Способ диагностики преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для диагностики преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией в сроки 24-37 недель. Изобретение представляет способ диагностики преэклампсии у беременных женщин с хронической артериальной гипертензией, включающий иммунологическое исследование периферической венозной крови в 24-37 недель беременности, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов и при его значении, равном или более 73, диагностируют присоединение преэклампсии. Изобретение обеспечивает повышение точности и упрощение определения преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для диагностики преэклампсии у беременных женщин с хронической артериальной гипертензией в сроки гестации 24-37 недель.

Актуальность проблемы вызвана необходимостью поиска критериев присоединения преэклампсии у женщин с хронической артериальной гипертензией для разработки адекватной тактики ведения беременных женщин с гипертензивными расстройствами.

Сложности диагностики преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией могут определяться несколькими причинами. В ряде случаев на фоне исходно высокого артериального давления клинически не всегда удается отметить начало развития преэклампсии, когда еще отсутствует протеинурия и церебральная симптоматика и лишь периодически отмечается нестабильность артериального давления и недостаточный эффект гипотензивной терапии. С другой стороны, снижение артериального давления на протяжении первого и второго триместра на фоне гипотензивной терапии либо за счет физиологических изменений сердечно-сосудистой системы при беременности могут приводить к тому, что уровень артериального давления у многих женщин с хронической гипертензией остается в пределах нормальных значений, создавая впечатление о благоприятном течении беременности.

Поэтому одной из главных задач в определении тактики ведения и своевременного начала лечения преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией является выявление дополнительных диагностических критериев данного осложнения беременности.

В настоящее время существуют методы, позволяющие осуществлять диагностику преэклампсии. Однако большинство из них не учитывают наличие у беременной женщины хронической артериальной гипертензии.

Известен способ диагностики преэклампсии на основе определения концентрации гормонов лептина и грелина в венозной крови методом иммуноферментного анализа (RU 2476880 C1, Шкурат Т.П. и др., 27.02.2013). При увеличении концентрации гормона лептина в сыворотке крови более 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации гормона грелина в плазме крови ниже 0,26 нг/мл диагностируют гестоз тяжелой степени. Недостатком метода является то, что возможна диагностика преэклампсии только тяжелой степени. Кроме того, повышение уровня лептина может быть ассоциировано с наличием ожирения, метаболического синдрома, сахарного диабета и эссенциальной артериальной гипертензии (Тендерные особенности концентрации лептина и внутрипочечной гемодинамики у больных эссенциальной артериальной гипертензией и ожирением. / В.И. Подзолков, А.Е. Брагина, Ю.Н. Родионова // Системные гипертензии. - 2011. - №2. - С. 42-46), что может способствовать гипердиагностике преэклампсии.

Имеется способ диагностики гестоза путем определения уровня альфа-амилазы в сыворотке крови количественным методом (RU 2426129 C1, Гребенкин Б.Е. и др., 10.08.2011). При уровне альфа-амилазы 28-100 Ед./л диагностируют нетяжелый гестоз. При уровне альфа-амилазы >100 Ед./л устанавливают гестоз тяжелой степени. К недостаткам способа следует отнести возможность получения высоких значений альфа-амилазы и, следовательно, ложноположительного результата при наличии заболеваний поджелудочной железы, а также невозможность проведения дифференциальной диагностики гипертензивных расстройств у беременных.

Существует способ дифференциальной диагностики артериальной гипертензии при беременности (RU 2429784 C1, И.Б. Фаткуллина и др., 27.09.2011). Этот способ позволяет диагностировать гипертензию, связанную с беременностью, и хроническую артериальную гипертензию при исследовании ряда функциональных и лабораторных показателей в третьем триместре беременности. С этой целью у беременных в 3 триместре определяют следующие показатели: X1 - рост в см; Х2 - индекс резистентности в правой маточной артерии; Х3 - индекс резистентности в левой маточной артерии; Х4 - содержание общего белка крови в г/л; Х5 -уровень креатинина плазмы крови в мкмоль/л; Х6 - уровень щелочной фосфатазы плазмы крови в Е/л; Х7 - количество тромбоцитов в периферической крови на 109/л; Х8 - концентрация растворимых фибринмономерных комплексов в крови в мг/100 мл; Х9 - индекс измерений систолического артериального давления в ночное время в %; Х10 - величина утреннего подъема диастолического артериального давления в мм рт.ст. Далее рассчитывают диагностические коэффициенты F1 и F2 по формулам. При значениях F1 больше F2 диагностируют гипертензию, связанную с беременностью, при F2 больше F1 - хроническую артериальную гипертензию.

