Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе



Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе
Средство пептидной структуры, ингибирующее дипептидилпептидазу-4, и фармацевтическая композиция на его основе

 


Владельцы патента RU 2589258:

Закрытое акционерное общество "Институт экспериментальной фармакологии" (RU)

Изобретение относится к медицине и касается средства для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4, содержащего действующее вещество и фармацевтически приемлемый носитель или носители. В качестве действующего начала средство включает миристоил-трипептид Myr-Trp-Arg-Glu-OH или его гидраты, сольваты или соли. Изобретение обеспечивает расширение спектра биологически активных веществ, применяемых для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения заболеваний, расстройств или состояний, которые можно лечить или предупреждать путем ингибирования фермента дипептидилпептидазы-4. 4 з.п. ф-лы, 4 пр., 3 ил., 3 табл.

 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, в частности к лекарственным препаратам, применяемым для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой-4, т.е. заболеваний, расстройств или состояний, которые можно лечить или предупреждать путем ингибирования этого фермента.

Дипептидилпептидаза-4 (согласно номенклатуре ферментов IUBMB EC.3.4.14.5, далее - ДПП-4) представляет собой мембраносвязанную сериновую пептидазу, которая локализуется в ряде тканей (кишечник, печень, легкие, почки), а также на Т-лимфоцитах крови, где фермент известен как CD-26. В литературе этот фермент имеет больше количество названий, включая DPP4, DP4, DAP-IV, FAPS, белок 2, образующий комплекс с аденозиндезаминазой, белок, связывающий аденозиндезаминазу (ADAbp), дипептидиламинопептидаза IV; Xaa-Pro-дипептидиламинопептидаза; Gly-Pro-нафтиламидаза; постпролиндипептидил-аминопептидаза IV; лимфоцитарный антиген CD26; гликопротеин GP110; глицилпролинамино-пептидаза; глицилпролинаминопептидаза; Х-пролил-дипептидиламино-пептидаза; pepX; лейкоцитарный антиген CD26; глицилпролил-дипептидиламино-пептидаза; дипептидилпептидгидролаза; глицилпролиламино-пептидаза; дипептидиламинопептидаза IV; аминоацилпролилдипептидиламино-пептидаза; инициирующая Т-клетки молекула Tp103; X-PDAP.

ДПП-4 является неклассической сериновой аминодипептидазой, которая отщепляет дипептиды Xaa-Pro с аминоконца (N-конца) полипептидов и белков. Также известно, что зависимое от ДПП-4 медленное высвобождение дипептидов типа X-Gly или X-Ser происходит в случае некоторых встречающихся в природе пептидов.

Ингибиторы ДПП-4 могут применяться в качестве лекарственных средств для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ДПП-4.

В результате исследований выявлен ряд соединений, ингибирующих ДПП-4, которые начали применяться в медицинской практике.

Так, например, известно применение ингибитора дипептидилпептидазы 4 (ДПП-IV) для лечения предотвращения или снижения риска смертности в результате сердечно-сосудистых заболеваний, включающее их введение страдающему субъекту. Также ингибитор вводится для предотвращения или снижения риска несмертельного инфаркта миокарда и/или несмертельного инсульта и/или сахарного диабета. В качестве такого ингибитора используется саксаглиптин, вилдаглиптин, ситаглиптин (EA 201101231 А1, 30.09.2010).

Известно, что использование ингибиторов ДПП-4 способствует восстановлению нарушенной глюкозозависимой секреции инсулина и коррекции повышенного уровня глюкагона - ключевых расстройств, которые характерны для сахарного диабета.

