Способ выявления когнитивных нарушений у белых крыс

Изобретение относится к области медицины, конкретно к экспериментальной медицине. Осуществляют однократное тестирование белых крыс в установке «открытое поле». Регистрируют суммарную длительность актов «локомоции», «обнюхивания», «сидит», число вертикальных стоек и актов «фризинг». По математическим формулам определяют прогностические коэффициенты F1 и F2 с последующим сравнением их величин. При F2 больше F1 констатируют наличие когнитивных нарушений у экспериментальных животных, при F1 больше F2 - их отсутствие. После этого рассчитывают прогностический индекс (ПИ), с помощью которого определяют степень выраженности когнитивных нарушений: низкая, средняя, высокая. Способ позволяет выявить наличие у крыс нарушений когнитивных функций за счет использования показателей двигательной и ориентировочно-исследовательской активности и тревожности. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для изучения когнитивных показателей белых крыс в норме и при патологии различного генеза.

Известны способы оценки показателей когнитивных функций путем тестирования экспериментальных животных в тестах «радиальный лабиринт», «лабиринт Морриса», «Т-лабиринт» [2, 5]. Особенностью данных методов является длительный период обучения животных, составляющий в среднем от 8-ми до 15-ти дней и больше.

Наиболее близким способом изучения когнитивных показателей животных (прототип) является способ изучения особенностей высшей нервной деятельности, заключающийся в выработке условного питьевого рефлекса в Т-образном лабиринте [3]. Однако данный способ является достаточно трудоемким и для выработки условного рефлекса у животных требуется продолжительный период времени (10 дней). При планировании экспериментального исследования возникает необходимость предварительной оценки когнитивного потенциала животных, которая позволит расширить или, напротив, сузить набор экспериментальных методов исследования в дальнейшем.

Задачей, решаемой данным изобретением, является разработка способа выявления когнитивных нарушений у белых крыс, позволяющего снизить трудоемкость и временные затраты на проведение эксперимента.

Поставленная задача достигается тем, что проводят тестирование белых крыс в «открытом поле»: в течение 3 минут регистрируют следующие показатели: суммарная длительность актов «локомоции», «обнюхивания», «сидит»; число вертикальных стоек; число актов «фризинг». Рассчитывают прогностические коэффициенты по формулам:

F1=-20,94+0,28×a1+0,20×a2+0,28×a3+1,23×a4+0,47×a5,

F2=-28,02+0,03×a1+0,39×a2+0,39×a3+4,15×a4+2,08×a5,

где F1 и F2 - прогностические коэффициенты, a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» (с), a2 - суммарная длительность акта «сидит» (с), a3 - суммарная длительность акта «локомоции» (с), a4 - число вертикальных стоек, a5 - число актов «фризинг».

Если F1 больше F2, делают заключение об отсутствии когнитивных нарушений у экспериментальных животных, а при F2 больше F1 - делают заключение о наличии когнитивных нарушений у экспериментальных животных и определяют степень их выраженности с помощью прогностического индекса (ПИ), который рассчитывают по формуле:

П И = 1 1 + e ( F 2 F 1 ) ,

где e - основание натурального логарифма (2,72…).

Если ПИ больше 0,5 и меньше 0,64, степень выраженности когнитивных нарушений определяют как низкую, при ПИ больше 0,65 и меньше 0,84 - как среднюю, при ПИ больше 0,85 - как высокую.

Новым в предлагаемом изобретении является то, что по результатам тестирования в «открытом поле» по показателям двигательной и ориентировочно-исследовательской активности и тревожности можно выявлять наличие у данных особей нарушений когнитивных функций, таких как способность к обучению и пространственной ориентации, а также нарушение процессов рабочей памяти. К тому же при вычислении прогностического индекса определяется степень выраженности когнитивных нарушений у животных.

Авторами не найдено в проанализированной литературе способа выявления когнитивных нарушений у белых крыс по показателям их поведения в «открытом поле».

