(4-фтор-бензил)-этил-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амин и способ его получения
Владельцы патента RU 2570896:
Общество с ограниченной ответственностью "Химико-фармацевтические технологии" (ООО "ХимФармТех") (RU)
Изобретение относится к соединению формулы (I), обладающему противоинфекционной активностью
и к его способу получения. Технический результат: получено новое соединение, обладающее высокой противоинфекционной активностью. 2 н.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к синтетическим биологически активным веществам гетероциклического ряда, обладающим противоинфекционной активностью, и представляет собой новое соединение (4-фтор-бензил)-этил-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амин. Изобретение может быть использовано при лечении заболеваний, вызванных инфекциями, а также для аналогичных целей в ветеринарии.
Известно, что структуры, содержащие аминофенил-1-тетразол, описываются как вещества, обладающие различного рода физиологической активностью: противогрибковой [Т. Ichikawa, М. Yamada, М. Yamaguchi, and others. Chem. Pharm. Bull., 2001, vol. 49, Issue 9, p.1110-1119)], антибактериальной [К. Kariyone, H. Harada, M. Kurita, T. Takano. J. Antibiot, 1970, vol. 23, Issue 3, p.131-136; Genin M.J., Allwine D.A., Anderson D.J. and others. J. Med. Chem., 2000, vol. 43, issue 5, p.953-970], противоопухолевой [W.V Curran., A.S Tomcufcik. US Pat. 4010179. 1977. Chem. Abstr. 1977. V. 87. P. 23287]. Однако данные вещества характеризуются недостаточно широким спектром действия. Кроме того, имеет место формирование устойчивости и снижение чувствительности штаммов возбудителей инфекции к действию данных веществ.
Задача изобретения состоит в создании полностью синтетического биологически активного вещества с высокой противоинфекционной активностью и широким спектром действия для разработки на его основе активной фармацевтической субстанции, являющейся исходным сырьем для высокоэффективного противоинфекционного препарата, к которому отсутствует резистентность возбудителей инфекции.
Поставленная задача решается путем синтеза противоинфекционного вещества, эффективно действующего на микроорганизмы, находящиеся в клетках человека, обозначенного формулой (I).
Заявляемое вещество, обозначенное формулой (I), может применяться в виде нейтральной формы или в виде фармакологически приемлемых солей (хлоридов, фосфатов, сульфатов, формиатов, ацетатов, оксалатов, сульфаматов).
Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о методах синтеза веществ, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «Новизна».
Способ получения соединения формулы (I) (Схема 1), включает этапы:
1) циклизация 2-нитроанилина (II) с азидом натрия и триэтилортоформиатом в среде уксусной кислоты;
2) восстановление нитрогруппы 2-нитрофенил-1Н-тетразола (III);
3) восстановительное аминирование 2-тетразол-1-ил-фениламина (IV) 4-фтор-бензальдегидом;
4) алкилирование (4-фтор-бензил)-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина (V) бромистым этилом.
Сущность изобретения поясняется приведенными ниже примерами синтеза промежуточных и заявляемого вещества, физико-химическими характеристиками заявляемого вещества (примеры 1-4), противоинфекционной активностью вещества (Таблица 3).
Пример 1. Вариант выполнения 1-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение 2-нитрофенил-1Н-тетразола).
К нагретой до 50-60°C суспензии 0,05 моль 2-нитро-фениламина (II) и 0,05 азида натрия в 0,25 моль триэтилортоформиата быстро добавляют при перемешивании 0,5 моль уксусной кислоты и выдерживают 10 ч при температуре кипения. Выпавший в ходе реакции осадок фильтруют, перекристаллизовывают из смеси вода - пропанол-2 и сушат на воздухе. Выход продукта составляет 94%.
Пример 2. Вариант выполнения 2-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение 2-тетразол-1-ил-фениламина).
7,0 г Никель-алюминиевого сплава взмучивают в 100 мл воды и без охлаждения смешивают с 13,5 г гидроксида натрия. После окончания индукционного периода смесь нагревают 30 минут при 70°C. Губчатый осадок отделяют от раствора декантированием и промывают водой, а затем этанолом.
Раствор 0,15 моль 2-нитрофенил-1Н-тетразола (III) и 0,37 моль гидразингидрата в 300 мл 95%-ного этанола нагревают до 30-40°C. Суспензию приготовленного никеля Ренея по 30 мл прибавляют порциями в этаноле. По окончании смесь кипятят 3 часа с обратным холодильником. Затем реакционную смесь фильтруют, фильтрат испаряют досуха и остаток перекристаллизовывают из смеси вода - пропанол-2 и сушат на воздухе. Выход продукта составляет 98%.
Пример 3. Вариант выполнения 3-го этапа синтеза заявляемого вещества (получение (4-фтор-бензил)-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина).
Используется установка для гидрирования с бюреткой для водорода, трехходовой кран и вакуумная насадка.
В двухгорлую колбу на 250 мл с перегородкой и насадкой для пропускания газа помещают 200 мг 5% Pd/C в 150 мл безводного метанола. Установку трижды вакуумируют и заполняют водородом. Затем при интенсивном перемешивании реакционную смесь насыщают водородом до прекращения поглощения газа (примерно 30 мин), прибавляют 0.05 моль 4-фтор-бензальдегида и 0.05 моль 2-нитрофенил-1Н-тетразола (IV), фиксируют объем газа в бюретке и энергично перемешивают смесь при комнатной температуре. После поглощения рассчитанного количества водорода (1,12 л, ~6 ч) катализатор отфильтровывают, фильтрат испаряют досуха и остаток перекристаллизовывают из смеси вода - пропанол-2 и сушат на воздухе. Выход продукта составляет 98%
Пример 4. Вариант выполнения 4-го этапа синтеза заявляемых веществ (получение (4-фтор-бензил)-этил-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина).
К раствору 0.005 моль (4-фтор-бензил)-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина (V) в 50 мл бензола дозируют 0.005 моль бромистого этила и 0.005 моль триэтиламина. Реакционную массу нагревают 4 часа при температуре кипения. Растворитель отгоняют под вакуумом, остаток перекристаллизовывают из смеси вода - пропанол-2 и сушат на воздухе. Выход продукта составляет 96%.
Противоинфекционная активность (4-фторбензил)-этил-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина.
Определение чувствительности микроорганизмов к (4-фторбензил)-этил-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амину (соединения формулы (I)) проводят методом серийных разведений его в жидких или плотных средах. Критериями антимикробной активности (I) является минимальная ингибирующая концентрация (МИК).
В качестве культур микроорганизмов используются соответствующие контрольные штаммы Enterobacteriaceae - E.coli АТСС 25922.
В качестве питательной среды используется питательный агар для культивирования микроорганизмов (ГМФ-агар). Состав сухого питательного агара: гидролизат мяса ферментативного (ГМФ) сухой - 15 г, хлорид натрия - 9 г, агар микробиологический - 12-15 г.
Данный эксперимент проводится одновременно на 4 чашках и повторяется 3 раза. Количество высевов на одну чашку 10. Усредненные значения данных экспериментов приведены в Таблице 3.
1. Соединение формулы (I)
2. Способ получения соединения формулы (I), включающий этапы
1) циклизация 2-нитроанилина (II) с азидом натрия и триэтилортоформиатом в среде уксусной кислоты;
2) восстановление нитрогруппы 2-нитрофенил-1Н-тетразола (III);
3) восстановительное аминирование 2-тетразол-1-ил-фениламина (IV) 4-фтор-бензальдегидом;
4) алкилирование (4-фтор-бензил)-(2-тетразол-1-ил-фенил)-амина (V) бромистым этилом.