В последние годы особое внимание во всем мире уделяется изучению роли гормонов желудочно-кишечного тракта в регуляции секреции инсулина, а следовательно, и в регуляции гомеостаза глюкозы в организме человека. Главным образом, вышеперечисленные эффекты обусловлены действием глюкагонподобного пептида-1 (ГПП-1) (Green B.D., Flatt P.R. Incretin hormone mimetics and analogues in diabetes therapeutics // Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2007. - T. 21. - №. 4. - C. 497-516). Недостатком ГПП-1 является его короткий период жизни (4-5 минут) из-за быстрой инактивации ферментом ДПП-4 (Hansen L., Deacon C.F., Ørskov С. et al. Glucagon-Like Peptide-1-(7-36) Amide Is Transformed to Glucagon-Like Peptide-1-(9-36) Amide by Dipeptidyl Peptidase IV in the Capillaries Supplying the L Cells of the Porcine Intestine 1 // Endocrinology. - 1999. - T. 140. - №. 11. - C. 5356-5363.). Поэтому в клинической практике невозможно использовать ГПП-1 в качестве лекарственного препарата.

Ингибиторы ДПП-4 предотвращают быструю инактивацию эндогенного ГПП-1, тем самым усиливают и пролонгируют его действие. Известные ингибиторы ДПП-4 - глиптины (ситаглиптин (Янувия®), вилдаглиптин (Галвус®), саксаглиптин (Онглиза®) и линаглиптин (Тражента®)), представляют собой малые молекулы, ингибирующие каталитический сайт ДПП-4.

Глиптины, ингибируя ДПП-4, повышают, в частности, концентрацию 2-х известных гормонов семейства инкретинов: ГПП-1 и глюкозозависимого инсулинотропного полипептида. Использование ингибиторов ДПП-4 способствует восстановлению нарушенной глюкозозависимой секреции инсулина и коррекции повышенного уровня глюкагона - ключевых расстройств, которые характерны для сахарного диабета.

Глиптины приводят более чем к 90% ингибированию фермента (Fukuda-Tsuru S. et al. 2012) и, как следствие, значительно снижают образование метаболита ГПП-1 (9-36)амида, за счет которого потенцируется действие основного гормона ГПП-1 (7-36)амида.

Перспективным с точки зрения соотношения безопасности применения и эффективности являются пептидные ингибиторы ДПП-4. Так, для трипептидов, содержащих Trp-Arg-Xaa, IC50 в отношении ингибирования ДПП-4 составляет менее 500 µМ (Lan, Ito, Ito, & Kawarasaki. (2014). Trp-Arg-Xaa tripeptides act as uncompetitive-type inhibitors of human dipeptidyl peptidase IV. Peptides, 54, 166-170). Пептиды, содержащие Trp-Arg-Xaa, проявляют конкурентный тип ингибирования ДПП-4. У конкурентных ингибиторов, чей эффект связан с взаимодействием с субстратом, происходит специфическое ингибирование ДПП-4, что позволяет снизить потенциальные токсические эффекты (Eckhardt, Langkopf, Mark et al. (2007). 8-(3-(R)-Aminopiperidin-1-yl)-7-but-2-ynyl-3-methyl-1-(4-methyl-quinazolin-2-ylmethyl)-3, 7-dihydropurine-2, 6-dione (BI 1356), a highly potent, selective, long-acting, and orally bioavailable dpp-4 inhibitor for the treatment of type 2 diabetes. Journal of medicinal chemistry, 50(26), 6450-6453).

Таким образом, существует высокая потребность в новых ингибиторах ДПП-4.

Задача настоящего изобретения заключается в разработке средства с ингибирующим ДПП-4 действием и создание на его основе средства для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4.

Технический результат, обеспечиваемый изобретением, заключается в расширении спектра биологически активных веществ, применяемых для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой-4, т.е. заболеваний, расстройств или состояний, которые можно лечить или предупреждать путем ингибирования этого фермента.

Для решения поставленной задачи предлагается средство для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4, содержащее действующее вещество и фармацевтически приемлемый носитель или носители, которое в качестве действующего начала включает миристоил-трипептид или его гидраты, сольваты или соли следующей структуры:

Myr-Trp-Arg-Glu-OH

Для структурных аналогов заявляемого соединения было показано наличие специфической ингибирующей активности в отношении ДПП-4 (Lan et al. 2014). Образование конъюгатов пептидов с жирными кислотами улучшает фармакокинетический профиль и может приводить к улучшению биодоступности при пероральном приеме (Novakovic, Anderson, Grasso. (2014). Myristic acid conjugation of [D-Leu-4]-OB3, a biologically active leptin-related synthetic peptide amide, significantly improves its pharmacokinetic profile and efficacy. Peptides. 62. 176-182). Природные объекты, такие как лосось, мясо крупного рогатого скота и пр., могут также служить источником выделения пептидов, оказывающих ингибирующее действие на ДПП-4 (Li-Chan, Hunag, Jao, Ho, & Hsu. (2012). Peptides derived from Atlantic salmon skin gelatin as dipeptidyl-peptidase IV inhibitors. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 60, 973-978; WO 2006068480 A3, Priority date 23.12.2004). Ранее было показано, что комплекс биологически активных веществ, выделенный из гонад морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis, содержащий в том числе пептиды, аминокислоты и жирные кислоты, обладает антидиабетическим действием (Пат RU №2520695, С1, приоритет 04.02.2013). Дальнейшее разделение и очистка позволила установить, что липофильный пептид гонад морских ежей S.droebachiensis обладает ингибирующей активностью в отношении ДПП-4. Однако при хранении наблюдалась его деструкция. Для обеспечения стабильности была предпринята попытка синтезировать аналог природного пептида.

Данное средство, обладающее ингибирующим ДПП-4 действием, содержит Myr-Trp-Arg-Glu-OH и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. Предпочтительно оно предназначено для нормализации уровня инкретинов в крови и/или нормализации функции эндотелиальных клеток.

Предлагаемое средство выполняют в виде различных лекарственных форм, предпочтительно твердых лекарственных форм - таблеток, таблеток с замедленным/пролонгированным высвобождением, капсул, гранул, порошков. В качестве вспомогательных веществ могут быть использованы вещества, обычно применяемые в фармацевтической промышленности для производства твердых лекарственных форм, например крахмал, сахара, целлюлоза и ее производные, желатин, поливинилпирролидон, полиэтиленоксид, фосфат кальция, лубрикант, смачивающий агент, как натрийлаурилсульфат, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот (твины), сложные эфиры сорбитана и жирных кислот (спаны), предпочтительно крахмал, в том числе модифицированный, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, натрийкроскарбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, вспомогательные вещества - ингибиторы высвобождения, лубрикант. Примерами последнего являются стеариновая кислота и/или ее соли - стеарат кальция, стеарат магния, стеарат цинка, тальк, коллоидная двуокись кремния, полиэтиленгликоль, гидрогенизованное растительное масло, жидкий парафин. Новая композиция может также содержать ароматизаторы, красители и/или вкусовые добавки.

Предпочтительно препарат изготавливают в форме таблетки, которая может иметь оболочку. Наличие последней улучшает внешний вид, органолептические свойства лекарственной формы, защищает ее от механических повреждений.

Предпочтительное количество действующего начала (Myr-Trp-Arg-Glu-ОН) в единичной дозе составляет: от 1 мг до 50 мг, более предпочтительно 5 мг. В рамках настоящего изобретения термин Myr-Trp-Arg-Glu-OH подразумевает также гидраты, сольваты и соли Myr-Trp-Arg-Glu-OH, например гидрохлорид.

Получение заявляемой лекарственной формы может быть осуществлено в соответствии с известными способами изготовления твердых лекарственных форм. Все способы включают стадию объединения активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или более вспомогательных ингредиентов. В общем случае заявляемую фармацевтическую композицию получают путем унифицированного и однородного объединения Myr-Trp-Arg-Glu-OH с жидким или тонкоизмельченным твердым носителем, или с тем и другим, и затем, в случае необходимости, придают продукту требуемую форму, например, методом влажной грануляции с последующим добавлением к сухим гранулам лубриканта, формованием окончательной смеси ингредиентов с образованием лекарственной формы заданной конфигурации и размера, и, при необходимости, нанесением оболочки, или методом прямого прессования с последующим нанесением оболочки.

В основе изобретения лежит неожиданно обнаруженное авторами свойство ранее не описанного соединения Myr-Trp-Arg-Glu-OH в отношении ключевого фермента метаболизма ДПП-4. В результате проведенных исследований Myr-Trp-Arg-Glu-OH был выявлен как средство для ингибирования фермента ДПП-4.