Сравнение предлагаемого изобретения с существующими способами оценки когнитивных способностей белых крыс показало, что впервые предложено устанавливать наличие и оценивать степень нарушения когнитивных функций у крыс путем регистрации показателей их поведения в тесте «открытое поле».

Таким образом, заявленное изобретение соответствует критериям изобретения «Новизна» и «Изобретательский уровень», так как оно явным образом не следует для специалиста из уровня техники. Предлагаемое изобретение соответствует критерию «Промышленная применимость», так как оно может использоваться в экспериментальной медицине, физиологии, патологической физиологии, фармакологии для выявления когнитивных показателей животных и при планировании дизайна экспериментальных исследований.

В многочисленных исследованиях метод «открытое поле» используется для оценки состояния центральной нервной системы животных [1, 4]. Регистрируемые в данном тесте показатели поведения характеризуют ориентировочно-исследовательское поведение (обнюхивания), двигательную активность (локомоции, сидит) и тревожность (фризинг). Ориентировочно-исследовательская активность, как проявление высшей нервной деятельности, представляет собой один из важнейших типов поведения, благодаря которому животные получают знания об окружающей среде и демонстрируют элементарную рассудочную деятельность. В фармакологии повышение локомоторной и ориентировочно-исследовательской активности животных экспериментальных групп при сравнении с контролем указывает на наличие возможного ноотропного эффекта у исследуемых соединений [4, 5]. В то же время для оценки таких показателей когнитивных функций животных, как рабочая память, способность к обучению и пространственной ориентации, необходимо проведение дополнительных исследований с использованием стандартных методик, таких как условный рефлекс активного и пассивного избегания (УРПИ и УРАИ), Т-образный лабиринт, радиальный лабиринт, водный лабиринт Морриса и т.п.

Эксперимент проводили на беспородных крысах в количестве 140 особей массой 180-240 г, полученных из собственного питомника Ангарского филиала ФГБУ «ВСНЦ ЭЧ» СО РАМН. Тестирование белых крыс проводили с использованием установки «открытое поле», представляющую собой круглую арену диаметром 97 см, с высотой стенок - 42 см, диаметром отверстий в полу - 2 см. Наблюдение производили в течение 3 минут с регистрацией следующих показателей: суммарная длительность актов «локомоции», «обнюхивания», «сидит»; число вертикальных стоек; число актов «фризинг».

Полученные результаты исследований обработаны с использованием ППП Statistica 6.0. (критерии Манна-Уитни, дискриминантный анализ, лиц №AXXR004E642326FA).

Таблица 1 позволяет сделать выводы относительно статистической значимости каждой из зависимых переменных, входящих в построенную модель. В данном случае все исследуемые переменные оказывают весьма значимое влияние на зависимую переменную (p<0,05). Уровень значимости для модели составил 0,0001.

Таблица 1
Показатели информативности признаков, включенных в линейные дискриминантные функции
Переменная в модели Лямбда Уилкса F p-уровень
Суммарная длительность «обнюхиваний» 0,42 44,64 0,00001
Суммарная длительность «сидит» 0,41 41,37 0,0001
Суммарная длительность «локомоции» 0,27 12,01 0,001
Число вертикальных стоек 0,26 10,18 0,0026
Число акта «фризинг» 0,24 7,36 0,0091

Для подтверждения когнитивного статуса белых крыс проводили оценку рабочей памяти, способности к обучению, пространственной ориентации и навигационному научению при тестировании в радиальном лабиринте и водном лабиринте Морриса.

В таблице 2 представлены результаты тестирования животных в «открытом поле», «радиальном лабиринте», водном лабиринте Морриса (данные представлены в виде медианы и интерквартильного размаха).

