Способ экспресс-диагностики резистентности и чувствительности к ацетилсалициловой кислоте

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для экспресс-диагностики резистентности и чувствительности к ацетилсалициловой кислоте (АСК). Для этого проводят забор крови у пациента до начала антитромбоцитарной терапии. В качестве антикоагулянта применяют 3,2% цитрата натрия, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий, порядка 10-5 с, импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0,1-125 кГц, используя диэлектрический Фурье-спектрометр. При значениях референтного интервала r0=4,518-4,551, x0=1,925-1,939, y0=-1,395--1,385 диагностируют чувствительность, а при значениях r0=4,504-4,517, х0=1,914-1,926, y0=-1,384--1,375 - резистентность к ацетилсалициловой кислоте. Изобретение позволяет быстро и достоверно осуществить диагностику резистентности к АСК у пациента до начала лечения, что предотвратит развитие нежелательных коронарных событий у больных ИБС. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано в диагностике и лечении больных ишемической болезнью сердца (ИБС).

Известен способ определения резистентности к ацетилсалициловой кислоте (АСК), который заключается в сравнении индуцированной агрегации тромбоцитов посредством агрегатометрии через 2-3 и 5 дней после начала приема АСК. Резистентность к АСК диагностируется при Аденозиндифосфат (АДФ)-индуцированной агрегации тромбоцитов более 70% и с арахидоновой кислотой (АК) - более 20% [3, 7]. Однако данный способ не позволяет определить резистентность к препарату до начала терапии.

Еще один способ диагностики резистентности заключается в исследовании АДФ - индуцированной и АСК-зависимой агрегации тромбоцитов с определением коэфициента ингибирования агрегации (КИА): величина КИА<24% свидетельствует о резистентности к АСК, при КИА≥24% - о чувствительности к АСК [5]. Но данный способ является весьма трудоемким и длительным.

Также резистентность определяют при исследовании коллаген-индуцированной и индуцированной арахидоновой кислотой (АК) агрегации методом импедансной агрегатометрии до и после инкубации с АСК до начала лечения антитромбоцитарными препаратами. Аспиринрезистентными считались лица, имеющими агрегацию, индуцированную коллагеном более 8 Ом после инкубации с АСК. Однако данный способ требует затрат времени и реактивов [9].

Эффективность АСК во вторичной профилактике ИБС не представляет сомнений [6]. Но по литературным данным резистентность к препарату может наблюдаться у 8-57% популяции [8], что может привести к развитию неблагоприятных сосудистых событий. Поэтому важно иметь в диагностическом арсенале простой, быстрый и достоверный метод выявления резистентности к АСК до начала лечения.

Задачей изобретения является уменьшение риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ИБС, простота, скорость диагностики, достоверность полученных результатов.

Поставленную задачу решают за счет того, что кровь у пациента забирают до начала антитромбоцитарной терапии, в качестве антикоагулянта применяют 3,2% цитрата натрия, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий, порядка 10-5 с, импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0,1-125 кГц, используя диэлектрический Фурье-спектрометр, при значениях референтного интервала r0=4,518-4,551, x0=1,925-1,939, y0=-1,395 - -1,385 диагностируют чувствительность, а при значениях r0=4,504-4,517, x0=1,914-1,926, y0=-1,384 - -1,375 - резистентность к ацетилсалициловой кислоте.

Способ осуществляют следующим способом: у пациентов забирают кровь из кубитальной вены в объеме 4,0 мл в вакумтейнер с цитратом натрия 3,2%, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий (порядка 10-5 с) импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0.1-125 кГц.

Диэлектрические характеристики крови были описаны с помощью трех так называемых «коуловских» параметров (r0, x0, y0) [2]. Данные характеристики крови описывают физические параметры мембраны клеток крови и позволяют косвенно судить об их состоянии [1]. Данный прибор применялся в медицине, например, для диагностики острого коронарного синдрома без подъема сегмента ST на ЭКГ [4].