Недостатками способа являются: значительная вариабильность ряда параметров, используемых при расчете диагностических коэффициентов; изменение ряда показателей, используемых при расчете диагностических коэффициентов (общий белок, креатинин), отмечается в основном при тяжелых формах гестоза (Айламазян Э.К., Мозговая Е.В. Гестоз: теория и практика. - М.: МЕДпресс-информ, 2008. - 272 с.; Артериальная гипертония беременных: механизмы формирования, профилактика, подходы к лечению / А.Л. Верткин, Л.Е. Мурашко, О.Н. Ткачева, И.В. Тумбаев // Российский кардиологический журнал. - 2003. - №6. - С. 59-65), что может определять снижение чувствительности предлагаемого способа при выявлении легких и средних форм заболевания; проведение суточного мониторинга АД отсрочивает правильную постановку диагноза; способ чрезвычайно трудоемок - требует определения 10 показателей и трудозатрат 4 врачей (двух врачей-лаборантов, врача функциональной диагностики, врача ультразвуковой диагностики), что значительно повышает себестоимость исследования.

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является «Способ диагностики преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией» (Патент РФ №2483311. Способ диагностики преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией / Макаров О.В., Богатырев Ю.А., Осипова Н.А. // Изобретения. Полезные модели. - 2013. - №15). Указанный способ выбран в качестве прототипа. Он позволяет диагностировать преэклампсию у беременных с хронической артериальной гипертензией в сроки 24-40 недель. С этой целью у беременных с помощью твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови определяют содержание аутоантител класса IgG к двуспиральной ДНК, антигенам мембран тромбоцитов TrM-001-15 и TrM-015-12, антигенам почечной ткани KiM-05-300 и KiS-07-120 и антигену митохондрий печени НММР. Для каждого вида исследованных антител определяют соотношение аутоантител в опытной сыворотке к контрольной сыворотке. При показателе, меньшем или равном 0,55 по меньшей мере для трех видов аутоантител, один из которых относится к антителам к почечной ткани, а другой - к двуспиральной ДНК, диагностируют преэклампсию. Недостатками способа-прототипа являются: необходимость исследования 6 показателей; диагностическая значимость возможна при изменении уровня по меньшей мере трех видов аутоантител; присутствие этих антител так же может быть специфично для многих аутоиммунных заболеваний - диффузных болезней соединительной ткани (Possible novel biomarkers of organ involvement in systemic lupus erythematosus / D. Su, R. Liu, X. Li, L. Sun // Clin Rheumatol. - 2014 Mar 6.), аутоиммунной тромбоцитопении (McMillan R., Imbach P.A. Immune thrombocytopenic purpura. In: Loscaizo J., Schafer A.I., eds. Thrombosis and Hemorrhage. Boston: Blackwell Scientific; 1994:575-95.), гломерулонефритов и пиелонефритов (Мальцев C.B. Роль аутоиммунных нарушений в патологии человека / Мальцев C.B., Мансурова Г.Ш. // практическая медицина. - 2010. - №6. - с. 7-13) аутоиммунных поражений и хронических заболеваний печени (Primary biliary cirrhosis: a multi-faced interactive disease involving genetics, environment and the immune response / R. Uibo, C.Y. Yang; K.E. Kisand; M.E. Gershwin // APMIS: acta pathologica, microbiologica, et immunologica Scandinavica. - 2012; 120(11):857-871.); кроме того в тексте не приводятся данные о чувствительности и специфичности этого способа диагностики, не известна точность способа.

Техническим результатом патентуемого способа является повышение точности, расширение арсенала диагностических средств и упрощение определения преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией.

Заявляемый технический результат достигается тем, что у беременных с хронической артериальной гипертензией в сроки гестации 24-37 недель в периферической венозной крови определяют показатель относительного содержания CD49b+клеток в популяции нейтрофилов. При значении показателя равном или более 73% у беременной диагностируют присоединение преэклампсии.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается диагностировать преэклампсию у беременных с хронической артериальной гипертензией по определению в периферической венозной крови беременной женщины относительного содержания CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов.