Таблица 2
Показатели тестирования животных в «открытом поле», «радиальном лабиринте», водном лабиринте Морриса, Me (LQ; UQ)
Показатели Варианты исследования
Группа №1 «острая пренатальная гипоксия» Группа №2 «хроническая пренатальная гипоксия» Группа №3 «толуол» Группа №4 «контроль»
Открытое поле
Суммарная длительность «обнюхивания», с 46 (38; 51,5) 31 (25; 37)* 32,5 (28; 39) 52 (42; 71)
Число вертикальных стоек 4 (2; 6) 2,5 (1; 4)* 5 (4; 6) 4 (3; 6)
Суммарная длительность «локомоций», с 64 (21; 79)* 77 (62; 95) 97 (88; 106)* 73 (61; 92)
Суммарная длительность «сидит», с 46 (23; 85)* 43 (23; 56)* 5 (4; 6) 16 (7,5; 26)
Число актов «фризинг» 2 (1; 4)* 1 (1; 2)* 1 (0; 2) 1 (0; 1)
Радиальный лабиринт
Число ошибок рабочей памяти (последний сеанс тестирования) 0 (0; 0,5) 0,5 (0; 1)* 0 (0; 0,5) 0 (0; 0)
Число последовательно посещенных рукавов (последний сеанс тестирования) 3,5 (3; 4) 2 (3; 3)* 3 (3; 4) 4 (3; 4)
Водный лабиринт Морриса
Латентный период поиска скрытой платформы, с 68,5 (40,5; 78,0)* 59,5 (46,3; 72,8)* 51,3 (37-73,5)* 42,7 (31,8; 61,5)
Примечание: * - различия статистически значимы по сравнению с контролем при p<0,05; число животных в каждой группе - 35

Пример 1.

Белая крыса, подвергавшаяся хронической пренатальной гипоксии. При обследовании в тесте «открытое поле» выявлены числовые значения показателей:

a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» - 32,5 с,

a2 - суммарная длительность акта «сидит» - 23 с,

a3 - суммарная длительность акта «локомоции» - 109,7 с,

a4 - число вертикальных стоек - 0,

a5 - число актов «фризинг» - 1.

Вычисляем прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам:

F1=-20,94+0,28×32,5+0,20×23+0,28×109,7+1,23×0+0,47×1=23,63,

F2=-28,02+0,03×32,5+0,39×23+0,39×109,7+4,15×0+2,08×1=27,26.

F2 больше F1, ПИ=0,97.

Заключение: наличие у данной особи когнитивных нарушений высокой степени выраженности. Результаты тестирования в водном и радиальном лабиринтах показали, что у данного животного показатели когнитивных способностей значительно снижены по сравнению с группой контроля. Так, латентный период поиска скрытой платформы в водном лабиринте у данной особи составил 61,9 с, что значительно выше среднего показателя группы контроля (42,7 (31,8; 61,5) с. При обучении в радиальном лабиринте число ошибок рабочей памяти (2 ошибки) в последний сеанс обучения у данной особи превышало показатель контрольной группы 0 (0; 0). Число последовательно посещенных подкрепляемых рукавов лабиринта у данной особи (2) было значительно ниже показателей контрольной группы 4 (3; 4) (табл.2).

Пример 2.

Белая крыса, подвергавшаяся ингаляционному воздействию толуола. При обследовании в тесте «открытое поле» выявлены числовые значения показателей:

a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» - 55 с,

a2 - суммарная длительность акта «сидит» - 19,5 с,

a3 - суммарная длительность акта «локомоции» - 79,7 с,

a4 - число вертикальных стоек - 1,

a5 - число актов «фризинг» - 3.

Вычисляем прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам:

F1=-20,94+0,28×55+0,20×19,5+0,28×79,7+1,23×1+0,47×3=23,09;

F2=-28,02+0,03×55+0,39×19,5+0,39×79,7+4,15×1+2,08×3=23,12.

F2 больше F1, ПИ=0,51.

Заключение: наличие у данной особи когнитивных нарушений низкой степени выраженности. Обследование в водном и радиальном лабиринтах подтвердило наличие когнитивных нарушений у данного животного. У данной особи наблюдалось повышение латентного периода поиска скрытой платформы в водном лабиринте, составившего 57,2 с и значительно превышавшего средний показателя группы контроля (42,7 (31,8; 61,5) с. При обучении в радиальном лабиринте выраженных нарушений рабочей памяти выявлено не было (табл.2).

