Способ оценки угрозы развития анемии на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции путем измерения удельной оптической плотности гемоглобина в эритроцитах периферической крови при нарушении оксигенации


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2553361:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам диагностики и может быть использовано для диагностики угрозы оценки формирования анемии на третьем триместре беременности вследствие снижения процессов оксигенации гемоглобина при обострении цитомегаловирусной инфекции. Способ включает определение титра антител к цитомегаловирусу, содержания в эритроцитах 2,3 ДФГ (2,3-дифосфоглицерата), оксигемоглобина. При увеличении титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, нарастании 2,3 ДФГ до 6,7±0,3 мкмоль/мл, содержании HbO2 95,0±1,7%, при снижении удельной оптической плотности гемоглобина до 0,70±0,01 делают вывод о формировании угрозы развития анемии. Способ позволяет изучить характер нарушения оксигенации гемоглобина с помощью определения удельной оптической плотности.

 

1. Цель изобретения - выявить, что при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации снижается оксигенация дезоксигемоглобина эритроцитов периферической крови.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа диагностики снижения оксигенации гемоглобина при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации путем определения степени удельной оптической плотности гемоглобина в области красного спектра при спектрофотометрическом облучении эритроцитов периферической крови.

3. Раскрытие изобретения

Исходя из электронной структуры молекул, можно уточнить, что они способны поглощать электромагнитное излучение [10]. Весьма характерны спектры поглощения гемоглобина, что и используется для количественной оценки степени насыщения гемоглобина кислородом. Поглощение света молекулами проявляется в ослаблении светового потока после его прохождения через объект. Поглощение света объектом тем выше, чем выше его плотность. Это выведено законом Бугера-Ламберга-Бера и измеряется показателем удельной оптической плотности [1]. При гомогенном строении вещества (таком как гемоглобин) интенсивность света во всех точках оптического пути одинакова, что приводит к тому, что оптическая плотность образца меньше, чем в растворе [6]. Для оксигемоглобина наиболее информативным является диапазон волн поглощения света λ 415-542 нм [2, 4]. При этом диапазоне мы и изучали удельную оптическую плотность гемоглобина, содержание которого зависит от степени оксигенации дезоксигемоглобина в свою очередь зависит от количества присоединенного к нему 2,3 ДФГ. Если количество присоединенного к дезоксигемоглобину 2,3-дифосфоглицерата будет выше 5 мкмоль/мл, присоединение кислорода к дезоксигемоглобину кислорода будет резко снижаться. Это отражается на количестве HbO2, а удельная оптическая плотность его становится ниже.

4. Новая техническая задача

Найти новый способ оценки степени оксигенации гемоглобина методом измерения удельной оптической плотности при действии на организм беременной цитомегаловирусной инфекции.

5. Уровень техники раскрытия изобретения

Определение гемоглобина в эритроцитах разрабатывалось многими исследователями. В основном они представляют разновидности спектрофотометрического метода: 1. облучение эритроцитов терапевтическим лазером, при котором происходят в объекте температурно-зависимые изменения свойств среды, в том числе показатели преломления (фото-эффект), подлежащие спектрометрии [3]. Разновидностью спектрометрического определения гемоглобина является метод, предложенный в [7]. Оба эти метода носят многоступенчатый характер определения и весьма трудоемки. Используемый вновь созданный цитофотометрический аппарат «Mekos» (медицинские компьютерные системы) позволяет определять фотометрические параметры клеток для диагностики заболеваний. Аппарат зарегистрирован МЗ РФ 29/10010198/1282-01. Одно из исследований этим аппаратом было проведено на больных бронхиальной астмой для определения гемоглобина в эритроцитах периферической крови [8]. Мы применяли этот метод для определения содержания гемоглобина в отобранной группе эритроцитов (500 единиц), окрашенных на мазке по Лепене - специфическая окраска на гемоглобин. И после облучения в красном спектре, характерном для оксигемоглобина (это выполняется на аппарате «Mekos» по выбору исследователя), получали среднее значение гемоглобина в исследуемых эритроцитах.

