Способ определения снижения эстриола в гомогенате плаценты в связи с увеличением синтеза фосфодиэстеразы при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для диагностики формирования фетоплацентарной недостаточности при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого измеряют в периферической крови титр антител к ЦМВ, а также активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в мембране синцитиотрофобласта и содержание эстриола в гомогенате плаценты, и при титре антител к ЦМВ 1:1600, снижении аденилатциклазы в мембране синцитиотрофобласта до 10,0±0,2 усл. ед., повышении активности в мембране синцитиотрофобласта фосфодиэстеразы до 18,00±0,31 усл. ед. и снижении содержания эстриола в гомогенате плаценты до 177,50±7,80 нмоль/л создается угроза формирования фетоплацентарной недостаточности. 2 ил.

 

1. Цель изобретения - разработать способ оценки снижения поступления в синцитиотрофобласт ворсинок плаценты эстриола при увеличении синтеза в мембране синцитиотрофобласта фосфодиэстеразы на фоне обострения в организме беременной на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа, позволяющего выяснить причину снижения в плаценте беременной эстриола в связи с нарастанием содержания в плаценте фосфодиэстеразы при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации, что создает угрозу формирования фетоплацентарной недостаточности и развития плода.

3. Раскрытие изобретения

Фосфодиэстеразы - это ферменты, участвующие в регуляции сигнальных путей. В первую очередь к ним относятся цАМФ-фосфодиэстеразы и цГМФ-фосфодиэстеразы [1,2,6,7,11,12]. Гормональный сигнал в клетку обеспечивается как минимум пятью белками: рецептор гормона; фермент - аденилатциклаза, выполняющий функцию синтеза циклического аденозинмонофосфата (цАМФ); G-белок, осуществляющий связь между аденилатциклазой и рецептором; цАМФ-зависимая протеинкиназа, катализирующая фосфорилирование внутриклеточных ферментов или белков-мишеней, изменяя их активность, и, наконец, фосфодиэстераза, которая вызывает распад цАМФ и тем самым обрывает действие сигнала. Фосфодиэстераза и аденилатциклаза являются регуляторами процессов фосфорилирования белков [4,5,8]. Клетка, получая сигнал, превращает его в химический процесс на уровне рецептора с участием G-белка и вторичного мессенджера, которым в первую очередь выступает цАМФ. Синтезируется цАМФ ферментом аденилатциклазой из АТФ. Аденилатциклаза представляет собой интегральный белок плазматической мембраны, и ее множественные формы активизируются при действии множественных агентов и прежде всего Gs. При увеличении содержания фосфодиэстеразы цАМФ удаляется путем гидролиза [13]. Самым ранним этапом в цепи событий является фосфорилирование рецептора, которое катализируется киназой рецептора, сопряженной с G-белком (GPK). Фосфорилирование блокирует способность рецептора активировать G-белок. При стимуляции синтеза фосфодиэстеразы, приводящего к его увеличению, разрушается цАМФ и аденилциклаза, что подавляет рецепторную активность мембраны синцитиотрофобласта и поступление в плаценту эстриола.

4. Новая техническая задача

Разрабатывается способ оценки причин недостаточного содержания в гомогенате плаценты беременной гормона эстриола при увеличении в ней фосфодиэстеразы при обострении на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции.

5. В работе способ определения снижения эстриола в гомогенате плаценты в связи с увеличением синтеза фосфодиэстеразы при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации отмечается, что в экспериментальных условиях фосфодиэстераза при большом содержании разрушат цАМФ. В наших исследованиях мы проводили определение содержания фосфодиэстеразы в мембранах синцитиотрофобласта плаценты при обострении в организме беременной цитомегаловирусной инфекции до титра 1:1600 и отметили, что повышенное содержание фосфодиэстеразы в наружной мембране синцитиотрофобласта подавляет содержание в гомогенате плаценты эстриола, создавая угрозу формирования фетоплацентарной системы и развития плода.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 20 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 25-26 неделе гестации и 15 беременных, не болевших ЦМВИ. Диагноз обострения ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Статистический анализ и обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ STATISTICA v. 6.0 (StatSoft Inc., США). Для определения достоверности различий использовали непарный параметрический критерий Стьюдента. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни. Критический уровень значимости был принят за 5% (0,05). Данные представлены как среднее арифметическое (М) ± стандартная ошибка среднего арифметического (m).