Полученные результаты подвергали статистической обработке, и резистентность или чувствительность определяли при условии, если значения всех параметров r0, x0, y0 импеданс-годографа образца крови попадали в диапазон, определенный опытным путем для этих двух состояний (Таблица 1).

Правомерность разделения на резистентных и чувствительных к АСК пациентов на основании диэлектрических параметров крови, была проверена изучением особенностей агрегации тромбоцитов методом оптической агрегометрии при инкубировании последних с АСК и последующим ответом агрегации тромбоцитов на 8-10-дневную терапию препаратом. Для определения диапазона, характеризующего чувствительность или резистентность к АСК, исследовалась кровь 32 пациентов со стенокардией II-III функционального класса (Таблица 2), отменивших АСК за 7-10 дней до предстоящего аорто-коронарного шунтирования, измерялись диэлектрические характеристики крови и агрегация тромбоцитов. Резистентность и чувствительность к АСК подтверждали измерением агрегации тромбоцитов с арахидоновой кислотой (АК) до и после инкубации с АСК до начала лечения антитромбоцитарными препаратами. Аспиринчувствительность определяли при уровне агрегации с АК (после инкубации с АСК) ниже 20%, в противоположном случае диагностировали аспирирезистентность. Также измеряли агрегацию тромбоцитов с АК на 8-е - 10-е сутки от начала терапии АСК: аспиринчувствительность определяли при уровне агрегации с АК ниже 20%, в противоположном случае диагностировали аспирирезистентность. По результатам этих тестов пациенты были разделены на 2 группы: АСК-резистентных (10 человек) (АР) и АСК-чувствительных (22 человек) (АЧ). Выявлены значимые отличия между r0, x0, y0 импеданс-годографа образца крови (критерий Мана-Уитни). P=0,020 для r0 крови, p=0,025 для x0, и p=0,025 для y0 между группами.

Совпадение диагноза резистентности к АСК составляет 70%, а чувствительности к АСК - 73%.

Исходя из полученных данных можно предположить, что тромбоцит, резистентный к АСК, более активный, фенотипически отличается от чувствительного к АСК тромбоцита, что изменяет диэлектрические параметры крови [1].

Клинический пример №1. Пациент Ц., 51 год, история болезни №1842140 (данные №8 в таблице 2). Находился на стационарном лечении в кардиохирургическом отделении №1 Федерального центра сердечно-сосудистой хирургии с 18.04.2014 г. по 05.05.2014 г. с диагнозом: Основной: Ишемическая болезнь сердца (ИБС). Стенокардия II ф.кл. Постинфарктный кардиосклероз. Операция: 23.04.2014 г. Аутовенозное аортокоронарное шунтирование ветви тупого края (ВТК) 1, задней межжелудочковой ветви (ЗМЖВ). Маммарокоронарное шунтирование передней нисходящей (ПНА). Осложнение: Сердечная недостаточность 2а (II ф.кл. по NYHA). Фон: Дислипидемия. Гипертоническая болезнь III, риск 4. Атеросклероз брахиоцефальных артерий, гемодинамически не значимый. При поступлении пациента в стационар проведено исследование диэлектрических характеристик крови: r0 - 4,531, x0 - 1,931, y0 - -1,388. Прогноз: аспиринчувствительный пациент, что подтверждается данными индуцированной агрегации. Уровень агрегации с АК до и после инкубации с АСК - 75 и 12 соответственно. Через 10 суток после лечения АСК уровень агрегации, индуцированной АК, - 8. Аспиринчувствительность подтвердилась, рекомендовано продолжить терапию АСК (Рис. 1. Агрегация тромбоцитов, индуцированная АК. А - до лечения, Б - до лечения с инкубацией с АСК, В - после лечения).