В литературе имеются данные об экспресии молекул CD49b различными клетками при хроническом гепатите С (CD49b, a major marker of regulatory t-cells type 1, predicts the response to antiviral therapy of recurrent hepatitis С after liver transplantation / Fabien S. [et al.] // Biomed Res Int. Epub 2014 Jan 19), миелодиспластическом синдроме (Serine protease inhibitor kunitz-type 2 is downregulated in myelodysplastic syndromes and modulates cell-cell adhesion / Roversi F.M. [et al.] // Stem Cells Dev. 2014 Feb 18), раке молочной железы (Martin, T.A. Evaluation of the expression of stem cell markers in human breast cancer reveals a correlation with clinical progression and metastatic disease in ductal carcinoma / Martin T.A., Jiang W.G. // Oncol Rep.Epub 2013 Oct 24). Однако при преэклампсии показатель содержания CD49b+ нейтрофилов ранее не изучался.

Исследованиями последних лет было установлено, что в основе иммунных механизмов хронической артериальной гипертензии лежит накопление Т-клеток, В-клеток и макрофагов в адвентиции и периваскулярной жировой ткани сосудов в результате процесса экстравазации (Harrison D.G., Marvar P.J., Titzel J.M. / Vascular inflammatory cells in hypertension // Frontiers Physiology. - 2012 May 7;3:128.). Патологические эффекты этих клеток при гипертензии определяются продукцией реактивных форм кислорода и цитокинов, что приводит к повреждению эндотелиоцитов (Sprague А.Н., Khalil R.A. Inflammatory Cytokines in Vascular Dysfunction and Vascular Disease // Biochem Pharmacol. 2009 September 15; 78(6): 539-552.).

Роль нейтрофилов в патогенезе гипертензии в настоящее время остается не ясной. Экспрессия интегрина CD49b является критической для процесса экстравазации полиморфноядерных нейтрофилов и их мобилизации в ткани, окружающие сосуды (Integrin alpha(2)beta(1) (VLA-2) is a principal receptor used by neutrophils for locomotion in extravascular tissue / Werr J., Johansson J., Eriksson E.E., Hedqvist P., Ruoslahti E., Lindbom L. // Blood. - 2000). Молекулы CD49b экспрессируются только на поздних этапах активации нейтрофилов. Высокий уровень CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов у женщин с хронической артериальной гипертензией при присоединении преэклампсии может быть обусловлен длительным характером активации иммунной системы матери факторами плодово-плацентарного происхождения, что вызывает усиление экспрессии данных адгезионных молекул нейтрофилами.

Способ осуществляется следующим образом:

1) У беременной женщины однократно производят забор венозной крови из локтевой вены, 100 мкл гепаринизированной венозной крови инкубируют с 5 мкл моноклональных анти-CD49b, меченных FITC в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего лизируют эритроциты стандартными растворами фирм-производителей (OptiLyse В, Beckman Coulter; FACS Lysing Solution, BD Biosciences и др.). Клетки отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут и ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя относительное содержание CD49b+ клеток в нейтрофильном гейте. Результат читается в процентах (%). Время проведения исследования составляет 1 час.

Использование предлагаемого способа позволяет с высокой точностью - 90,2%, чувствительностью - 88,2%, специфичностью - 91,7% определить присоединение преэклампсии у беременных с хронической артериальной гипертензией.

Отличительными признаками способа являются:

- выявлен пограничный критерий относительного содержания CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов, при значении которого равном или более 73% диагностируют присоединение преэклампсии.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Женщина Р. 42 лет, беременность 37 недель, на приеме у врача в женской консультации. В соматическом анамнезе - наличие хронической артериальной гипертензии в течение последних 5 лет, хронический пиелонефрит. Исходное артериальное давление при постановке на учет - 140/100 мм рт.ст., получает гипотензивную терапию (допегит), на фоне которой артериальное давление в пределах 130/80-140/90 мм рт.ст. При осмотре артериальное давление 140/100 мм рт.ст., в общем анализе мочи - протеинурия 0,3 г/л. При обследовании заявленным способом было установлено, что показатель содержания CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов составил 73%. В данном случае диагностирована преэклампсия на фоне хронической артериальной гипертензии. Женщина направлена в стационар, где была назначена комбинированная гипотензивная терапия, магнезиальная терапия. На вторые сутки - артериальное давление в пределах 130/80-140/90 мм. рт.ст., суточная протеинурия 0,6 г/л. При ультразвуковом исследовании - признаки плацентарной недостаточности, задержки развития плода, по данным кардиотокографии - снижение компенсаторных возможностей плода. В динамике на фоне лечения - нарастание протеинурии. Учитывая наличие преэклампсии, отсутствие эффекта проводимой терапии и внутриутробное страдание плода, принято решение о подготовке беременной к досрочному родоразрешению.

