAAACCAGCCTGGTCAACG; ММР9-1562а TCTGCCTCCCGGGTTCAAGC; ММР9-1562р1 GGCGCACGCCTATAA-FAM; ММР9-1562р2 GGCGCATGCCTATAA-HEX; ММР9-1562pq BHQ1-ACCAGCTACTCGGGAGGC-3'-(P), где FAM - означает флуоресцентный краситель FAM, HEX - означает флуоресцентный краситель HEX, BHQ1 - означает присоединенный к 5'-концевому нуклеотиду темновой гаситель флуоресценции. Отнесение образца к гомозиготе или гетерозиготе по данному аллелю оценивается по форме кривых плавления ДНК - по максимуму первой производной графиков флуоресценции. Изобретение позволяет повысить надежность и доступность генотипирования. 1 ил.