Метод специфичен и прост в своем исполнении. После получения содержания гемоглобина в эритроцитах дополнительно принимается для анализа содержание HbO2 и 2,3 ДФГ, которые позволяют окончательно делать вывод о нарастающей угрозе формирования анемии у пациента. Подобные исследования у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции в доступной литературе мы не встречали.

6. Осуществление изобретения

6.1. Исследования проводились на базе акушерского отделения ФГБУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Обследовано 20 рожениц в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией в стадии обострения (основная группа) и 10 беременных без патологии (контрольная группа). Диагноз обострения хронической цитомегаловирусной инфекции устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности (65%), а также наличия ДНК к ЦМВ.

6.2. Исследования проводились с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с учетом человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

6.3. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПНР на аппарате ДТ-96 (Россия) с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.4. Содержание 2,3 ДФГ определяли по прописи Лугановой И.С. и Блиновой М.Н. [5].

6.5. Уровень оксигемоглобина оценивали по прописи Эвелина и Мэллой [9].

6.6. Удельная оптическая плотность оксигемоглобина определялась на мазках, окрашенных на гемоглобин по Лепене [11] и автоматически вычислялась удельная оптическая плотность гемоглобина в эритроцитах на цитоспектрофотометре «Mekos» (Россия).

7. Статистическая обработка проводилась непарным параметрическим критерием Стьюдента и методом Фишера.

В процессе исследования установлено, что обострение хронической цитомегаловирусной инфекции до титра 1:1600 на третьем триместре гестации связано со снижением оксигенации дезоксигемоглобина в эритроцитах периферической крови до 95,0±1,7%. При этом отмечается, что содержание 2,3 ДФГ в эритроцитах нарастало до 6,7±0,3 мкмолль/мл (контроль - 4,90±0,20 мкмоль/мл). В сложившихся условиях удельная оптическая плотность оксигемоглобина составляла 0,70±0,01 нм (контроль - 0,25±0,05 нм).

Таким образом, при обострении цитомегаловирусной инфекции до титра 1:1600 изменяется связь 2,3 ДФГ с гемоглобином и количество его присоединяется до 6,7±0,3 мкмоль/мл, что мешает оксигенации гемоглобина. Плотность гемоглобина снижается, поэтому удельная оптическая плотность гемоглобина будет составлять 0,70±0,01 нм (контроль - 0,25±0,05 нм), что создает угрозу формирования анемии.

Литература

1. Алексеевский В.Б., Бардин В.В. и др. Физико-химические методы анализа. Л.: Химия. 1988.

2. Блюменфельд Л.А. Гемоглобин // Соросовский образовательный журнал. 1998. №4.

3. Брусничкин А.В., Недоседин Д.А., Рындина Е.С. Определение различных форм гемоглобина методом термолизиновой спектрометрии // Вестник Московского университета. Сер. 2. Химия. 2009. Т. 50. №1. С. 55-66.

4. Колотова Н. Фотоника. «Лабметод». 2009. №6.

5. Луганова И.С., Блинова М.Н. Определение 2,3-дифосфоглицериновой кислоты неэнзиматическим методом в эритроцитах больных хроническим лимфолейкозом // Лабор. дело. 1975. №11.

6. Мерзляк М.Н., Чивунова О.Б.. и др. Спектры поглощения и рассеяния света клеточными суспензиями некоторых цианобактерий и микроводорослей // Физиология растений. 2008. 55(3). С. 464-470.

7. Мосур Е.Ю. Спектрофотометрический метод определения содержания основных производных гемоглобина. Дисс. канд. физико-математических наук. 2007. 118 с.

8. Надточий Е.В. Морфофункциональная характеристика нарушений газообмена у больных бронхиальной астмой. Автореф. дисс. на соискания степени канд. мед. наук. 2007.

9. Биохимические методы исследования. Справочник (под редакцией А.А. Покровского). М.: Медицина. 1969. 337 с.

10. Тучин В. Оптическая биомедицинская диагностика. М.: Наука. Физматлит. 2007.

