Способ выявления инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда в раннем госпитальном периоде



Способ выявления инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда в раннем госпитальном периоде
Способ выявления инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда в раннем госпитальном периоде

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2549479:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний" (НИИ КПССЗ) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и эндокринологии, и может быть использовано для выявления манифестации нарушения тканевой чувствительности к инсулину у пациентов в раннем периоде острого инфаркта миокарда. Способ включает исследование в крови пациента в первые сутки острого инфаркта миокарда с элевацией сегмента ST уровня инсулинемии, гликемии, свободных жирных кислот (СЖК), ретинолсвязывающего белка, фактора некроза опухоли и уровня грелина, далее на основании полученных результатов рассчитывают линейную классификационную дискриминантную функцию (КЛДФ1-с) по формуле: КЛДФ1-с=-3,877+0,095Адп+0,246Грл-0,025ИЛ-6-0,053ФНО,

где АДП - концентрация адипонектина, Грл - уровень грелина, ИЛ-6 - значения интерлейкина - 6, а ФНО - фактора некроза опухолей альфа, при этом вероятный риск развития инсулинорезистентности определяют при значениях КЛДФ1, меньших точки разделения кластеров 0,4545 и максимально приближенных к центроиду -0,561. Изобретение обеспечивает повышение достоверности диагностики развития инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда с элевацией сегмента ST в раннем госпитальном периоде. 2 пр., 2 ил., 2 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и эндокринологии, и может быть использовано для выявления манифестации нарушения тканевой чувствительности к инсулину у пациентов в раннем периоде острого инфаркта миокарда.

Одним из эффективных способов профилактики развития сердечно-сосудистых заболевания (ССЗ) является контроль метаболических факторов риска. Интегральным механизмом формирования комплекса метаболических факторов гипергликемии, дислипопротеинемии и ожирения является инсулинорезистентность (ИР) - сниженная чувствительность тканей к действию инсулина по обеспечению утилизации глюкозы при нормальном (физиологическом) или повышенном уровне инсулина в плазме крови. Данный фактор риска является предиктором кардиоваскулярных событий как у женщин, так и мужчин.

Для диагностики ИР существует ряд методов разной сложности, среди которых наибольшую известность получили гиперинсулинемический эугликемический клэмп и структурные математические модели на основе внутривенного и перорального глюкозотолерантного теста или определения глюкозы и инсулина натощак (с вычислением целого ряда индексов, в том числе HOMA, QUICKI).

Известен способ определения чувствительности тканей к инсулину с помощью эугликемического гиперинсулинемического клэмпа (clamp). В его основе лежит прерывание физиологической взаимосвязи уровня глюкозы и инсулина в организме путем контролируемого поддержания концентрации глюкозы в крови на заданном нормо- или гипергликемическом уровне. Методика проведения этого теста представляет собой постоянную внутривенную инфузию инсулина со скоростью 1 МЕ/мин на 1 кг массы тела и повторные инфузии глюкозы (Reaven G.M. Pathophysiology of insulin resistance in human disease // Physiologial Reviews. - 1995, №3. - Vol.75. - P.473-486). Для выявления необходимой скорости инфузии глюкозы и поддержания эугликемии в крови пациента каждые 5 минут оценивают уровень постпрандиальной гликемии. Через определенный период времени, но не менее 120 минут, устанавливается равновесие, когда скорость инфузии глюкозы равна ее периферической утилизации. В настоящее время это делается с помощью компьютерной программы, встроенной в специальную систему для инфузий.

К недостаткам способа относят его сложность, дороговизну, необходимость наличия специальной технической поддержки и обученного персонала. Кроме того, создаваемые экспериментом условия не являются физиологичными. В связи с этим его широкое применение в современных клинических и эпидемиологических исследованиях оказывается невозможным и ограничивается рамками специальных научных исследований.

Из косвенных или расчетных индексов наибольшее распространение получил индекс НОМА или НОМА-модель (Homeostatic Model Assessment) и индекс QUICKI (Quantitative Insulin Sensitivity Chek Index), основанные на определении концентрации глюкозы и инсулина в сыворотке крови, взятой натощак (Katz A, Nambi SS, Mather K, Baron A D, Follmann D A, Sullivan G & Quon M J. Quantitative insulin sensitivity check index: a simple, accurate method for assessing insulin sensitivity in humans. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 2000 85 P.2402-241). При этом для выявления ИР в сыворотке крови определяют не только концентрацию глюкозы, но и уровень инсулина натощак с последующим расчетом индексов HOMA-IR (HOMA-%B) и QUICKI. Недостатком способа является недостаточная диагностическая чувствительность и специфичность, не позволяющая выявлять ИР у относительно здоровых лиц. Кроме того, применение способа затруднено отсутствием норм для разных возрастных групп.