Пример 2. Женщина Г. 38 лет, беременность 24 недели. Поступила в отделение патологии беременности. Страдает гипертонической болезнью в течение 8 лет. При беременности АД в пределах 130/90-140/90 мм рт.ст., у терапевта и кардиолога не наблюдалась, гипотензивная терапия не проводилась. При поступлении - артериальное давление 150/100 мм рт.ст., в моче - следы белка. При обследовании заявленным способом было установлено, что показатель содержания CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов составил 42%, диагностирована хроническая артериальная гипертензия. Беременной была назначена гипотензивная терапия (допегит). За время наблюдения артериальное давление стабилизировалось на значениях 120/80-130/90 мм рт.ст., протеинурия в динамике не выявлена, состояние плода по данным дополнительного обследования - удовлетворительное. Беременность пролонгирована, женщина выписана под динамическое диспансерное наблюдение в стабильном удовлетворительном состоянии.

Пример 3. Пациентка К., 31 год, беременность 32 недели. Поступила в акушерский стационар с жалобами на высокое артериальное давление. Периодическое повышение артериального давления отмечает с 17 лет (до 150/100 мм рт.ст.), постоянной терапии вне беременности не получала. При беременности с ранних сроков периодически отмечается повышение артериального давления до 150/110 мм рт.ст., гипотензивные препараты принимала только при высоких значениях артериального давления. При поступлении - артериальное давление - 150/100 мм рт.ст., протеинурия в разовой порции мочи - 0,066 г/л. При обследовании заявленным способом было установлено, что показатель содержания CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов составил 80,5%. В данном случае диагностирована преэклампсия на фоне хронической артериальной гипертензии. Женщине назначена комбинированная гипотензивная терапия, магнезиальная терапия, начата профилактика респираторного дистресс-синдрома плода. На фоне лечения сохранялось высокое артериальное давление, нарастала протеинурия, по данным кардиотокографии и допплеровского исследования отмечено ухудшение состояния плода. В связи с отсутствием эффекта от проводимой терапии и ухудшением внутриутробного состояния плода принято решение о досрочном родоразрешении.

Указанным способом проведено обследование 41 беременной женщины с хронической артериальной гипертензией. У 24 из обследованных женщин содержание CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов было равно или более 73%, что соответствовало диагностическому критерию преэклампсии на фоне хронической артериальной гипертензии. При этом ложноположительный результат получен в 2 случаях из 24. У 17 женщин содержание CD49b+ нейтрофилов было менее 73%, что соответствовало отсутствию преэклампсии при наличии хронической артериальной гипертензии; у 2 женщин из 17 при обследовании был получен ложноотрицательный результат.

Точность диагностики преэклампсии у женщин с хронической артериальной гипертензией составила 90,2%, чувствительность - 88,2%, специфичность - 91,7%.

Данные исследований приведены в таблице 1.

Преимущества заявляемого способа:

1. высокая точность, чувствительность и специфичность;

2. небольшой временной интервал выполнения исследования;

3. простота и доступность выполнения методики;

4. экономическая эффективность по расходу реактивов и трудозатратам специалистов.