Клинический пример №2. Пациент О., 54 года, история болезни №4668140 (данные №24 в таблице 2). Находился на стационарном лечении в кардиохирургическом отделении №1 Федерального центра сердечно-сосудистой хирургии с 01.09.2014 г. по 12.09.2014 г. с диагнозом: ИБС. Стенокардия III ф.кл. Операция: 03.09.2014 г. Аутовенозное аортокоронарное шунтирование ВТК1, ЗМЖВ. Маммарокоронарное шунтирование ПНА. Осложнение: Сердечная недостаточность 2а, III ф.кл. по NYHA. Фон: Гипертоническая болезнь III, риск 4. Атеросклероз брахиоцефальных артерий. Сахарный диабет II тип, впервые выявленный. При поступлении пациента в стационар проведено исследование диэлектрических характеристик крови: r0 - 4,506, x0 - 1,922, y0 - -1,383. Прогноз: аспиринрезистентный пациент, что подтверждается данными индуцированной агрегации. Уровень агрегации с АК до и после инкубации с АСК - 107 и 112 соответственно. Через 10 суток после лечения АСК уровень агрегации, индуцированной АА, - 101. Аспиринрезистентность подтвердилась, рекомендовано лечение тиенопиридинами (Рис. 2. Агрегация тромбоцитов, индуцированная АК. А - до лечения, Б - до лечения с инкубацией с АСК, В - после лечения).

Предлагаемый способ позволяет в лечебном учреждении любого уровня быстро и малозатратно осуществить диагностику резистентности к АСК до начала лечения. Своевременная диагностика резистентности к АСК предотвратит развитие нежелательных коронарных событий у больных ИБС, резистентных к препарату. Способ может быть рекомендован для применения в клинической практике.

Источники информации

1. Косинова А.А., Ковалев А.В., Гринштейн Ю.И., Суховольский В.Г., Савченко А.А. Диэлектрические характеристики крови и ее компонентов у больных стабильной стенокардией // Сибирское медицинское обозрение. - 2013. - №4. - С. 24-28.

2. Коул К.С. Нервный импульс (теория и эксперимент) // Теоретическая и математическая биология. - 1968. - С. 154-193.

3. Момот А.П. Патология гемостаза. Принципы и алгоритмы клинико-лабораторной диагностики. - Спб.: Форма Т, 2006. - с. 95

4. Патент РФ №2348041, G01N 33/68, бюл. №6, 27.02.2009 г.

5. Патент РФ №2413953, G01N 33/86, бюл. №7, 10.03.2009 г.

6. Antithrombotic Trialists' Collaboration. Collaborative meta-analysis of randomised trials of antiplatelet therapy for prevention of death, myocardial infarction, and stroke in high risk patients. BMJ. 2002 Jan 12; 324(7329): 71-86.

7. Gum P.A., Thamilarasan M., watanabe J. et al. Aspirin use and all-cause mortality among patients being evaluated for known or suspected coronary disease: A propensity analysis // JAMA. - 2001. - Vol. 286 (10). - P. 1187-1194.

8. Cañivano Petreñas L., García Yubero C. Resistance to aspirin: Prevalence, mechanisms of action and association with thromboembolic events. A narrative review // Farm. Hosp. - 2010. - V. 34, №1. - P. 32-43

9. Ivandic BT, Giannitsis E, Schlick P, Staritz P, Katus HA, Hohlfeld T. Determination of aspirin responsiveness by use of whole blood platelet aggregometry. Clin Chem. 2007 Apr; 53(4): 614-9.

Способ экспресс-диагностики резистентности и чувствительности к ацетилсалициловой кислоте, включающий забор крови, отличающийся тем, что кровь у пациента забирают до начала антитромбоцитарной терапии, в качестве антикоагулянта применяют 3,2% цитрата натрия, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий, порядка 10-5 с, импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0,1-125 кГц, используя диэлектрический Фурье-спектрометр, при значениях референтного интервала r0=4,518-4,551, x0=1,925-1,939, y0=-1,395--1,385 диагностируют чувствительность, а при значениях r0=4,504-4,517, х0=1,914-1,926, y0=-1,384--1,375 - резистентность к ацетилсалициловой кислоте.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для определения концентрации аналита в образце. Способ определения концентрации анализируемого вещества в биологическом образце содержит этапы, на которых: генерируют выходной сигнал в ответ на реакцию окисления/восстановления анализируемого вещества в биологическом образце; генерируют вторичный выходной сигнал из биологического образца от дополнительного электрода в ответ на содержание гематокрита в образце; определяют по меньшей мере одну индексную функцию, зависящую от множества параметров ошибки и определяют концентрацию анализируемого вещества по меньшей мере по одному выходному сигналу и уравнению компенсации наклона, зависящему от индексной функции, причем уравнение компенсации наклона включает в себя опорную корреляцию и отклонение наклона.