Известен способ скрининговой диагностики инсулинорезистентности, при котором у пациентов проводят однократный забор крови из локтевой вены натощак после 12 часового голода, затем в сыворотке крови ферментативным колориметрическим методом определяют показатели холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), триглицеридов (ТГ), а также концентрацию глюкозы (ГЛ) гемоксидазным методом (Пат. №2493566, Рос. Федерация: МПК G01N 33/50. G01N 33/92. Способ скрининговой диагностики инсулинорезистентности [Текст] / Г.Е. Ройтберг, Т.И. Ушакова, Ж.В. Дорош, О.О. Шархун, Е.А. Трубино; заявитель и патентообладатель ОАО «Медицина» (RU). - №2012121496/15; заявл. 25.05.12; опубл. 20.09.13, Бюл. 26. - 10 с.). При этом показатель инсулинорезистентности (ИМ) рассчитывали по формуле: МИ=(ТГ·ГЛ):(ХСЛПВП)2, и при значениях МИ≥7,0 диагностируют инсулинорезистентность.

Известен способ выявления скрытой инсулинорезистентности, при котором в сыворотке крови, взятой натощак, определяют уровень глюкозы (Г), триглицеридов (ТГ) и концентрацию аполипопротеинов AI (апо AI) и AII (апо AII). Скрытую инсулинорезистентность выявляют даже при нормальных уровнях Г и ТГ по величине молярного отношения апо AII/апо AI≥0,35 (Пат. №2367339, Рос. Федерация: МПК A61B 5/00, G01N 33/92. Способ выявления скрытой инсулинорезистентности [Текст] / О.В. Александрович, И.H. Озерова, А.Д. Деев, H.В. Перова, В.А. Метельская, Р.Г. Оганов; заявитель и патентообладатель ФГУ «ПТИЦ ПМ Росмедтехнологии» (RU). - №2008125215/14; заявл. 24.06.08; опубл. 20.09.09, Бюл. 26. - 8 с.).

Недостатком указанных способов является известный факт развития инфаркта миокарда при отсутствии изменений общепринятых показателей липидного профиля. Согласно данным Ansell B.J., Watson K.E. et al., 2003, почти 20% проявлений острого коронарного синдрома происходит при отсутствии изменений общепринятых липидных показателей кардиоваскулярного риска (ХС, ХС ЛПНП, ТАГ, апо белков), около 40% коронарных событий происходят при нормальных уровнях ХС ЛПВП.

Наиболее близким к заявляемому, является способ определения маркеров инсулинорезистентности у больных инфарктом миокарда, при котором на 1-е и 12-е сутки после развития инфаркта миокарда с элевацией сегмента ST в сыворотке крови определяют содержание свободных жирных кислот (СЖК), постпрандиальные значения глюкозы, C-пептида и инсулина, а также уровень ингибитора активатора плазминогена (Груздева, О.В. Маркеры инсулинорезистентности у больных инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST. / О.В. Груздева, О.Л. Барбараш, О.Е. Акбашева, Е.И. Паличева и др. // Российский кардиологический журнал. - 2011. - №6. - С.9-13).

Недостатком способа является невысокая диагностическая чувствительность и специфичность указанных маркеров, которую по данным литературы можно увеличить за счет комбинации с регуляторными факторами липидного и углеводного обменов - адипокинами, а также провоспалительными маркерами.

Техническим результатом предложенного изобретения является повышение достоверности диагностики развития инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST в раннем госпитальном периоде.

Технический результат достигается за счет того, что в сыворотке крови больного определяют уровни метаболических маркеров и регуляторных медиаторов в 1 сутки острого ИМпST, а вероятный риск рассчитывают с помощью диагностической модели.

Изучение механизмов развития ИР при патологических процессах, в том числе при инфаркте миокарда, представляет собой актуальную проблему. Наличие ИР у пациентов с ИМ имеет прогностическую ценность в отношении развития неблагоприятного исхода заболевания в течение 3-летнего периода.