Пример 3.

Белая крыса, подвергавшаяся острой пренатальной гипоксии. При обследовании в тесте «открытое поле» выявлены числовые значения показателей:

a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» - 57 с,

a2 - суммарная длительность акта «сидит» - 23 с,

a3 - суммарная длительность акта «локомоции» - 85 с,

a4 - число вертикальных стоек - 1,

a5 - число актов «фризинг» - 2.

Вычисляем прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам:

F1=-20,94+0,28×57+0,20×23+0,28×85+1,23×1+0,47×2=25,34,

F2=-28,02+0,03×57+0,39×23+0,39×85+4,15×1+2,08×2=24,56.

F2 больше F1, ПИ=0,68.

Заключение: наличие у данной особи когнитивных нарушений средней степени выраженности. При тестировании в водном и радиальном лабиринтах были подтверждены полученные результаты. У данного животного наблюдалось повышение латентного периода поиска скрытой платформы в водном лабиринте (69,1 с) и числа ошибок рабочей памяти при обучении в радиальном лабиринте (3) по сравнению со средними показателями группы контроля (табл.2).

Пример 4.

Белая крыса из контрольной группы. При обследовании в тесте «открытое поле» выявлены числовые значения показателей:

a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» - 59,2 с,

a2 - суммарная длительность акта «сидит» - 27,9 с,

a3 - суммарная длительность акта «локомоции» - 73,2 с,

a4 - число вертикальных стоек - 0,

a5 - число актов «фризинг» - 1.

Вычисляем прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам:

F1=-20,94+0,28×59,2+0,20×27,9+0,28×73,2+1,23×0+0,47×1=21,95,

F2=-28,02+0,03×59,2+0,39×27,9+0,39×73,2+4,15×0+2,08×1=15,68.

F1 больше F2.

Заключение: отсутствуют когнитивные нарушения у данной особи. Тестирование в водном и радиальном лабиринтах подтвердило полученные результаты. Нарушений способности к навигационному научению и изменений процессов пространственной и рабочей памяти не наблюдалось. Показатели когнитивных способностей данной особи - латентный период поиска скрытой платформы (35 с), число ошибок рабочей памяти (0) и число последовательно посещенных подкрепляемых рукавов радиального лабиринта в последний сеанс тестирования (4) - находились в пределах средних показателей контрольной группы (табл.2).

Таким образом, предлагаемый способ менее трудоемок и требует меньше времени на проведение эксперимента.

Литература

1. Обучение в водном лабиринте Морриса самок и самцов крыс, подвергавшихся воздействию гипоксии в различные сроки пренатального периода развития / О.И. Ватаева [и др.] // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. - 2005. - Т.41, №6. - С.530-533.

2. Самотруева М.А. Экспериментальные модели поведения / М.А. Самотруева, Д.Л. Теплый, И.И. Тюренков // Естественные науки. - 2009. - №2. - С.140-152.

3. Першина О.В., Суслов Н.И., Литвиненко В.И., Попова Т.П. Влияние экстракта из надземной части Scutellaria baicalensis Georgi на выработку и воспроизведение условного питьевого рефлекса у интактных животных и животных с алкогольной интоксикацией // Растительные ресурсы. - 2000. - Вып.2. - С.120-124.

4. Иванов Д.Г. Взаимосвязь уровня метаболизма коллагена и поведения крыс в тесте «открытое поле» / Д.Г. Иванов, В.Г. Подковкин // Успехи современного естествознания. - 2010. - №5. - С.16-20.

5. Подковкин В.Г. Влияние краткосрочной изоляции на поведение крыс в тесте «открытое поле» / В.Г. Подковкин, Д.Г. Иванов / Успехи современного естествознания. - 2009. - №6. - С.12-16.