11. Undritz Ε. Atlas of Haematology. Sandoz: Basle. 1973.

Способ оценки угрозы развития анемии на третьем триместре гестации, включающий определение титра антител к цитомегаловирусу, содержания в эритроцитах 2,3 ДФГ, оксигемоглобина, и при увеличении титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, нарастании 2,3 ДФГ до 6,7±0,3 мкмоль/мл, содержании HbO2 95,0±1,7% удельная оптическая плотность гемоглобина снижается до 0,70±0,01 нм, что свидетельствует о формировании угрозы развития анемии.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Проводят нейровизуализационное исследование головного мозга, определяют коэффициент коморбидности Cirs и коэффициент коморбидности Kaplan-Feinstein, выявляют кохлеовестибулярный синдром, глазодвигательные расстройства, тип сахарного диабета.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для неинвазивной экспресс-диагностики воспалительного процесса в кишечнике у телят. Способ включает определение в кале лейкоцитов, белка, гемоглобина и pH-реакции кала.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики вагинита у женщин репродуктивного возраста. Во влагалищных соскобах измеряют уровни экспрессии мРНК генов TNF, IL18, GATA3 и TLR4.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к способу анализа еx-vivo, будет ли больной раком субъект отвечать терапевтически на способ лечения. Для этого от пациента получают биологический образец, выбранный из группы, состоящей из образца общей крови, плазмы или сыворотки.

Изобретение относится к медицине и касается ранней диагностики инфекционных осложнений у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), получающих химиотерапию (XT).
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частого развития острых респираторных вирусных инфекций в течение первого года жизни у доношенных новорожденных с внутриутробным гриппом A(H3N2).

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения гидроксибензола и его монометильных замещенных в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических и ветеринарных лабораторий.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования развития терминальной стадии у больных хроническим миелолейкозом. Сущность способа состоит в том, что в лимфоцитах периферической крови больных хроническим лейкозом в развернутой стадии определяют активность двух дегидрогеназ - глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ).