Для выявления прогностически значимых показателей по отношению к выявлению инсулинорезистентности, на базе ФГБУ «НИИ КПССЗ» СО РАМН, проведено исследование, включающее 200 пациентов (130 мужчин и 70 женщин в возрасте 61,4±1,12 лет) с диагнозом острый инфаркт миокарда с элевацией сегмента ST. В контрольную группу были включены 33 человека без заболеваний сердечно-сосудистой системы, сопоставимых по возрасту и полу. На первом этапе исследования всем пациентам был определен индекс QUICKI и соответственно его значениям пациенты с ИМ были разделены на 2 группы: с ИР (N=154) и без ИР (n=46).

В рамках настоящего исследования для анализа были отобраны 13 биохимических маркеров, такие как традиционные маркеры углеводного метаболизма, липидтранспортной системы крови, эндокринных клеток жировой ткани (адипокины) и гастроинтестинальных клеток желудка (грелин) и маркеров воспаления. Был определен вклад каждого показа-геля в прогностическую модель развития инсулинорезистентности при остром инфаркте миокарда с элевацией сегмента ST (таблица 1).

Таблица 1
Показатель 1-е сутки ИМ 12-е сутки ИМ
ОШ 95%-й ДИ p AUC* ОШ 95%-й ДИ p AUC*
Глюкоза, ммоль/л 1,17 0,97-1,40 0,09 0,58 3,65 1,79-7,41 <0,001 0,79
Инсулин, мМЕ/мл 1,10 1,04-1,17 0,002 0,76 3,65 1,79-7,41 <0,001 0,98
C-пептид, нг/мл 1,08 0,72-1,62 0,71 0,58 0,10 1,02-4,33 0,04 0,64
СЖК, мкмоль/л 2,9 1,38-6,11 0,005 0,7 1,82 0,60-5,51 0,29 0,56
Адипонектин, мг/мл 0,94 0,88-1,01 0,11 0,61 0,97 0,91-1,02 0,23 0,63
Лептин, нг/мл, 1,01 0,98-1,05 0,38 0,57 1,06 1,01-1,11 0,02 0,66
Резистин, нг/мл 0,96 0,90-1,03 0,24 0,66 0,91 0,85-0,99 0,12 0,7
Ретинол-связывающий белок, мкг/л 1,01 1,01-1,02 0,003 0,74 1,01 1,00-1,02 0,004 0,75
Грелин, нг/мл 0,22 0,09-0,52 <0,001 0,87 0,57 0,42-0,76 <0,001 0,82
Фактор некроза опухоли альфа, пкг/мл 2,6 0,90-7,49 0,037 0,82 2,81 1,09-7,25 0,03 0,82
C-реактивный белок, мг/мл 1,01 0,99-1,03 0,29 0,535 1,04 1,0-1,08 0,03 0,603
Интерлейкин-6, пкг/мл 1,03 0,99-1,07 0,14 0,542 1,06 0,97-1,04 0,871 0,621
Ингибитор активатора плазминогена 1 типа, нг/мл 1,0 0,99-1,0 0,99 0,518 1,07 0,99-1,01 0,12 0,608
Примечание: AUC* - площадь под ROC-кривой; ДИ - доверительный интервал; ОШ - отношение шансов; p - достигнутый уровень значимости при сравнении с группой контроля.

Таким образом, наиболее значимыми факторами, ассоциированными с выявлением ИР в госпитальном периоде инфаркта миокарда, наряду с инсулинемией и гипергликемией являются повышенный уровень СЖК, ретинолсвязывающего белка, фактора некроза опухоли альфа и грелина.

Повышение уровня СЖК в остром периоде инфаркта миокарда было ассоциировано с трехкратным увеличением шансов развития ИР. Это связано с тем, что СЖК способны стимулировать секрецию инсулина бета-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы, уменьшать печеночный клиренс инсулина, нарушать рецепторный и пострецепторный сигналинг, что в конечном итоге способствует прогрессированию постпрандиальной гиперинсулинемии и ИР. Повышение концентрации СЖК в плазме крови рассматривается как неблагоприятный показатель избыточной активации липолиза, нарушения энергетического гомеостаза в кардиомиоцитах и манифестации ИР при ИМ.