В качестве иллюстративных материалов к описанию приложены результаты масс спектрометрического анализа и хроматографическая чистота (Рисунки 1 и 2).

На рисунке 1 показан масс спектрометрический анализ, подтверждающий структуру миристоил-трипептида (Myr-Trp-Arg-Glu-OH).

На рисунке 2 - ВЭЖХ-хроматограмма заявляемого миристоил-трипептида. Условия анализа: хроматограф Shimadzu (Япония) с колонкой Luna С18 (2) 4,6×150 мм (размер частиц сорбента 5 мкм) и предколонкой (3 мм), заполненной тем же сорбентом (Phenomenex, США) в градиентном режиме элюирования смесью 0,03% раствора трифторуксусной кислоты (фаза А) и ацетонитрила (фаза Б), скорость подачи элюента 1,0 мл/мин, объем проб 20 мкл, длины волн детектирования 210 нм).

На рисунке 3 - ингибирующая активность исследуемых препаратов.

Фармакологические свойства и способ получения заявляемого в настоящем изобретении миристоил-трипептида (Myr-Trp-Arg-Glu-OH) в литературе не описаны.

Синтез заявляемого миристоил-трипептида осуществляли по нижеследующей методике. Список использованных сокращений представлен в таблице 1.

В реакторе для твердофазного синтеза суспендировали 6.0 г 2-хлортритильной смолы (емкость 1.5 ммоль/г) в 45 мл DCM, выдерживали в течение 5 мин, смолу отфильтровывали, промывали 2×30 мл DCM. К смоле добавляли раствор 4.25 г (10.0 ммоль) Fmoc-Glu(OtBu)-OH и 6 мл (36 ммоль) DIPEA в 30 мл DCM, перемешивали в течение 60 мин при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 2×30 мл DCM, обрабатывали 2×30 мл смеси DCM/метанол/DIPEA (17:2:1) в течение 10 мин, промывали 2×30 мл DCM и 3×30 мл DMF. В реактор загружали 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.

В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 12.98 г (20.0 ммоль) Fmoc-Arg(Pbf)-OH, 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.

В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 10.53 г (20.0 ммоль) Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-Trp-OH, 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.

В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 4.57 г (20.0 ммоль) миристиновой кислоты (MA), 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, 4×30 мл DCM, сушили, добавляли 30 мл смеси TFA/TIS/EDT/H2O (37:1:1:1), выдерживали в течение 4 час при комнатной температуре, отфильтровывали, промывали 3×20 мл трифторуксусной кислотой, объединенные фильтраты упаривали до объема ~20 мл, к остатку добавляли 60 мл сухого эфира. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре эфиром, сушили. Полученный продукт растворяли в 50 мл воды, раствор замораживали и лиофилизовали. Лиофилизат растворяли в 30 мл воды и наносили на колонку с ионообменной смолой Amberlite IRA-400 (Cl- форма). Колонку промывали водой, фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали до объема ~40 мл и наносили на обращеннофазную колонку Waters X-Bridge С18, 10 мкм, 127 Å, 50×250 мм. Элюирование проводили при скорости потока элюента 50 мл/мин. Фаза А: 0,1% HCl/H2O, B: /ацетонитрил. Градиент: 0% (В)-70% (В) за 70 минут. Фракции, содержащие основной продукт, объединяли, упаривали до объема ~50 мл, замораживали и лиофилизовали. Получено 5.2 г (74%) продукта с чистотой (ВЭЖХ) 95.3%. Масс спектр: вычислено М+ 700.88, получено М+ 700.44. Аминокислотный анализ: аргинин 1.00 (1), глутаминовая кислота 0.95 (1), триптофан 1.00 (1).

Нижеследующие примеры фармакологических исследований подтверждают возможность применения заявленного Myr-Trp-Arg-Glu-OH в качестве средства с ингибирующим ДПП-4 действием.