6.3. Содержание эстриола в гомогенате плаценты роженицы определяли иммуноферментным методом наборами ЗАО «НОВО Имунотех» (Москва).

6.4. Активность аденилатциклазы изучали в синцитиотрофобласте гистохимическим методом по прописи J. Reik [10].

6.5. Фосфодиэстераза определялась гистохимическим методом в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты по прописи Флоренко, Барнетта и Грингарда [3].

Гистохимические препараты рассматривались под цифровым микроскопом (Япония), соединенным с компьютером, и анализировались цитофотометрическим методом по программе «Scion» (США).

7. Полученные данные

Исследования показали, что при обострении ХЦМВИ на третьем триместре гестации до титра антител к ЦМВ 1:1600 у беременной в гомогенате плаценты резко снижалось содержание эстриола до 177,50±7,80 нмоль/л (контроль - 270,60±8,50 нмоль/л). Гистохимические исследования показали, что в наружной мембране снижается активность аденилатциклазы до 10,0±0,2 усл. ед. (контроль 33,9±0,95 усл. ед.). На этом фоне активность фосфодиэстеразы в мембране синцитиотрофобласта возросла до 18,00±0,31 усл. ед. (контроль - 3,2±0,03 усл. ед.). Повышение активности фосфодиэстеразы приводит к уничтожению аденилатциклазы, создающей в мембране синцитиотрофобласта ворсинок плаценты мессенджер второго типа цАМФ, что лишает возможность эстриолу проникновение через синцитиотрофобласт в кровь пуповины, снижая тем самым формирования фетоплацентарной системы беременной и развития плода.

Литература

1. Beavo I.A., Bechtel P., Klrebs E.G. Mechanisms of control for с AMP-dependent protein kinase from skeletal muscle. Adv. Cyclic Nucleotide Res. 1975. V. 5. P. 241-251.

2. Clapperton I.A., Martin S.R., Smerdon S.J., Gamblin S.I., Bayley P.N. Structure of calmodulin dependent protein kinase I: Studies of the kinase activation mechanism. 2002. Biochemistry. V. 41. P. 14669-14679.

3. Florenko N., Barrent P., Greengard P. Cyclic 3,5-nucleotide phosphodiesterase: chemical localication in cerebral cortex // Science. 1971. V. 173. P. 645-747.

4. Ginty D., Kornhauser I., Thompson M., Bading H., Mayo K., Takahashi J., Greenberg M. Regulation of CREB phosphorylation in the suprachiasmatic nucleus by light and acircadianclock. 1993. Scionce. V. 260. P. 238-241.

5. Kobe В., Heierhorst I., Kemp B. Intrasteric regulation of protein kinases. Adv. Second. Messenger. Phosphoprotein Res. 1977. V. 31. P. 29-40.

6. Kuboniwa H., Tjandra N., Gresiek S., Ren H., Klee C, Bax A. Solution structure of calcium - free calmodulin. Nat. Struct. Biol. 1995. V. 2. P. 768-776.

7. Newton A.C. Protein kinase C: structural and spatial regulation by phosphorylation, cofactors, and macromobculur interactions. 2001. Chem. Rev. V. 101. P. 2353-2364.

8. Perkins I., Hausdorff W., Lefkowitz R. Mechanisms of ligand-induced desensitization of ***-adrenergie receptors. 1990. In. Th Beta-Adrenergic Receptors. J. P. Perkins, ed. Clifton, NI: Humana Press. P 73-124.