У пациентов с ИР в остром периоде ИМ было выявлено повышение содержания ретинолсвязывающего белка в 5 раз по сравнению с группой контроля. Роль ретинолсвязывающего белка (РСБ) в качестве независимого фактора риска инсулинорезистентности у пациентов с ИБС активно обсуждается. В представленном исследовании, повышение в сыворотке крови уровня РСБ сопровождалось индукцией в печени фермента глюконеогенеза фосфоэнолпируват карбоксикиназы и нарушении сигнализации инсулина в мышцах.

В отличие от лептина, резистина и РСБ концентрация адипонектина, обладающего протекторными свойствами, снижалась на всем протяжении госпитального периода ИМ, особенно у пациентов с ИР. Адипонектин нейтрализует липотоксическое действие СЖК, инициирующих эндотелиальную дисфункцию и ИР. По-видимому, при ИМ снижение уровня адипонектина способствует реализации липотоксического эффекта СЖК, что, безусловно, благоприятствует развитию и поддержанию ИР. Подтверждают это предположение результаты корреляционного анализа, свидетельствующие о наличии обратной зависимости между уровнем СЖК и адипонектина (r=-0,49, p=0,02).

Наличие ИР у пациентов с ИМ было взаимосвязано со снижением уровня адипонектина по сравнению со здоровыми лицами в течение всего периода наблюдения. У пациентов с ИМ и нормальной тканевой чувствительностью к инсулину концентрация адипонектина практически не отличалось от лиц контрольной группы. Очевидно, что снижение концентрации адипонектина с последующим параллельным увеличением содержания адипокинов, усиливающих ИР при ИМ, что может создавать благоприятные условия для клинической манифестации ИР.

Как видно по данным таблицы 1, наиболее чувствительным и специфичным маркером ИР в проведенном исследовании явился грелин. Следует отметить высокую диагностическую чувствительность и специфичность грелина (величина AUC составила 82-87%) как маркера ИР при ИМ.

Таблица 2
Динамика грелина у пациентов ИМпST в течение госпитального периода
Параметры Группа контроля (n=33) Пациенты с ИМпST
Пациенты без ИР (n=46) Пациенты с ИР (n=154)
1-е сутки 12-е сутки 1-е сутки 12-е сутки
Грелин, нг/мл 55,2 (31,6; 90,2) 18,36* (18,14; 18,43) 18,21 (17,89; 18,73)* 15,07 (13,81; 17,59)*# 14,97 (13,57; 17,6)*&
Примечание: * - статистически значимые различия параметров с группой контроля (p<0,05); # - статистически значимые различия между группами пациентов с ИР и без ИР на 1-е сутки, (p<0,05); & - статистически значимые различия между группами с ИР и без ИР на 12-е сутки, (p<0,05).

Грелин является гастро-интестинальным эндокринным пептидом, играющим важную роль в регуляции секреции гормона роста, индукции приема пищи и энергетического гомеостаза. В то же время кардиомиоциты способны синтезировать грелин, который оказывает различные протективные эффекты, в частности, подавляет апоптоз кардиомиоцитов и улучшает функционирование левого желудочка при ишемии/реперфузии. В настоящем исследовании концентрация грелина была существенно снижена у пациентов с ИМ на протяжении всего госпитального периода, причем у пациентов с ИР изменения носили более выраженный характер. По-видимому, при ИМпST подавление секреции грелина может быть обусловлено дисбалансом в системе адипокинов, сопровождающимся дисфункцией инсулинсекретирующих клеток поджелудочной железы, нарушением липидного метаболизма и манифестацией ИР. При этом низкий уровень грелина на 1-е сутки ИМ увеличивал шансы развития ИР на 78%, а комбинация грелина со свободными жирными кислотами улучшала их диагностическую значимость в отношении ИР.

На основании полученных данных была предложена диагностическая модель, основанная на формуле линейной классификационной дискриминантной функции (КЛДФ):

КЛДФ1=-3,877+0,095Адп+0,246Грл-0,025ИЛ-6-0,053ФНО,

при этом информативными показателями для классификации ИР оказались концентрации адипонектина (АДП), грелина (Грл), значения интерлейкина - 6 (ИЛ-6) и фактора некроза опухолей альфа (ФИО). Оценка принадлежности пациента к группе «ИР есть» или «ИР нет» производится путем расчета значения функции КЛДФ1. Диагностическая модель позволяет достоверно выявить вероятность развития ИР у пациентов с ИМ на 1-е сутки заболевания при значениях КЛДФ1, максимально приближенных к центроиду соответствующего кластера (его значение равно -0,561) и меньших точки разделения кластеров 0,4545.