Изобретение относится к микробиологии, а именно к способу микроскопического исследования нативного соскоба слизистой корня языка. Сущность способа состоит в том, что деревянным шпателем забирают 0,5 мл биоматериала из глубокого соскоба со слизистой на границе задней трети спинки и корня языка, готовят два мазка на двух предметных стеклах площадью 1,5-2,0 см2, мазки высушивают 20 минут, осуществляют фиксацию мазка жаром в пламени спиртовки непрерывно в течение 5-6 секунд, окрашивают сложным дифференциальным методом Грама, микроскопируют с иммерсией при объективе х100, просматривают не менее 10 полей зрения на каждом стекле, учитывая количественные и качественные характеристики микроорганизмов, клеток и ядер эпителия.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и эндокринологии, и может быть использовано для выявления манифестации нарушения тканевой чувствительности к инсулину у пациентов в раннем периоде острого инфаркта миокарда.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования вероятности снижения скорости клубочковой фильтрации (СКФ) через 3 месяца наблюдения после аортокоронарного шунтирования без искусственного кровообращения (АКШ без ИК). Сущность способа состоит в том, что определяют концентрацию молекулы почечного повреждения типа 1 (КIM-1) в сыворотке крови, рассчитывают отношение концентраций биомаркера KIM-1 в двух временных точках через 48 часов и 7 дней после операции и при его значении более 1,5 делают заключение о вероятности снижения СКФ в отдаленном периоде после АКШ без ИК. Использование заявленного способа позволяет эффективно и точно спрогнозировать вероятность снижения скорости клубочковой фильтрации (СКФ) через 3 месяца наблюдения после аортокоронарного шунтирования без искусственного кровообращения. 1 табл., 1 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине и описывает способ диагностики инфицированного панкреонекроза с установлением показаний к оперативному вмешательству путем обследования больного, где газохроматографическим методом определяют в крови содержание уксусной, пропионовой, масляной и изовалериановой кислот и при концентрации уксусной кислоты больше 0,11 ммоль/л устанавливают наличие инфицированного панкреонекроза, а при концентрации любой из трех кислот: пропионовой больше 0,0095 ммоль/л, масляной больше 0,0035 ммоль/л, изовалериановой больше 0,0003 ммоль/л - устанавливают наличие инфицированного панкреонекроза с активным развитием анаэробной инфекции, требующего одного из вариантов оперативного вмешательства. Изобретение позволяет повысить объективность и точность диагностики перехода панкреонекроза в стадию инфицирования за счет использования количественных параметров без появления нежелательных побочных эффектов. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована в лабораторной диагностике как тест-система и способ определения антивирусной активности интерферона альфа (ИФН-α) в сыворотке крови человека. Тест-система для определения уровня активности ИФН-α в сыворотке крови человека, включает диплоидные клетки, вируссодержащую жидкость и стандартный интерферон-α (ИФН-α) человека. В качестве диплоидных клеток тест-система включает клетки охарактеризованной линии диплоидных клеток - фибробластов человека М-20 на уровне 20-33 пассажей, культивированные в среде с добавлением 10% фибринолитически активной плазмы (ФАП). А в качестве вируса - адаптированный к клеткам линии М-20 вирус везикулярного стоматита (ВВС), штамм Индиана, при этом тест-система дополнительно включает витальный краситель на основе двух флуорохромов - трипафлавина и родамина С. Группа изобретений включает также способ определения уровня активности ИФН-α в сыворотке крови человека с использованием разработанной системы. Использование данных изобретений позволяет количественно, с хорошей воспроизводимостью, определить активность ИФН-α в образцах исследуемой сыворотки крови с помощью люминесцентной микроскопии препаратов, окрашенных витальным красителем на основе флуорохромов. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к кардиологии и представляет собой способ определения вероятности сохранения миокарда от инфарктного повреждения, для чего создается «база данных» на основе исследования на момент поступления 7 параметров периферической крови, 11 параметров биохимического анализа крови и 6 параметров стандартной 12-канальной электрокардиограммы у 200 больных с Q-инфарктом миокарда и 200 больных, у которых развитие инфаркта миокарда не происходило. Параметры стратифицируют соответственно 7 интервалам, в которых путем расчета отношения больных, у которых не развивается инфаркт миокарда, ко всем больным с острым коронарным синдромом находят величины, связанные с вероятностью сохранения миокарда от инфарктного повреждения. Расчет вероятности у конкретного больного осуществляют путем исследования указанных выше параметров, поиска в «базе данных» соответствующих интервалов и величин, связанных с вероятностью сохранения миокарда. Суммируя найденные величины, рассчитывают интегральный показатель, который нормализуют, приводят к размерности от 0 до 100%. Изобретение позволяет повысить точность прогноза сохранения миокарда у больных с острым коронарным синдромом. 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики стафилококковой аллергии при аллергическом рините. Сущность способа состоит в том, что с помощью хемилюминесцентного анализа исследуют функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов, рассчитывают индекс образования активных форм кислорода (ИОАФК), представляющий собой отношение площади под кривой люминолзависимой хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов, индуцированной живой бактериальной суспензией золотистого стафилококка, ко времени выхода на максимум люминолзависимой хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов, индуцированной живой бактериальной суспензией золотистого стафилококка. При значении ИОАФК более 100 о.е./с диагностируют сенсибилизацию к золотистому стафилококку у больных аллергическим ринитом. Использование заявленного способа позволяет диагностировать стафилококковую аллергию при аллергическом рините до начала терапии и способствует оптимальному выбору лечения больных. 1 табл., 2 пр.