Изобретение относится медицине и может быть использовано для определения степени энергизации Т-лимфоцита. Для этого проводят исследование отдельных лимфоцитов периферической крови пациента методом интерференционной микроскопии.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики туберкулеза, заключающийся в том, что выделяют мононуклеарные клетки периферической крови, культивируют их в питательной среде, получают образец супернатанта культуры мононуклеарных клеток периферической крови и проводят иммуноферментный анализ (ИФА), при этом перед проведением ИФА в лунки отрицательного контроля вносят питательную среду для культивирования клеток, а в лунки положительного контроля вносят сыворотку крови больного туберкулезом, заведомо содержащую анти-Mtb IgG и анти-Mtb IgA и разведенную 1:100, при ИФА используют в качестве сорбента раствор антигенов Mtb и определяют оптическую плотность образца супернатанта культуры мононуклеарных клеток периферической крови испытуемых ОПобр, образца отрицательного контроля К- и образца положительного контроля К+, после чего определяют критическое значение оптической плотности из соотношения ОПкр=К-+0,1 и при значениях ОПобр>ОПкр и К+>ОПкр устанавливают диагноз активный туберкулез, при значениях ОПобр<ОПкр и К+>ОПкр устанавливают отсутствие туберкулезной инфекции или латентную туберкулезную инфекцию, а при значениях К+<ОПкр и любых значениях ОПобр результат анализа считают недостоверным.

Изобретение относится к поглощающему изделию, выполненному с возможностью определения ионной силы мочи. Изделие включает непроницаемый для жидкости слой; проницаемый для жидкости слой; поглощающий внутренний слой, расположенный между непроницаемым для жидкости слоем и проницаемым для жидкости слоем; устройство с латеральным потоком, интегрированное в изделие и расположенное таким образом, что оно находится в жидкостном соединении с потоком мочи, выделяемой пользователем изделия.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для диагностики наличия заболевания у животных по изменению лейкограммы после ультразвукового воздействия.

Изобретение относится к медицине и предназначено для предупреждения развития вариабельного иммунодефицита с поражением, преимущественно, клеток моноцитарно-макрофагальной системы иммунитета у детей, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для определения функционального состояния яичников у самок сельскохозяйственных животных в условиях первой лактации.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования изменения состояния цитоскелета эритроцитов. Для этого эритроциты отмывают от плазмы крови, помещают на водяную баню при 49,2°C и прогревают в течение 15 мин.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может использоваться для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста со спастическими формами ДЦП.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения растворимого фибриногена, заключающегося в том, что свежезамороженную плазму размораживают и центрифугируют, полученный криопреципитат солюбилизируют и подвергают обработке гидроокисью алюминия, полученную суспензию центрифугируют, образовавшийся осадок, содержащий нецелевые белки, отбрасывают, супернатант подвергают обработке полиэтиленгликолем, суспензию центрифугируют, надосадочную жидкость отбрасывают, а осадок солюбилизируют и подвергают вирусной инактивации, освобождают от продуктов вирусной инактивации, встряхивая с вазелиновым маслом и переосаждая глицином, процедуру осаждения повторяют дважды, полученный раствор фибриногена разливают и лиофильно высушивают.

Изобретение относится к области магнитных и магнитооптических измерений. Способ заключается в том, что исследуемый образец освещают линейно поляризованным световым пучком и измеряют изменение поляризации при отражении, используя разделение отраженного луча на p- и s-компоненты с разложением по амплитуде и фазе, получая на выходе четыре световых пучка.