1. Способ выявления когнитивных нарушений у белых крыс, заключающийся в изучении поведения животных, отличающийся тем, что поведение животных исследуют в тесте «открытое поле», в течение трех минут регистрируют суммарные длительности актов «обнюхивание», «сидит», «локомоция», число акта «фризинг» и число вертикальных стоек, определяют прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам:
F1=-20,94+0,28×a1+0,20×a2+0,28×a3+1,23×a4+0,47×a5,
F2=-28,02+0,03×a1+0,39×a2+0,39×a3+4,15×a4+2,08×a5,
где F1 и F2 - прогностические коэффициенты, a1 - суммарная длительность акта «обнюхивания» (с), a2 - суммарная длительность акта «сидит» (с), a3 - суммарная длительность акта «локомоции» (с), a4 - число вертикальных стоек, a5 - число актов «фризинг», и при F1 больше F2, делают заключение об отсутствии когнитивных нарушений у экспериментальных животных, а при F2 больше F1 констатируют наличие когнитивных нарушений у экспериментальных животных.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при наличии когнитивных нарушений у экспериментальных животных оценивают степень их выраженности по формуле:
П И = 1 1 + e ( F 2 F 1 ) ,
где ПИ - прогностический индекс,
е - основание натурального логарифма (2,72…),
F1 и F2 - прогностические коэффициенты,
при ПИ больше 0,5 и меньше 0,64 степень выраженности когнитивных нарушений определяют как низкую, при ПИ больше 0,65 и меньше 0,84 - как среднюю, при ПИ больше 0,85 - как высокую.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования в эксперименте интоксикации мелких лабораторных животных газообразными продуктами горения веществ с низкой и средней температурой горения на примере древесных опилок.

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для изучения физиологических функций всасывания различных веществ и моторики в изолированном участке тонкого кишечника по Тири-Велла в эксперименте.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения вопросов лечения сахарного диабета. Способ включает введение инсулин-продуцирующих клеток в дозе 500 тыс.
Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине, а именно к возможности экспериментального изучения патогенеза профессиональных заболеваний, в частности - антракосиликоза.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к радиобиологии и комбустиологии, и может быть использовано для изучения механизмов патогенеза сочетанных радиационных поражений (СРП), включая феномен взаимного отягощения, а также испытания новых способов и средств профилактики и лечения СРП.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа представляют звуковой сигнал в виде суперпозиции отдельных составляющих тонов входного сложномодулированного колебания, образованного наложением нескольких звуковых колебаний.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения сахарного диабета, а также при разработке новых методов лечения изменений, вызванных сахарным диабетом I типа.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для моделирования заболеваний женских половых органов в эксперименте. Для моделирования эндометриоза для аутотрансплантации берут прямоугольные участки эндометрия размером 2×3 мм и подшивают их микрохирургическими инструментами атравматическим синтетическим нерассасывающимся монофиламентным шовным материалом 9/0 четырьмя швами по углам участка эндометрия двумя двойными узлами в каждом шве.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для изучения функциональных и патоморфологических изменений, возникающих при повышенном внутрибрюшном давлении (ВБД).

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается создания модели болезни Альцгеймера. Для этого используют трансгенных мышей линии B6C3-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/J.
Изобретение относится к медицине, а именно к профилактической медицине, и предназначено для выявления лиц молодого возраста с высоким риском развития сердечно-сосудистых заболеваний для своевременной его коррекции.

Изобретение относится к спортивной медицине и может быть использовано для определения рейтинга спортсменов-единоборцев. Испытуемому предъявляют на экране видеомонитора окружность, на которой помещена метка и точечный объект.

Изобретение относится к спортивной медицине и предназначено для оценки точности двигательных действий спортсмена игровых видов спорта. Испытуемому предъявляют на экране видеомонитора окружность, на которой помещена метка и точечный объект, движущийся с заданной скоростью по окружности.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для коррекции ожирения гиноидного типа. Для этого определяют тип нарушения пищевого поведения и проводят его психофизиологическую коррекцию.