Изобретение описывает способ интраоперационной оценки состояния периферических нервов путем выявления положительной активности ацетилхолинэстеразы. Способ заключается в изготовлении криостатных срезов нерва, промывании их в двух порциях малеатного буфера, инкубации в инкубационной среде. Инкубацию производят в течение 30-60 минут и инкубационная среда имеет следующий состав: ацетилхолин иодид 10 мг; 0,1М Na-малеатный буфер 2 мл; 0,1М цитрат натрия 4 мл; 0,03М сульфат меди 4 мл; 0,005М феррицианид калия 4 мл; рН среды составляет от 7,4 до 7,6 и температура от 50 до 55°C. Способ по изобретению позволяет в короткое время оценить жизнеспособность периферических нервов, что необходимо во время реконструктивно-восстановительных и высокотехнологичных нейрохирургических операций. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для диагностики кариеса зубов методом инфракрасной спектроскопии. Для этого образец слюны пациента предварительно высушивают, сухой остаток измельчают и суспензируют в вазелиновом масле. ИК-спектроскопию проводят в области спектра 1200-800 см-1 и определяют высоту пиков полос поглощения с максимумами 1070, 1017, 960, 860 см-1. Затем вычисляют значения четырех соотношений высоты пика с максимумом при 1070 см-1 к высоте пика с максимумом 1017 см-1, высоты пика с максимумом при 1070 см-1 к высоте пика с максимумом 960 см-1, высоты пика с максимумом при 1070 см-1 к высоте пика с максимумом 860 см-1, отношение высоты пика с максимумом при 1017 см-1 к высоте пика с максимумом 860 см-1. Кариес зубов диагностируют при следующих значениях соотношений высот пиков 1070/1017, равных 11,64±0,14, высот пиков 1070/960, равных 1,08±0,12, высот пиков 1070/860, равных 6,40±0,41, и высот пиков 1017/860, равных 4,15±0,44. Изобретение обеспечивает информативность диагностики и повышает ее точность. 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению ингибиторов адгезии и/или агрегации тромбоцитов, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем с использованием матрицы кДНК слюнной железы Anopheles stephensi получают полипептид, который используют в составе фармацевтической композиции и в наборах для скрининга ингибиторов адгезии или агрегации тромбоцитов. Изобретение позволяет получить полипептид, обладающий ингибиторной активностью в отношении агрегации тромбоцитов и/или ингибиторной активностью в отношении адгезии тромбоцитов. 6 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к инфекционным болезням и гастроэнтерологии. Способ диагностики наличия и стадии фиброза печени при хроническом вирусном гепатите С заключается в том, что определяют концентрации ГГТ, ТФР-β1, ТИМП-1 и комплекс ММП-9/ТИМП-2 в сыворотке крови, на 1-м этапе рассчитывают вероятность наличия HCV-ассоциированного фиброза печени (РНФП) по формуле: РНФП=(ey/(1+ey))×100%, где y=-13,6+3,78·X1-0,1·X2 где X1 - сывороточное значение прогностического фактора ММП-9/ТИМП-2, X2 - сывороточное значение прогностического фактора ТИМП-1, ey - экспоненциальная функция. При значении РНФП>50% прогнозируют наличие HCV-ассоциированных фиброзных изменений в печени. Далее на 2-м этапе рассчитывают вероятность стадии HCV-ассоциированного фиброза печени (РСФП) по формуле: РСФП=(ey/(1+ey))×100%, где y=-12+0,134317·X1+0,527778·X2-0,05·X3, где X1 - сывороточное значение прогностического фактора ММП-9/ТИМП-2, X2 - сывороточное значение прогностического фактора ТФР-β1; X3 - сывороточное значение прогностического фактора ГГТ. При значении РСФП>50% диагностируют наличие предцирротической стадии фиброза и цирроза печени при ХВГС (F3-4 ст.), при РСФП<50% - HCV-ассоциированного фиброза печени начальной стадии (F0-2 ст.). Заявленный способ является простым в исполнении, доступным для практических медицинских учреждений здравоохранения, неинвазивным и безопасным для пациентов, экономичным по стоимости и времени, эффективным для скрининга предцирротической стадии фиброза и цирроза печени. 3 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики гестационного сахарного диабета у беременных, включающий проведение исследования крови утром натощак с определением содержания глюкозы венозной плазмы. Сущность способа состоит в том, что при уровне глюкозы венозной плазмы натощак менее 5,1 ммоль/л, выявлении факторов риска диабета: ожирение с исходной, до беременности, избыточной массой тела более или равной 30 кг/м2, или сахарном диабете 2 типа у ближайших родственников, или нарушении углеводного обмена в анамнезе, или глюкозории, в сроках беременности до 24 недель дополнительно проводят определение глюкозы капиллярной крови путем непрерывного мониторирования в течение 3 суток. При фиксировании одного или более показателей уровня глюкозы венозной плазмы крови натощак более или равном 5,1 ммоль/л, но менее 7,0 ммоль/л, через один час после еды, показателя уровня глюкозы венозной плазмы более или равным 10 ммоль/л, через 2 часа после еды, показателя уровня глюкозы венозной плазмы более или равным 8,5 ммоль/л диагностируют гестационный сахарный диабет. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность диагностики гестационного сахарного диабета у беременных. 3 ил., 2 табл., 1 пр.
Наверх