9. Pawson Т., Nash P. Assembly of cell regulation systems through protein interaction domains // Science. 2003. V. 300. P. 445-452.

10. Reik J., Petzold C., Higgins J. Hormonesensitive adenyl cyclase: cytochemical localization in rat liver // Science. 1970. V. 168. P. 382-384.

11. Sauro H.M., Kholodenko B.N. Quantitative analysis of signaling networks. 2004. Prog. Biophys. Mol. Biol. V. 86. P. 5-43.

12. Turk B.E., Cantley L. Peptide libraries: at the crossouds of proteomics and bioinformatics. Curr. Opin. Chem. Biol. 2003. V. 7. P. 84-90.

13. Wong W., Scotty D. AKAP signaling complexesi focal points in space and time // Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2004. V. 5. P. 1065-1076.

Способ диагностики формирования фетоплацентарной недостаточности при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации, включающий изменение в периферической крови титра антител к ЦМВ, а также активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в мембране синцитиотрофобласта и содержания эстриола в гомогенате плаценты, и при титре антител к ЦМВ 1:1600, снижении аденилатциклазы в мембране синцитиотрофобласта до 10,0±0,2 усл. ед., повышении активности в мембране синцитиотрофобласта фосфодиэстеразы до 18,00±0,31 усл. ед. и снижении содержания эстриола в гомогенате плаценты до 177,50±7,80 нмоль/л создается угроза формирования фетоплацентарной недостаточности.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и касается способа оценки эффективности лечения больных хроническим бруцеллезом. Сущность способа заключается в том, что у больных хроническим бруцеллезом в фазе обострения до начала терапии и по ее окончании проводится определение сывороточного уровня ФНО α, ИФН γ, ИЛ 10, рассчитывается соотношение ИФН γ / ИЛ 10.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования развития безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после аутологической трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецептивности эндометрия при бесплодии у женщин с повторными неудачами программ ЭКО.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики метастазов рака и неходжкинских лимфом. Клеточный материал из образцов лимфатических узлов помещают в питательную среду накопления, состоящую из раствора Хенкса, реоплиглюкина и альбумина, смешанных в равных объемах.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается способа прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы в зависимости от наличия/отсутствия сопутствующей неинфекционной патологии глаз у индивидуумов русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены диагностический инструмент для анализа образца и способ подготовки и анализа образца.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, пульмонологии и может быть использовано для оценки степени нарушения энергетического метаболизма лимфоцитов крови у детей с внебольничной пневмонией (ВП).

Группа изобретений относится к медицине и касается способа иммунологического анализа образца крови или компонентов крови на 25-гидроксивитамин D, при котором для высвобождения витамина D из эндогенных связывающих белков добавляют к образцу перфторалкильную кислоту с длиной углеродной цепи от 4 до 12 атомов углерода или ее соли.