Предложенная модель оценки риска развития ИР у пациентов с ИМпST на 1-е сутки от начала заболевания, согласно ROC-кривой, демонстрирует «отличные» классификационные свойства. Площадь под кривой равна 0,914 (95% ДИ 0,867-0,962).

Сущность предложенного изобретения поясняется рисунком, где на фиг.1 изображены центроиды канонических линейных дискриминантных функций для кластеров - есть ИР и нет ИР. При этом центроид представляет собой значение функции, получаемое при подстановке в дискриминантное уравнение средних значений предикторов в группе, 0,4545 - точка разделения - середина расстояния между центроидами -0,561 и 1,47.

Для каждого нового объекта рассчитывается значение КЛДФ и определяется соответствующая точка на координатной прямой. Объект считается принадлежащим к тому классу, чей центроид ближе.

На фиг.2 представлена ROC-кривая диагностической модели развития инсулинорезистентности у пациентов с острым ИМпST на первые сутки заболевания. При этом площадь под кривой равна - 0,914 (95% ДИ 0,867-0,962), чувствительность модели - 81,6%, специфичность - 83,9%, в 82,2% случаев - правильно классифицированные случаи ИР.

Таким образом, результаты представленного диагностического моделирования указывают на высокую значимость адипокинового дисбаланса, дефицита грелина и активации провоспалительного статуса для выявления ИР в госпитальном периоде ИМ.

Ниже представлены примеры осуществления способа.

Пример 1. Пациент К., 61 год. Поступил с диагнозом: Q-образующий инфаркт миокарда (ИМ) передней стенки левого желудочка неосложненного течения (Killip I). Анамнез отягощен АГ, гиперхолестеролемией, стенокардией I функционального класса. ИМ и ОНМК в анамнезе отсутствуют. Сопутствующей патологии не выявлено. При исследовании лабораторных показателей на 1-е сутки выявлено: адипонектин - 10,2 мг/мл; грелин 20,8 нг/мл; интерлейкин 6 (ИЛ-6) - 6,1 пкг/мл; фактор некроза опухолей альфа (ФНО альфа) - 7,2 пкг/мл.

КЛДФ1=-3,877+0,095*10,2+0,246*20,8-0,025*6,1-0,053*7,2=1,6747.

С учетом того, что полученное значение КЛДФ1 больше чем 0,4545 (точки разделения между группами) и ближе к центроиду 1,47, сделан вывод, что у пациента отсутствует нарушенная тканевая чувствительность к инсулину.

В течение года после перенесенного острого инфаркта миокарда у пациента не было зафиксировано сердечно-сосудистых осложнений индексного ИМ.

Пример 2. Пациент Н., 53 года. Дата госпитализации 16.05.10. Диагноз при поступлении: Q-образующий ИМ передней стенки левого желудочка осложненного течения (Killip II). Анамнез отягощен АГ, курением, гиперхолестеролемией, стенокардией III функционального класса. ИМ и ОНМК в анамнезе отсутствуют. Семейный анамнез отягощен ИБС (ближайшие родственники). Сопутствующей патологии не выявлено. Лабораторные данные на 1-е сутки: адипонектин - 8,9 мг/мл; грелин 18,9 нг/мл; интерлейкин 6 (ИЛ-6) - 12,1 пкг/мл; фактор некроза опухолей альфа (ФНО альфа) - 12,7 пкг/мл.

Подставляем значения концентраций маркеров в уравнение:

КЛДФ1=-3,877+0,095*8,9+0,246*18,9-0,025*12,1-0,053*17,7=0,4091.

С учетом того, что полученное значение меньше чем 0,4545 (точки разделения между группами) и ближе к центроиду -0,561, у пациента №1 диагностируется ИР.

В течение года (18.04.11) была повторная госпитализация данного пациента по поводу приступа нестабильной стенокардии.