Пример 1. Определение активности ДПП-4 in vitro с использованием рекомбинантного человеческого фермента и фермента, содержащегося в плазме крови крыс

Определение активности фермента ДПП-4 проводили с использованием в качестве хромогенного субстрата глицил-L-пролин-п-нитроанилида, из которого под действием ДПП-4 образуются дипептид глицил-L-пролин (Гли-Про) и п-нитроанилин. В присутствии ингибиторов ДПП-4 концентрация продуктов реакции снижается. Для определения использовали раствор субстрата с концентрацией 1 ммоль/л (глицил-L-пролин-п-нитроанилида), в 0,1 М Трис-буферном растворе pH=8.0 (рабочий буфер).

Аналитическую часть исследования проводили в 96-луночных планшетах. В ряды лунок вносили 20 мкл плазмы крови крыс или раствора фермента (0,025 МЕ/мл) и 40 мкл рабочего буферного раствора. Затем во все лунки добавляли 40 мкл раствора субстрата для начала реакции, после чего планшет инкубировали 30 мин при 37°C. В течение этого времени измеряли на планшетном спектрофотометре xMark™ Microplate Spectrophotometer (Bio-Rad, USA) оптическую плотность реакционной смеси при 405 нм каждые 5 минут.

После инкубации строили зависимость изменения оптической плотности при 405 нм от времени ферментной реакции D=f (t, мин) для каждого образца. Определяли линейную область изменения оптической плотности и строили линейное уравнение y=а×x+b с коэффициентом регрессии не менее 0,99. Для дальнейших расчетов использовали значение тангенса угла наклона линейной зависимости (tgα, равное значению коэффициента «а»).

Рассчитывали % ингибирующей активности по формуле:

ИА (%)=(tgαконтроль-tgαпроба)∗100/tgαконтроль,

где tgαконтроль - тангенс угла наклона линейной зависимости, полученной для положительного контроля (100% активности фермента); tgαпроба - тангенс угла наклона линейной зависимости, полученной для испытуемых проб (пробы с испытуемыми препаратами и специфическим ингибитором).

По результатам анализа серии растворов исследуемых препаратов с различными концентрациями, для которых значения ИА (%) находятся в диапазоне от 10 до 90% строили зависимость ИА от концентрации препарата (мг/мл). По уравнению регрессии полученной зависимости определяли IC50 - концентрацию исследуемого вещества (мг/мл), вызывающую 50% ингибирование активности ДПП-4.

Для определения использовали плазму крови, полученную от аутбредных крыс-самцов возраста 10-12 недель с массой тела 200-250 г. Кровь забирали постмортально. Эвтаназия осуществлялась с помощью CO2-камеры. Животные находились там до полной потери сознания, затем животное извлекалось, вскрывалась грудная полость, и осуществлялось полное стерильное обескровливание шприцем из полостей сердца.

Кровь забирали в пробирки, в качестве антикоагулянта использовали гепарин. Отобранные пробы крови центрифугировали при 1800 g в течение 20 мин для получения плазмы при температуре +4°C. Замороженную плазму хранили до анализа при -20°C.

Перед началом количественного определения активности ДПП-4 образцы размораживали. В качестве препаратов сравнения использовали ситаглиптин и специфический ингибитор ДПП-4 - S-ЭПК. Ингибирующая активность в зависимости от дозы исследуемых препаратов представлена в таблице 2.

Ингибирующая активность исследуемой субстанции в отношении ДПП-4 плазмы крови человека и лабораторных животных представлена в таблице 3.

Для определения типа ингибирования и расчета константы Михаэлиса Кm применяли графический способ, используя двойные обратные координаты Лайнуивера-Бэрка, т.е. строили зависимости 1/v от 1/[S]. По характеру зависимостей делали вывод о типе ингибирования.

Установили, что Myr-Trp-Arg-Glu-OH проявляет свойства конкурентного ингибитора ДПП-4, при этом расчетное значение Кm на фоне использования Myr-Trp-Arg-Glu-OH составило 0,842, против 0,486 в контрольном эксперименте.