Способ диагностики преэклампсии у беременных женщин с хронической артериальной гипертензией, включающий иммунологическое исследование периферической венозной крови в 24-37 недель беременности, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD49b+ клеток в популяции нейтрофилов и при его значении, равном или более 73%, диагностируют присоединение преэклампсии.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для оценки риска развития атрофического гастрита у европеоидов Хакасии. Для этого определяют концентрацию IL-2, уровень ФГА-индуцированной продукции IL-8, фагоцитарное число нейтрофилов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии и эндокринологии, и описывает способ диагностики воспаления в жировой ткани при ожирении. Способ характеризуется тем, что в сыворотке венозной крови пациентов с помощью твердофазного иммуноферментного метода (ELISA) определяют концентрацию неоптерина и при концентрации неоптерина более либо равной 10 нмоль/л диагностируют воспаление жировой ткани.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для выявления дисплазии эпителия слизистой оболочки желудка у пациентов с атрофическим гастритом или с аденомой желудка.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и предназначено для прогнозирования эффективности терапии детей с хроническим вирусным гепатитом В. Для этого до начала лечения производят забор периферической венозной крови.
Изобретение относится к медицине, кардиологии, аритмологии и предназначено для прогнозирования развития нарушений ритма сердца у пациентов с синдромами предэкзитации желудочков.

Изобретение относится к области компьютерной медицины. Предложен способ поддержки принятия клинического решения, где в компьютерный механизм принятия решений вводят данные, указывающие группу носителей аллергена и значения носителя аллергена, которые получают путем количественного определения антител IgE в биологической жидкости; идентификации носителей с помощью предварительно определенной структуры, представляющей известные взаимосвязи между антителами IgE и носителями аллергена, где по меньшей мере один носитель аллергена ассоциирован с множеством антител IgE; и присваивания значений носителям аллергенов на основании результатов теста антител IgE.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к набору для детекции спор, происходящих из микобактерий в образце. Набор содержит антитело, которое специфически связывает относящийся к спорам пептид из микобактерий, где относящийся к спорам пептид из микобактерий выбран из группы, состоящей из CotA, CotD, CotT, SpoVK, CotSA, YrbC, SpoVE, Soj, SpoIIIE и SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 22, 24 и 26, где указанное антитело получают иммунизацией человека или организма, не являющегося человеком, указанным относящимся к спорам пептидом.

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим методам клинической диагностики, и описывает способ прогнозирования эффективности лечения при алкогольном гепатите в стадии обострения, где до начала лечения у пациента в сыворотке крови определяют активность гамма-глутамилтранспептидазы (ГГП) и концентрацию восстановленного глутатиона (GSH), рассчитывают глутатион-гамма-глутамилтранспептидазный (GγГ) коэффициент по формуле: G γ Г = Е г г п C G S H где Еггп - активность гамма-глутамилтранспептидазы (мккат/л), a CGSH - концентрация восстановленного глутатиона (ммоль/л); и при значении коэффициента более 7,80 устанавливают обострение течения хронического алкогольного гепатита, экстренно госпитализируют и назначают комплексную терапию; через 10 дней от начала лечения повторно определяют коэффициент GγГ, и в случае его снижения до 1,72 делают вывод о нормализации функционирования антиоксидантной системы и уменьшении гибели клеток печени, что позволяет продолжить лечение в условиях поликлиники, в случае значения коэффициента GγГ выше 1,72 следует продолжить лечение в условиях стационара, под строгим контролем клинических и лабораторных показателей.

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для лечения пациентов с сочетанной травмой носа и черепно-мозговой травмой в первые сутки после травмы.