Способ выявления инсулинорезистентности у пациентов с острым инфарктом миокарда с элевацией сегмента ST в раннем госпитальном периоде, включающий исследование в крови пациента уровня инсулинемии, гликемии, свободных жирных кислот (СЖК), ретинолсвязывающего белка, фактора некроза опухоли альфа на первые сутки начала заболевания, отличающийся тем, что дополнительно оценивают уровень грелина и на основании полученных результатов рассчитывают линейную классификационную дискриминантную функцию (КЛДФ1-с) по формуле:
КЛДФ1-с=-3,877 + 0,095 Адп + 0,246 Грл - 0,025 ИЛ-6 - 0,053 ФНО, где АДП - концентрация адипонектина, Грл - уровень грелина, ИЛ-6 - значения интерлейкина -6, а ФНО - фактора некроза опухолей альфа, при этом вероятный риск развития инсулинорезистентности определяют при значениях КЛДФ1, максимально приближенных к центроиду соответствующего кластера (его значение равно -0,561) и меньших точки разделения кластеров 0,4545.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины и описывает способ диагностики нутриционной недостаточности при язвенном колите путем иммунологического исследования, при котором в сыворотке крови определяют уровень растворимых форм молекул адгезии sICAM-1, sICAM-2 и sICAM-3 и при легкой степени нутриционной недостаточности уровень лимфоцитов крови составляет 1500-1800·109/л и уровень sICAM-1 13,4-24,7 нг/мл, уровень sICAM-2 8,1-17 нг/мл и уровень sICAM-3 4,4-19 нг/мл; уровень IgG 650-500 мг/л; при умеренной степени нутриционной недостаточности уровень лимфоцитов крови составляет 900-1490·109/л и уровень sICAM-1 25-37,8 нг/мл, уровень sICAM-2 17,1-23,9 нг/мл и уровень sICAM-3 19,5-30,8 нг/мл, уровень IgG 950-1400 мг/л; при тяжелой степени нутриционной недостаточности уровень лимфоцитов крови составляет 890·109/л и менее, уровень sICAM-1 38-63 нг/мл, уровень sICAM-2 24-29 нг/мл и уровень sICAM-3 30,9-42,3 нг/мл; уровень IgG 1500-1800 мг/л.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования течения саркоидоза. Сущность способа состоит в том, что исследуют биоптат средней доли правого легкого.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242).

Изобретение относится к медицине, к хирургии, к онкологии и может быть использовано при дооперационном определении объема хирургического лечения высокодифференцированного рака щитовидной железы.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования высокого риска формирования хронической патологии адено-тонзиллярной системы у часто болеющих детей (ЧБД).
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования судорожного синдрома у детей с перинатальными поражениями ЦНС в раннем неонатальном периоде.
Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии и педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования развития детского церебрального паралича у недоношенных новорожденных с экстремально низкой массой тела при рождении.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к способу диагностики токсигенных штаммов Clostridium difficile. Сущность способа состоит в том, что пробу кала пациента выдерживают в абсолютном 96% спирте 30-60 мин при соотношении спирта и кала 1:1, центрифугируют 15-20 минут, далее обрабатывают пробу кала 1% раствором дезоксихолата натрия при соотношении 1:1 30-60 минут, центрифугируют, удаляют надосадочную жидкость, затем проводят первичный посев осадка на среде с добавлением 1% лактозы и 0,5-1,0 мМ арабинозы, инкубируют в анаэростате в течение 24-48 ч, выросшие колонии наносят на стандартные диски, пропитанные хромогенным субстратом - орто-нитрофенил-β-D-галактозидазой.

Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности к санитарной токсикологии, и может быть использовано для количественного определения бенз(а)пирена в крови, для оценки риска здоровью человека и разработки мероприятий по обеспечению химической безопасности.
Изобретение относится к области медицины, в частности к способу диагностики когнитивных нарушений у детей при воздействии марганца техногенного происхождения. Сущность способа: по результатам клинической диагностики и нейропсихологического тестирования устанавливают у ребенка наличие когнитивных нарушений.