Пример 2. Определение ингибирующей активности Myr-Trp-Arg-Glu-OH in vivo

Исследование ингибирующей активности проводили при внутрижелудочном введении аутбредным крысам-самцам. Было сформировано 7 групп животных по 10 штук в каждой. Myr-Trp-Arg-Glu-OH вводили в трех дозах: 0,1 мг/кг, 1,0 мг/кг и 10 мг/кг. Препарат сравнения ситаглиптин вводили в дозе 100 мг/кг (Fukuda-Tsuru, Anabuki, Abe et al. (2012). A novel, potent, and long-lasting dipeptidyl peptidase-4 inhibitor, teneligliptin, improves postprandial hyperglycemia and dyslipidemia after single and repeated administrations. European journal of pharmacology, 696(1), 194-202) и дополнительно в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг. Активность ДПП-4 оценивали до введения, через 1, 6 и 24 часа после введения объектов. Кровь для анализа отбирали из хвостовой вены в объеме 0,5 мл в гепаринизированные пробирки. Затем центрифугировали в течение 15 минут (1800 g, 4°C). Полученную плазму крови до анализа хранили при температуре -20°C. Аналитическую часть исследования и расчет ингибирующей активности проводили аналогично примеру 1. Результаты определения представлены на рисунке 3.

Введение ситаглиптина в дозе 100 мг/кг приводило к 90% ингибированию через 1 час и 6 часов и уменьшалось до 20% через 24 часа после введения, что согласуются с литературными данными. Однократное введение Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 0,1 мг/кг не оказало влияния на активность фермента ДПП-4. Введение Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 1 мг/кг оказало ингибирующее действий (17%) через 6 ч. При введении Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 10 мг/кг активность фермента была снижена в среднем на 34% и была выраженной в течение суток наблюдения.

Пример 3 Получение таблеток, покрытых оболочкой

Просеянные порошки Myr-Trp-Arg-Glu-OH в количестве 20 г, 162 г микрокристаллической целлюлозы и 6 г кросповидона перемешивают до однородности и увлажняют 40% раствором поливинилпирролидона низкомолекулярного, массу гранулируют, гранулят сушат при 45-55°C до остаточной влаги 2,0-3,0%. Сухое вещество вновь гранулируют, к грануляту добавляют 2 г стеарата магния и таблетируют на таблеточном прессе, получая таблетки-ядра, которые содержат 10 мг Myr-Trp-Arg-Glu-OH.

Состав для желудочно-растворимого покрытия готовят следующим образом. 6,5 г гидроксипропилметилцеллюлозы при перемешивании всыпают в 69,5 г воды и оставляют для набухания при перемешивании. Отдельно готовят раствор полиэтиленгликоля из 3 г, 1 г полисорбата и 12,5 г воды, добавляют в него 4,5 г талька и 3 г титана двуокиси, перемешивают, полученную суспензию добавляют в раствор гидроксипропилметилцеллюлозы. Смесь перемешивают до однородности и используют для нанесения покрытия на таблетки-ядра до получения равномерного покрытия со средним увеличением веса таблетки приблизительно на 2,5-3%.

Пример 4 Мягкие капсулы с кишечнорастворимой оболочкой.

Myr-Trp-Arg-Glu-OH в количестве 333 г растворяют при перемешивании в 1667 г среднецепочечных триглицеридов. Отдельно готовят раствор полисахарида агар-агара и получают мягкие капсулы по 0,3 г с кишечнорастворимым покрытием в соответствии с заявкой 2014142863 (от 23.10.2014).

Таким образом, снижение активности ДПП-4 приводит к стабилизации поступившего извне инкретина, т.е применением Myr-Trp-Arg-Glu-OH можно контролировать расщепление инкретина в крови, чем достигается нормализация уровня инкретинов. Из этого следует возможность применения Myr-Trp-Arg-Glu-OH для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний/заболеваний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой IV, предпочтительно для нормализации уровня инкретинов в крови и/или нормализации функции эндотелиальных клеток.

1. Средство для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4, содержащее действующее вещество и фармацевтически приемлемый носитель или носители, которое в качестве действующего начала включает миристоил-трипептид или его гидраты, сольваты или соли следующей структуры:
Myr-Trp-Arg-Glu-OH

2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что представляет собой одну из следующих лекарственных форм, пригодных для перорального или парентерального применения: сублингвальные таблетки, таблетки и капсулы, раствор для инъекций, назальный спрей, назальные капли, суббукальный пластырь, ректальные суппозитории.