Изобретение относится к медицине, судебной медицине, области измерений для диагностических целей, в том числе, в следственной практике. Интерактивное психофизиологическое тестирование (ПФТ) включает предъявление тестируемому вопросов теста, определение, анализ параметров психогенеза, используя датчики физических параметров тестируемого, индикацию результатов и вынесение суждения.

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано для выявления лиц с риском развития гипертонической болезни. В течение 10 лет у практически здоровых мужчин на основании их базового обследования определяют нормативные значения относительного риска развития заболевания, а также показатели шкал стандартного многофакторного метода исследования личности (СМИЛ), и строят график их соответствия, при показателях шкал: «невротический сверхконтроль» - свыше 45 баллов, «пессимистичность» - свыше 49 баллов, «ригидность» - свыше 58 баллов, «тревожность» - свыше 67 баллов, «индивидуалистичность» - свыше 50 баллов.
Изобретение относится к области медицины, а именно к области проведения психофизиологических исследований, например, анализа психофизиологических реакций человека, и может быть использовано в медицинских целях, в рекламном деле, функциональной диагностике, педагогике, психологии, судебной практике и криминалистике.
Изобретение относится к области медицины, физиологии, неврологии, психиатрии для диагностики склонностей к девиантным видам поведения у человека. Проводят балльную оценку анамнеза, результатов неврологического и психиатрического обследования, психофизиологического тестирования с присуждением 0 баллов при отсутствии отягощенного анамнеза, очаговой симптоматики и неврологической клиники заболеваний, психических заболеваний, неблагоприятной окружающей социальной среды.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для повышения эффективности лечения пациентов с синдромом диспепсии в сочетании с избыточной массой тела.

Изобретение относится к любой области, где требуется оценка зрительно-моторной реакции человека на движущийся объект, и может найти применение в медицинской, психологической, физиологической, спортивной, транспортной и авиационно-космической практике.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано стоматологами различных направлений. Перед началом стоматологических мероприятий с помощью тестов выявляют степень психоэмоционального напряжения и психофизиологическое состояние пациента, а также определяют уровень пульса до проведения первого теста (Р1), между проведением двух тестов (Р2) и после проведения второго теста (Р3). При наличии легкой степени психоэмоционального напряжения, устойчивом психофизиологическом состоянии в сочетании с разницей между Р3 и Р2 не более чем 15 уд./мин по сравнению с разницей между Р2 и Р1 оценивают психоэмоциональное состояние как устойчивое и констатируют готовность пациента к стоматологическому вмешательству. При наличии средней степени психоэмоционального напряжения, пограничном психофизиологическом состоянии в сочетании с разницей между Р3 и Р2 не более 15 уд./мин по сравнению с оптимальным состоянием с разницей между Р2 и Р1 оценивают психоэмоциональное состояние как лабильное и констатируют необходимость проведения релаксационных воздействий на пациента перед стоматологическим вмешательством. При наличии тяжелой степени психоэмоционального напряжения, неустойчивом психофизиологическом состоянии в сочетании с разницей между Р3 и Р2 более 15 уд./мин по сравнению с разницей между Р2 и Р1 оценивают психоэмоциональное состояние как неблагоприятное для стоматологического вмешательства, требующее его отсроченности. Способ позволяет выполнить экспресс-оценку психоэмоционального состояния пациента перед стоматологическим вмешательством. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к экспериментальной медицине. Осуществляют однократное тестирование белых крыс в установке «открытое поле». Регистрируют суммарную длительность актов «локомоции», «обнюхивания», «сидит», число вертикальных стоек и актов «фризинг». По математическим формулам определяют прогностические коэффициенты F1 и F2 с последующим сравнением их величин. При F2 больше F1 констатируют наличие когнитивных нарушений у экспериментальных животных, при F1 больше F2 - их отсутствие. После этого рассчитывают прогностический индекс, с помощью которого определяют степень выраженности когнитивных нарушений: низкая, средняя, высокая. Способ позволяет выявить наличие у крыс нарушений когнитивных функций за счет использования показателей двигательной и ориентировочно-исследовательской активности и тревожности. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 пр.

Наверх