Изобретение относится к измерительной технике, представляет собой спектральный магнитоэллипсометр и предназначено для контроля in situ производства в условиях сверхвысокого вакуума наноразмерных магнитных структур.

Изобретение относится к области in situ контроля производства в условиях сверхвысокого вакуума наноразмерных магнитных структур и может быть использовано в магнитной наноэлектронике для характеризации гетерогенных магнитных элементов в устройствах памяти, в сенсорных устройствах и т.п.

Изобретение относится к области оптического приборостроения и касается способа определения ориентации кристаллографических осей в анизотропном электрооптическом кристалле класса 3m.

Изобретение относится к области оптической локации объектов и касается измерений изменений параметров поляризации оптического излучения при прохождении оптически активного вещества.

Изобретение относится к области оптико-физических исследований состава естественных материалов, таких как шерсть и растительные волокна (лен, хлопок, шелк и др.), и может быть использован в текстильной промышленности, в зоотехнике, при археологических исследованиях, при определении качества сырья и изготовленной из него продукции.

Группа изобретений относится к медицине. При осуществлении способа облучают лазерным лучом зоны максимального скопления кровеносных сосудов.

Изобретение относится к способам определения физических свойств в твердых прозрачных средах природного происхождения и может быть использовано при решении задач анализа качества таких материалов.

Изобретение относится к технике, предназначенной для оптико-физических измерений, а именно к эллипсометрии и поляриметрии, и может быть использовано для измерения состояния поляризации светового луча в широком спектральном диапазоне.

Изобретение относится к приборам неразрушающего контроля положения оптической оси корундовых подпятников типа ПКС (подпятник корундовый сферический) в составе маятников ГЦ (газовая центрифуга) без демонтажа маятников.
Изобретение относится к области контроля качества высококлассных поверхностей. В заявляемом способе в качестве разряда используют поверхностный диэлектрический барьерный разряд, локализованный на поверхности одного из двух электродов, одновременно служащего столиком для исследуемого образца материала; диэлектрический барьер выполняют бездефектным и тщательно отполированным, повторяющим конфигурацию поверхности исследуемого образца, плотно прижимают к нему образец, затем приводят в соприкосновение с образцом заостренный конец второго электрода, выполненного в виде стержня из низкокоррозионного проводящего электрический ток материала; подключают питающее напряжение переменного электрического тока, при этом электрическую прочность диэлектрического барьера выбирают превышающей максимальное напряжение источника электрического питания более чем в два раза; для принятия решения о пригодности поверхности твердых материалов используют появляющееся на поверхности исследуемого образца в местах расположения дефектов слабое голубое свечение плазмы воздуха в виде ярких светящихся голубых точек; исследуемую поверхность признают пригодной при полном отсутствии светящихся голубых точек. Техническим результатом является повышение надежности обнаружения дефектов с одновременным расширением типов контролируемых образцов для увеличения в дальнейшем выхода годных изделий за счет улучшения выявления дефектных материалов перед началом технологических операций.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для экспресс-диагностики резистентности и чувствительности к ацетилсалициловой кислоте. Для этого проводят забор крови у пациента до начала антитромбоцитарной терапии. В качестве антикоагулянта применяют 3,2 цитрата натрия, помещают 0,5 мл крови в опытную кювету, пропускают через образец крови короткий, порядка 10-5 с, импульс тока с последующей регистрацией функции спада поляризации образца, а затем выполняют Фурье-преобразование этой функции и рассчитывают параметры импеданс-годографов в диапазоне частот 0,1-125 кГц, используя диэлектрический Фурье-спектрометр. При значениях референтного интервала r04,518-4,551, x01,925-1,939, y0-1,395--1,385 диагностируют чувствительность, а при значениях r04,504-4,517, х01,914-1,926, y0-1,384--1,375 - резистентность к ацетилсалициловой кислоте. Изобретение позволяет быстро и достоверно осуществить диагностику резистентности к АСК у пациента до начала лечения, что предотвратит развитие нежелательных коронарных событий у больных ИБС. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Наверх