3. Средство по п. 1 или 2, отличающееся тем, что количество действующего начала (Myr-Trp-Arg-Glu-OH) в единичной дозе средства составляет: от 1 мг до 50 мг, более предпочтительно 5 мг.

4. Средство по п. 1 или 2, отличающееся тем, что действующее вещество находится в виде его соли - гидрохлорида.

5. Средство по п. 1 или 2, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной онкологии, фармакологии, патологической физиологии. Для увеличения осмотической резистентности мембран эритроцитов в условиях экспериментального канцерогенеза предложено использовать ресвератрол.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для повышения адаптации организма человека в высокогорье. Композиция для повышения адаптации организма человека в высокогорье, в виде мармелада, содержащая порошок женьшеня, порошок кипрея, пектин, сушеный мед и солевой комплекс, при этом солевой комплекс состоит из лактата кальция, хлорида калия, хлорида натрия, взятые в определенном соотношении.

Изобретение относится к медицине и касается применения катионного тетрапептида Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2 в качестве ингибитора митохондриальной синтазы оксида азота. Изобретение обеспечивает лучшую по сравнению со средством-прототипом (унитиол) выживаемость подопытных животных при нарушениях мозгового кровообращения, более позднее наступление судорог и существенное увеличение продолжительности жизни подопытных животных в условиях гиперкапнической гипоксии.

Изобретение относится к кристаллической форме меглюмина 6-карбокси-2-(3,5-дихлорфенил)-бензоксазола, где указанная кристаллическая форма имеет порошковую рентгенограмму, содержащую пики при углах дифракции (2θ) 10,7±0,2, 11,8±0,2, 13,3±0,2, 14,8±0,2, 17,9±0,2, 21,4±0,2 и 21,7±0,2.

Предложена пероральная композиция для лечения заболеваний и/или расстройств, которые можно лечить при помощи S-аденозил-L-метионина. Композиция содержит S-аденозил-L-метионин («SAM-е» или «SAMe») и один или более сложных эфиров галловой кислоты, выбранных из этилгаллата, изоамилгаллата, пропилгаллата и октилгаллата, причем соотношение (масса:масса) сложного эфира галловой кислоты к S-аденозилметионину составляет от 1:1 до 1:80.

Изобретение относится к медицине, а именно к спортивной медицине, и может быть использовано для восстановления спортсменов в период интенсивных физических нагрузок.

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для лечения и профилактики дисбиозов животных. Способ включает приготовление препарата путем смешивания изъятой цитрированной крови убойного животного крупного рогатого скота с молочной сывороткой, сквашенной при 37°C чистыми культурами в дозе Lactobacillus plantarum 2×109 КОЕ, Lactobacillus fermentum 2×109 КОЕ и Bifidobacterium bifidum 5×108 КОЕ.

Изобретение относится к новым производным транс-2-деценовой кислоты, представленным формулой (1′), или к их фармацевтически приемлемым солям, в которой значения для групп Y′, W′ определены в формуле изобретения.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и реконструктивно-пластической хирургии. Выполняют подкожную мастэктомию и лимфаденэктомию с одномоментной реконструкцией силиконовым имплантатом.

Изобретение относится к способу получения средства из корней астрагала перепончатого, обладающего адаптогенным действием. Указанный способ характеризуется тем, что проводят ультразвуковую экстракцию измельченного растительного материала 55-65% этиловым спиртом в соотношении сырье:экстрагент 1:(8-10) в течение 20-30 мин, далее растительный материал экстрагируют дважды тем же экстрагентом в соотношении сырье:экстрагент 1:(18-20) при температуре 85-90°С в течение 80-100 мин, затем спиртовые извлечения объединяют и концентрируют, сгущенный экстракт высушивают и измельчают.

Изобретение относится к цитотоксическим пентапептидам формулы (I), к их конъюгатам антитело-лекарственное средство и фармацевтическим композициям. Соединения обладают противоопухолевой активностью и предназначены для лечения рака.