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогноза формирования затяжного течения соматоформных расстройств. Для этого проводится иммунологическое обследование и при одновременном содержании в крови Т-лимфоцитов (CD3+) 59% и менее, цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+) 19% и менее, лимфоцитов с маркерами поздней активации (HLADR+) 20% и более прогнозируют затяжное течение соматоформных расстройств.
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии и представляет собой способ оценки тяжести течения ретинобластомы у детей. Согласно изобретению в сыворотке крови определяют антитела к раннему антигену вируса Эпштейна-Барр и при их наличии оценивают течение как тяжелое.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и предназначено для прогнозирования течения вакцинального процесса у детей, имеющих неврологические нарушения ЦНС. Для этого до вакцинации определяют в сыворотке крови содержание лимфоцитов и их субпопуляций CD3, CD4, CD20, интерлейкина 4, интерферона γ IFN-γ и общего пула иммуноглобулина IgG. Затем на основании полученных данных определяют группу иммунологической реактивности. При значениях: содержания лимфоцитов ≥50%, субпопуляций CD3 - ≥60%, CD4 - ≥35%, CD20 - ≥25%, ИЛ4≥50 пкг/мл, IFN-γ≥50 пкг/мл, общего пула IgG≥9,5 г/л - прогнозируют развитие сильных вакцинальных реакций, соответствующих гиперреактивной группе. При содержании лимфоцитов ≤45%, CD3 - ≤60%, CD4 - ≤35%, CD20 - ≤21%, ИЛ4≤20 пкг/мл, IFN - γ≤50 пкг/мл, общего пула IgG≤5,5 г/л - прогнозируют осложненное течение вакцинального процесса, соответствующее гипореактивной группе. При содержании лимфоцитов ≥50%, CD3 - ≤60%, CD4 - ≤35%, CD20 - ≥25%, ИЛ4≤20 пкг/мл, IFN-γ≤50 пкг/мл, общего пула IgG≤5,5 г/л - прогнозируют развитие как вакцинальных реакций, так и осложненное течение вакцинального периода, соответствующих смешанной группе. Использование данного способа позволяет установить точные прогностические критерии течения вакцинального периода, что способствует своевременному применению индивидуальных схем вакцинации и ревакцинации и обеспечивает безопасность прививок у детей с патологией ЦНС. 5 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к малоинвазивным методам в хирургической эндокринологии, и касается дифференциальной диагностики образований шеи. Способ включает ультразвук-контролируемую тонкоигольную аспирационную пункционную биопсию, которую выполняют однократно одной иглой через один прокол. Полученный материал выдавливают из иглы для выполнения цитологического исследования. После этого проводят смыв из аспирационной иглы оставшегося материала для определения уровня паратиреоидного гормона и тиреоглобулина. Смыв из иглы при этом осуществляют предварительно подготовленной сывороткой, в качестве которой используют смесь сывороток от здоровых доноров с заведомо известным уровнем паратиреоидного гормона и уровнем тиреоглобулина. Способ уменьшает травматичность диагностических манипуляций, сокращает время для уточнения диагноза при планировании объема оперативного лечения, экономичен и прост в выполнении, применим в стационарных и амбулаторных условиях, без обезболивания. 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к антителу или его функциональному фрагменту, которые способны связывается с cMet. Также раскрыты мышиная гибридома, способная секретировать указное антитело, нуклеиновая кислота, которая экспрессирует указанное антитело и набор для прогнозирования эффективности лечения онкогенного расстройства, включающий указанное антитело. Раскрыты способ обнаружения cMet-экспрессирующей опухоли, способ диагностики cMet-экспрессирующей опухоли, способ определения прогноза развития cMet-экспрессирующей опухоли и способ прогнозировая эффективности лечения онкогенного расстройства, с помощью заявленного анти-cMet-антитела. Изобретение обладает способностью специфически связывается с c-Met, что позволяет эффективно лечить заболевания, ассоциированные с экспрессией полипептида c-Met. 10 н. и 12 з.п. ф-лы, 12 ил., 6 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для патоморфологической диагностики хронического аппендицита. Способ заключается в следующем: образец ткани фиксируют, изготавливают срезы, инкубируют с реагентом и проводят обработку проявляющим агентом, дегидратацию и заключение в среду. В качестве реагента используют антитела к р44 МАРК (Erkl) (МАРК3) в разведении 1:100 - 1:250, длительность инкубации с реагентом во влажной камере при температуре 25°C составляет 60 минут. Способ позволяет по выявлению в препарате специфической окраски в субсерозном и мышечном слоях стенки аппендикса диагностировать хронический аппендицит. 