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству. Изобретение представляет способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем определения в периферической венозной крови иммунокомпетентных клеток в сроке беременности 22-33 недели, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD46+ моноцитов, и при его значении равном или менее 51,7%, прогнозируют преждевременные роды. Изобретение обеспечивает повышение точности и специфичности способа прогнозирования исхода беременности. 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития иммунных нарушений у пациентов, проживающих на территориях с повышенным содержанием стронция в окружающей среде. Для этого производят отбор пробы крови у пациентов с территории с повышенным содержанием стронция в объектах окружающей среды. В указанной пробе определяют содержание стронция в пробе крови пациентов, с содержанием стронция выше фонового значения, определяют содержание лимфоцитов CD8+ . Далее выделенную фракцию лимфоцитов CD8+ делят на две части, одну из которых подвергают инкубации со стронцием, а вторую оставляют в качестве контрольной, причем инкубацию осуществляют путем введения в пробу CD8+ 10 мг/л стронция. Затем определяют в обеих пробах лимфоцитов CD8+ количество рибонуклеиновой кислоты РНК путем выделения ее из сепарированных клеток CD8+, проводят реакцию обратной транскрипции РНК в дезоксирибонуклеиновую кислоту ДНК, в которой определяют количество гена дефензина альфа, причем при этом определении в качестве внутреннего контроля используют ген домашнего хозяйства GAPDH. Далее рассчитывают уровень относительной экспрессии гена дефензина альфа, принимая за спонтанную экспрессию уровень, относящийся к контрольной пробе CD8+, а за индуцированную экспрессию - уровень, относящийся к пробе CD8+, в которую введен стронций. И по индексу экспрессии, который равен отношению индуцированной экспрессии к спонтанной, судят об иммунных нарушениях у пациента, связанных с воздействием стронция. Причем при указанном индексе меньше 0,7 прогнозируют развитие иммунодефицитного состояния, а при индексе более 3 - развитие пролиферативного статуса в иммунной системе, при условии одновременного обнаружения у пациента превышения содержания стронция в крови более чем в 1,5 раза, по сравнению с фоновым. Использование данного способа позволяет обеспечить прогнозирование иммунных нарушений, ассоциированных с воздействием стронция, за счет использования иммуногенетических критериев. 2 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для диагностических исследований. Группа изобретений характеризует автоматическую систему количественной амплификации в реальном времени, способ автоматической очистки нуклеиновой кислоты и количественного определения амплификации гена с использованием указанной системы, способ автоматического измерения количества жизнеспособных клеток патогенных бактерий, анализа патогенных бактерий на чувствительность к антибиотикам и автоматического получения антигенной плотности с использованием указанной системы, а также способ очистки связывающей нуклеиновой кислоты-мишени, которой мечен антиген-мишень, содержащийся в биологическом образце, с использованием указанной автоматической системы. Группа изобретений обеспечивает возможность автоматической обработки большого количества образцов за короткий период времени, а также позволяет проводить разнообразные медико-биологические анализы в одной системе. 7 н. и 52 з.п. ф-лы, 48 ил.