Изобретение относится к области лекарственных соединений. Предложены пирувамидные соединения формулы (X), которые ингибируют аллерген пылевых клещей 1 группы, представляющий собой пептидазу, например, Der p 1, Der f 1, Eur m 1.
Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается фармацевтической композиции, содержащей пептид, выбранный из группы pGLU-ASN-TRP-LYS-C8, pGLU-ASN-TRP-TRP и pGLU-ASN-TRP для местного применения для уменьшения интенсивности симптомов кожного нарушения у субъекта, где кожное нарушение выбрано из группы, состоящей из вирусной инфекции герпеса, вирусной инфекции ветряной оспы, сыпи, укусов насекомых, укусов медуз, ожогов, псориаза, зуда, кожной аллергической реакции, поражений кожи, вызванных побочными эффектами или осложнениями после применения лекарственного средства или терапевтического лечения, где симптомы выбраны из группы, состоящей из покраснения кожи, отека, зуда, покалывания, ощущения жжения, сыпи, водянки, очагов поражения, волдырей и псориатического шелушения, где непосредственно лечение боли исключено.

Изобретение относится к применению соединений на основе тетрапептидных и трипептидных групп и соответствующих пептоидных групп при лечении или профилактике ракового заболевания у человека, которое характеризуется повышенным уровнем экспрессии или активности Gadd45β по сравнению с обычными здоровыми клетками, в случае зависимости жизнеспособности и/или роста раковых клеток от NF-κB.

Изобретение относится к области биоорганической химии, в частности к алифатическим производным трипептидов, полярная часть которых состоит из аминокислотных последовательностей OrnOrnGlu, LysLysGlu, OrnLysGlu, LysOrnGlu, а гидрофобная часть представлена остатками спиртов с длиной цепи C8-C16, и способу их получения.
Пептид // 2572623
Изобретение относится к пептидам, выбранным из FSY или FTY, для лечения или профилактики состояния, при котором полезно ингибирование АПФ, и их фармацевтическим композициям.

Изобретение относится к пептидам, включающим фикоцианобилин (PCB), и медицинскому применению указанных пептидов и PCB, благодаря идентифицированному у них нейропротекторному и/или нейрорегенеративному действию.

Группа изобретений относится к долговременному применению парентерального состава для производства лекарственного препарата для лечения субъекта, инфицированного ВИЧ, причем данный препарат предназначен для подкожной или внутримышечной инъекции и состоит из бреканавира, или его соли в форме водной суспензии микро- или наночастиц, содержащей полисорбат-20, и вводится периодически с интервалами от 6 до 12 месяцев и к указанной фармацевтической композиции.

Изобретение относится к циклическим тетрапептидам формулы I, их фармацевтическим композициям, способу получения тетрапептидов формулы I и набору, содержащему соединения формулы I.

Изобретение относится к медицине и касается применения синтетического пептида общей формулы H2N-L-Glu-L-Trp-D-Ala-COOH в качестве средства для заживления ран, обладающего иммуностимулирующим эффектом.
Изобретение относится к медицине, в частности к фармации и косметологии, и предназначено для обесцвечивания слизистых оболочек и кожи в местах кровоподтеков. Раскрыто отбеливающее средство, представляющее собой водный раствор для инъекций под слизистую оболочку, под кожу или внутрь кожи, содержащий натрия этилендиаминтетраацетат, перекись водорода, натрия гидрокарбонат, лидокаина гидрохлорид и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов, мас.%: Натрия этилендиаминтетраацетат 0,25 Перекись водорода 0,01-0,03 Натрия гидрокарбонат 1,7 Лидокаина гидрохлорид 0,125-0,25 Вода для инъекций - остальное Изобретение обеспечивает эффективное и безопасное инфильтрационное обезболивание и отбеливание тканей при кровоподтеках, отсутствие токсического действия после всасывания раствора в кровь, безболезненность инъекций раствора под слизистую оболочку, под кожу и внутрь кожи, исключает местное раздражающее действие раствора на ткани и их постинъекционное воспаление и некроз.
Наверх