Изобретение относится к микробиологии, а именно к способу микроскопического исследования нативного соскоба слизистой корня языка. Сущность способа состоит в том, что деревянным шпателем забирают 0,5 мл биоматериала из глубокого соскоба со слизистой на границе задней трети спинки и корня языка, готовят два мазка на двух предметных стеклах площадью 1,5-2,0 см2, мазки высушивают 20 минут, осуществляют фиксацию мазка жаром в пламени спиртовки непрерывно в течение 5-6 секунд, окрашивают сложным дифференциальным методом Грама, микроскопируют с иммерсией при объективе х100, просматривают не менее 10 полей зрения на каждом стекле, учитывая количественные и качественные характеристики микроорганизмов, клеток и ядер эпителия. Изобретение позволяет осуществить более точное исследование нативного соскоба c языка. 4 ил., 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования развития терминальной стадии у больных хроническим миелолейкозом. Сущность способа состоит в том, что в лимфоцитах периферической крови больных хроническим лейкозом в развернутой стадии определяют активность двух дегидрогеназ - глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ). При сочетании активности Г3ФДГ в пределах от 0 до 0,02 мкЕ и активности ЛДГ в пределах от 0,04 до 5,02 мкЕ прогнозируют возникновение терминальной стадии. Использование заявленного изобретения позволяет своевременно диагностировать прогрессирование заболевания, корректировать план и тактику лечения данной категории больных и улучшить результаты их реабилитации. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения гидроксибензола и его монометильных замещенных в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических и ветеринарных лабораторий. Способ осуществляется следующим образом: биологический объект, содержащий смесь гидроксибензола и его монометильных замещенных, измельчают, обрабатывают двукратно по 30 минут этилацетатом, этилацетатные вытяжки объединяют, обрабатывают этанольным раствором гидроксида калия, растворитель из объединенной этилацетатной вытяжки испаряют при 16-20°C, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, содержащим хлороводородную кислоту в избытке по отношению к гидроксиду калия, находящемуся в остатке, подкисленные ацетоновые извлечения объединяют, обрабатывают водным раствором гидроксида натрия для нейтрализации остатков хлороводородной кислоты в ацетоне и создания избытка щелочной среды, ацетон испаряют из объединенного извлечения, водно-щелочной остаток разбавляют водой, образующийся раствор подкисляют до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия, экстрагируют диэтиловым эфиром, экстракт обезвоживают, упаривают, хроматографируют в колонке с силикагелем с использованием подвижной фазы гексан-диэтиловый эфир в соотношении 6:4 по объему, фракции элюата, содержащие гидроксибензол и его монометильные замещенные, объединяют, экстрагируют буферным раствором с pH 12-13, водно-щелочной экстракт подкисляют 24% раствором хлороводородной кислоты до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия, экстрагируют дихлорметаном, дихлорметановый экстракт обезвоживают, анализируемые вещества, содержащиеся в дихлорметановом экстракте, переводят в соответствующие триметилсилильные производные, для чего дихлорметановый экстракт обрабатывают в течение 20 минут N-метил-N-триметилсилил-трифторацетамидом в условиях нагревания при температуре 60°C, и проводят качественное и количественное определение физико-химическим методом, которым является хромато-масс-спектрометрия, в капиллярной колонке длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 10 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя - 150°C, температура источника ионов - 230°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току, качественное определение анализируемого вещества осуществляют по времени удерживания, набору и интенсивности сигналов характеристических заряженных частиц в масс-спектре его триметилсилильного производного, а количество определяемого соединения вычисляют по площади хроматографического пика его триметилсилильного производного. Способ обеспечивает повышение чувствительности и сокращает продолжительность определения. 6 табл., 1 ил., 5 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частого развития острых респираторных вирусных инфекций в течение первого года жизни у доношенных новорожденных с внутриутробным гриппом A(H3N2). Сущность способа: при рождении у доношенных новорожденных определяют уровень противогриппозных антител в сыворотке крови из вены пуповины (А), концентрацию среднемолекулярных пептидов в плазме крови из вены пуповины (ед. опт. плот) (В), общее количество Т-лимфоцитов (CD3+) в баллах: 1 балл - CD3+ более 48%; 2 балла - CD3+ 47%-41%; 3 балла - CD3+ 40% и менее в венозной крови пуповины. Затем осуществляют прогноз частого развития острых респираторных вирусных инфекций с помощью дискриминантного уравнения: D=+0,008×А-111,694×В-1,537×С, где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 34,16. При D, равном или больше граничного значения, прогнозируют отсутствие развития частых острых респираторных вирусных инфекций в течение первого года жизни у доношенных новорожденных с внутриутробным гриппом A(H3N2). При D меньше граничного значения прогнозируют частое развитие острых респираторных вирусных инфекций в течение первого года жизни у доношенных новорожденных. Применение изобретения обеспечивает вероятность правильного прогноза частого развития острых респираторных вирусных инфекций в течение первого года жизни у доношенных новорожденных, составляющую 83,1%. 2 пр.