1 пр., 4 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики меланомы хориоидеи. Сущность способа состоит в том, что у пациента с подозрением на меланому хориоидеи осуществляют забор слезной жидкости из обоих глаз, далее определяют концентрацию в слезной жидкости интерлейкина-8 и при значении этого показателя выше 17,7 пг/мл диагностируют меланому хориоидеи. Сущность способа состоит в упрощении способа и повышении его точности. 1 з.п. ф-лы, 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов. Для этого используют бруцеллин для специфической активации лимфоцитов. Детекцию бластных форм лимфоцитов проводят с помощью моноклональных антител к CD34 с последующим подсчетом клеток методом проточной цитофлуориметрии. Использование данного способа позволяет проводить учет активированных бруцеллином лимфоцитов в РБТЛ с использованием моноклональных антител CD34 у больных бруцеллезом и здоровых доноров. 1 табл.
Изобретение относится к медицинской аллергологии, иммунологии, медицинской лабораторной диагностике. Сущность способа состоит в том, что в периферической крови обследуемых лиц определяют концентрацию IgE и абсолютное содержание лимфоцитов СD23+. При содержании СD23+ более 0,6×109 кл./л выявляют риск формирования гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ). Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность формирования гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ). 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен диагностикум для индикации специфических антител к F1 антигену чумного микроба, который представляет собой взвесь композитных частиц, состоящих из углеродной метки размером не более 500 нм, заключенных в полимерную матрицу, представляющую собой привитой сополимер бычьего сывороточного альбумина с чумным капсульным антигеном F1, при соотношении компонентов, мг/мл: углеродная метка - 20-30, бычий сывороточный альбумин - 5-10, антиген F1 - 0,2-1,0; при этом полученные частицы композита стабилизированы в забуференном физиологическом растворе рН 7,0-7,4 высокомолекулярными полимерами и неионными детергентами. Изобретение направлено на повышение чувствительности метода дот-иммуноанализа за счет стабилизации антигена на поверхности углеродной метки, что приводит к повышению эффективности анализа, позволяющего выявлять специфические антитела в более низких титрах. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено выделенное моноклональное антитело к FcRH5, охарактеризованное последовательностями HVR. Также рассмотрены: полинуклеотид, вектор экспрессии и клетка-хозяин для получения антитела по изобретению. Кроме того, на основе антитела по изобретению предложены иммуноконъюгаты, предназначенные для ингибирования роста клеток, экспрессирующих FcRH5; для определения присутствия FcRH5; для лечения расстройства, связанного с повышенной экспрессией и/или активностью FcRH5; а также фармацевтическая композиция для лечения расстройства, связанного с повышенной экспрессией и/или активностью FcRH5. Показано применение иммуноконъюгата по изобретению для получения лекарственных средств для ингибирования роста клеток, экспрессирующих FcRH5, и для лечения пролиферативного расстройства, опосредованного FcRH5. Также представлен способ получения конъюгата по изобретению и способ in vitro определения присутствия FcRH5 в образце. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии и диагностике заболеваний, связанных FcRH5. 14 н. и 47 з.п. ф-лы, 31 ил., 7 табл., 13 пр.

Изобретение относится к областям биологии и генетической инженерии. Предложен выделенный пептид для терапевтических целей, содержащий последовательность, по меньшей мере, на 95% идентичную SEQ ID NO:4 (GG00444), или его фрагмент или вариант, способные связываться со слизью кишечника человека, а также содержащая его ворсинчатая структура, пищевой продукт, фармацевтическая композиция, полинуклеотид, экспрессионный вектор, клетка-хозяин, кластер генов, антитело, способ лечения и способ скрининга пробиотических бактериальных штаммов. 20 н. и 11 з.п. ф-лы, 11 ил., 2 табл., 11 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для диагностики формирования фетоплацентарной недостаточности при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого измеряют в периферической крови титр антител к ЦМВ, а также активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы в мембране синцитиотрофобласта и содержание эстриола в гомогенате плаценты, и при титре антител к ЦМВ 1:1600, снижении аденилатциклазы в мембране синцитиотрофобласта до 10,0±0,2 усл. ед., повышении активности в мембране синцитиотрофобласта фосфодиэстеразы до 18,00±0,31 усл. ед. и снижении содержания эстриола в гомогенате плаценты до 177,50±7,80 нмольл создается угроза формирования фетоплацентарной недостаточности. 2 ил.

Наверх