Изобретение относится к области иммунологии и медицины. Предложено пептидное производное для выработки в организме специфических антител, взаимодействующих с изоформой 2 фактора элонгации трансляции 1A (eEF1A2), но не взаимодействующих с изоформой 1 фактора элонгации трансляции 1A (eEF1A1), содержащее фрагмент аминокислотной последовательности eEF1A2 с 330 по 343 положения. Также рассмотрены основанный на использовании пептидного производного по изобретению способ выработки в организме животного моноспецифичных антител, взаимодействующих с eEF1A2, но не с eEF1A1, и его применение для аффинной очистки таких моноспецифических антител. Изобретение может быть использовано с целью разработки иммунотест-систем для выявления в биологических образцах клеток с измененным биохимическим аппаратом контроля запрограммированной гибели (апоптоза), способных к злокачественному перерождению и образованию злокачественной опухоли. 3 н.п. ф-лы, 9 ил., 10 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к внутренним болезням, а именно гепатологии, и может быть использовано для проведения неинвазивной диагностики цирротической стадии хронического вирусного гепатита С (ХГС). В периферической крови пациента с хроническим вирусным гепатитом С определяют абсолютное количество клеток Т-киллеров с фенотипом CD3+CD8+ и при их значении, равном или ниже 295/л, диагностируют цирротическую стадию (F IV по METAVIR). Изобретение обеспечивает повышение чувствительности способа диагностики цирротической стадии хронического вирусного гепатита С (F IV по METAVIR), снижение стоимости способа, а также расширение контингента пациентов при выполнении способа за счет пациентов с индексом массы тела более 30 кг/м2, с наличием узких межреберных промежутков, наличием асцита и желчнокаменной болезни. 1 ил., 4 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и может быть использовано для прогнозирования течения иммунной тромбоцитопении (ИТП) после спленэктомии. Для этого после удаления селезенки определяют ее массу, морфометрически в гистологических срезах лимфоидного органа после ИГХ окрашивания подсчитывают количество CD8+ T-лимфоцитов. Вычисляют их массу по формуле: M=m × D/100%, где M - масса CD8+ T-лимфоцитов (г), m - масса селезенки (г), D - количество CD8+ T-лимфоцитов, %. При значениях CD8+ T-лимфоцитов ≥9,75 г прогнозируют рефрактерную форму течения ИТП, а при <9,75 г констатируют вариант ИТП с благоприятным течением заболевания после спленэктомии. Использование данного способа позволяет прогнозировать течение ИТП после спленэктомии и проводить дифференцированный подход при назначении терапии. 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному антителу, которое специфически связывается с TAT211, или его функциональному фрагменту. Также раскрыты конъюгат, содержащий указанное антитело и который специфически связывает TAT211, нуклеиновая кислота, кодирующая заявленное антитело, и клетка, которая продуцирует заявленное антитело. Раскрыты способ идентификации антитела, способ ингибирования роста клетки, которая экспрессирует полипептид TAT211, способ терапевтического лечения млекопитающего, имеющего раковую опухоль, содержащую клетки, которые экспрессируют полипептид TAT211, способ определения присутствия TAT211 белка в образце и способ диагностики присутствия опухоли у млекопитающего. Изобретение обладает способностью специфически связываться с TAT211, что позволяет эффективно лечить заболевания, ассоциированные с экспрессией полипептида TAT211. 15 н. и 22 з.п. ф-лы, 19 ил., 1 табл., 16 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности гепатологии, и может быть использовано для прогнозирования быстрого вирусологического ответа на терапию пегилированным интерфероном α и рибавирином у больных хроническим гепатитом C. Для этого определяют аллельный вариант гена ИЛ-28В и проводят иммунологическое исследование. При наличии аллели rs12979860CC/rs8099917TT рассчитывают коэффициент иммунопрогнозирования 1 (КИП-1) по формуле: КИП-1=2,774-0,833*[CD3+]-0,016*[CD4+]-0,063*[CD8+]-0,525*[CD19+], где [CD3+] - абсолютное содержание CD3+ клеток в 1 л крови, [CD4+] - абсолютное содержание CD3+/CD4+ клеток в 1 л крови, [CD8+] - абсолютное содержание CD3+/CD8+ клеток в 1 л крови, [CD19+] - абсолютное содержание CD19+ клеток в 1 л крови. При величине КИП-1 ≤1,5 прогнозируют развитие быстрого вирусологического ответа на стандартную терапию, а >1,5 - его отсутствие. При наличии любого другого аллельного варианта рассчитывают КИП-2 по формуле: КИП2=3,994+0,014*[CD56+/ki-67+]-0,408*[CD25hi]-0,69*[CD25hi/FoxP3+], где [CD56+/ki-67+] - % CD16+/CD56+/ki-67+ клеток среди лимфоцитов крови, [CD25hi] - % CD3+/CD25high клеток среди лимфоцитов крови, [CD25hi/FoxP3+] - % CD3+/CD25high/FoxP3+ клеток среди лимфоцитов крови. При величине КИП-2 ≤3,0 прогнозируют развитие быстрого вирусологического ответа на стандартную терапию, а >3,0 - его отсутствие. Использование данного способа позволяет выявить по разным аллельным вариантам гена ИЛ-28В различные сдвиги иммунограмм и дает возможность прогнозировать наличие или отсутствие быстрого вирусологического ответа. 5 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине и описывает способ удаления CO2 из содержащей мочевину пробы плазмы, содержащий следующие стадии: a) получение пробы плазмы, b) добавление кислоты, чтобы частично удалить CO2, c) лиофилизация пробы, чтобы дополнительно удалить CO2 и получить сухую пробу, d) повторное растворение высушенной пробы и нейтрализация буферным раствором до значения pH 4-7. Данный способ позволяет более точно определить долю изотопа 13С в мочевине в первой пробе плазмы для дальнейшей диагностики мочевинного обмена. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 6 ил., 7 пр.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, а именно к определению наличия антител к бактериальным антигенам в сыворотке крови животных. Для этого антиген смешивают с тестируемой сывороткой крови в различных разведениях в лунках микропланшета с V-образным дном с последующей визуализацией результатов реакции агглютинации с использованием источника ультрафиолетового излучения, преимущественно трансиллюминатора. В качестве антигена используют флюоресцентно-меченую суспензию инактивированных бактериальных клеток, которую получают при обработке бактериальных клеток 1,0% водным раствором флюоресцентного красителя, выбранного из группы: бромистый этидий, пропидия иодид, акридиновый оранжевый. Изобретение позволяет упростить проведение иммуноферментного анализа для определения наличия различных патогенных микроорганизмов и автоматизировать учет результатов. 2 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр.
Наверх