Изобретение относится к медицине и касается ранней диагностики инфекционных осложнений у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), получающих химиотерапию (XT). Предлагаемый способ заключается в том, что у больных ОЛЛ во время проведения XT 2-3 раза в неделю исследуют концентрацию фибриногена, время XIIa-зависимого эуглобулинового лизиса (XIIa-ЗЭЛ), уровень растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК), активность протеина C (прС). При выявлении хотя бы 2 из 4 критериев, а именно: повышении уровня фибриногена на ≥ 41%, РФМК - на ≥ 76%, удлинении времени XIIa-ЗЭЛ на ≥ 11% и снижении активности прС на ≥ 12% по сравнению с предыдущим исследованием, прогнозируют развитие инфекционных осложнений. Способ обеспечивает раннее прогнозирование развития инфекции у пациентов с ОЛЛ во время проведения XT. 7 табл., 4 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к способу анализа еx-vivo, будет ли больной раком субъект отвечать терапевтически на способ лечения. Для этого от пациента получают биологический образец, выбранный из группы, состоящей из образца общей крови, плазмы или сыворотки. Измеряют уровень IL10 и IFNγ в указанном биологическом образце, причем эти уровни определяются при использовании антител, специфических для IL10 и INFγ, соответственно. Проводят подсчеты соотношения IL10/IFNγ и сравнивают указанное соотношение IL10/IFNγ с пороговым уровнем. Соотношение IL10/IFNγ ниже 4 свидетельствует о том, что пациент будет развивать профилактический или терапевтический ответ на иммуногенную композицию. Группа изобретений относится также к применению IL10 и INFγ в качестве биомаркеров и набору для анализа вышеуказанного способа. Использование данного способа позволяет прогнозировать чувствительность больного раком к терапевтическому лечению, а также получить алгоритм для модификации лечения для улучшения ответа пациента на лечение. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики вагинита у женщин репродуктивного возраста. Во влагалищных соскобах измеряют уровни экспрессии мРНК генов TNF, IL18, GATA3 и TLR4. Определяют индексы отношений уровня экспрессии мРНК генов TLR4/GATA3 и TNF/IL18 и на основании значений пороговых циклов определяют вероятность вагинита по формуле. В случае если значение Р≤57% для небеременных женщин или Р≤68,5% для беременных женщин, делается заключение об отсутствии вагинита. Если значение Р≥57% для небеременных женщин или Р≥68,5% для беременных женщин, ставят диагноз вагинит. Изобретение обеспечивает эффективную диагностику вагинита у женщин репродуктивного возраста. 3 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для неинвазивной экспресс-диагностики воспалительного процесса в кишечнике у телят. Способ включает определение в кале лейкоцитов, белка, гемоглобина и pH-реакции кала. Пробу кала разводят в дистиллированной воде и наносят по капле на соответствующие тест-поля тест-полоски, предназначенной для анализа мочи. По изменению окраски в течение 1 минуты считают реакцию положительной. При pH менее 7,0 или более 7,5 и наличии в кале одновременно растворимого белка, гемоглобина и лейкоцитов диагностируют наличие воспалительного процесса в кишечнике. Заявленное изобретение позволяет быстро и точно диагностировать воспалительный процесс в кишечнике. 1 з.п. ф-лы, 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Проводят нейровизуализационное исследование головного мозга, определяют коэффициент коморбидности Cirs и коэффициент коморбидности Kaplan-Feinstein, выявляют кохлеовестибулярный синдром, глазодвигательные расстройства, тип сахарного диабета. Рассчитывают значение дискриминантной функции (D). При значении D больше нуля диагностируют последствия ишемического мозгового инстульта (ИМИ), перенесенного с гипергомоцистеинемией (ГГ), при D меньше нуля - последствия ИМИ, перенесенного без ГГ. Способ позволяет повысить достоверность диагностики последствий ИМИ, что достигается за счет комплексного анализа указанных выше показателей. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам диагностики и может быть использовано для диагностики угрозы оценки формирования анемии на третьем триместре беременности вследствие снижения процессов оксигенации гемоглобина при обострении цитомегаловирусной инфекции. Способ включает определение титра антител к цитомегаловирусу, содержания в эритроцитах 2,3 ДФГ (2,3-дифосфоглицерата), оксигемоглобина. При увеличении титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, нарастании 2,3 ДФГ до 6,7±0,3 мкмоль/мл, содержании HbO2 95,0±1,7%, при снижении удельной оптической плотности гемоглобина до 0,70±0,01 делают вывод о формировании угрозы развития анемии. Способ позволяет изучить характер нарушения оксигенации гемоглобина с помощью определения удельной оптической плотности.
Наверх