Рацемический 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-d-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток mcf-7

Изобретение относится к рацемическому 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триену формулы

в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток МСF-7. Технический результат: получено новое соединение, обладающее свойствами ингибитора роста клеток рака молочной MCF-7.

 

Изобретение относится к синтезу рацемического 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триена, ингибирующего пролиферацию опухолевых клеток МСF-7. Это предполагает возможность его применения в медицине.

Рак молочной железы (РМЖ) у женщин является «ведущим» онкологическим заболеванием [1]. 60-70% опухолей этой локализации эстрогенозависимы [1], т.е. скорость пролиферации опухолевых клеток значительно возрастает в присутствии этой группы гормонов. В настоящее время разрабатывается новая стратегическая линия лечения таких заболеваний под действием различных носителей, содержащих сульфаматную группу [2]. Этот подход считают весьма перспективным, поскольку сульфаматы стероидных эстрогенов могут ингибировать рост различных видов злокачественных опухолей [3-5]. Как правило, используют модифицированные стероидные эстрогены с сульфаматной группой при С-3, единственным исключением является соединение (I) [6] – прототип.

(I)

Целью изобретения является создание новых ингибиторов роста клеток рака молочной MCF-7, подобных стероиду (I).

Поставленная цель достигается синтезом рацемического 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триена (II), отличающегося от стероида (I) величиной кольца D. В принципе это должно способствовать более легкому проникновению данного соединения в опухолевые клетки. Дополнительным преимуществом схемы синтеза является большая доступность исходного стероида (III) по сравнению с использованным ранее при получении сульфамата (I).

Схема синтеза сульфамата (II) представлена ниже.

Ацетат 2-ацето-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен-17аβ-ола (IV).

К раствору 5 г соединения (Ш) [7] в 50 мл нитробензола и 2 мл уксусного ангидрида добавляют раствор 7 г хлористого алюминия в 50 мл нитробензола при 0oC. Реакционную смесь перемешивают при 5oC в течение 24 ч, после чего выливают в 300 мл воды со льдом. Продукты реакции экстрагируют тремя порциями хлороформа по 150 мл, объединенный экстракт промывают равным объемом 1%-ного раствора бикарбоната натрия, затем равным объемом воды, сушат над сульфатом натрия. Осушитель отфильтровывают, растворители удаляют в вакууме при давлении 4 мм рт. столба и температуре 75ºC, остаток кристаллизуют из смеси хлороформ-метанол. Получают 4.44 г соединения (IV) (выход 79%, т. пл. 191.5-193ºС).

Найдено, %: С 74.85; Н 8.44. С24Н32О4. Вычислено, %: С 74.97; Н 8.39.

2,17аβ-Диацетокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен (V). К раствору 1 г соединения (IV) в 20 мл хлористого метилена добавляли 600 мг Na2HPO4 и 800 мг м-хлор-надбензойной кислоты в 20 мл хлористого метилена. Реакционную смесь перемешивали 20 ч при комнатной температуре, а затем выливали в 350 мл диэтилового эфира. После обычной обработки органическую фазу промывали равным объемом насыщенного раствора бикарбоната натрия, а затем водой до нейтральной реакции. Растворители удаляли в вакууме, остаток кристаллизовали из смеси этилацетат-гексан, получали 780 мг (75%) соединения (V), т. пл. 178.5-179.5ºС.

Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 122.4 (С1), 137.6 (С2), 148.5 (С3), 111.9 (С4), 134.8 (С5), 31.0 (С6), 20.8 (C7), 37.1 (С8), 39.6 (С9), 134.1 (С10), 27.6 (С11), 37.1 (С12), 41.2 (С13), 46.4 (С14), 23.9 (С15), 25.4 (С16), 27.0 (С17), 81.5 (C17a), 13.5 (С18), 55.7 (СН3О), 20.9 и 170.7 (ацетильная группа при С17а), 20.3 и 169.2 (ацетильная группа при С2).

Масс-спектр, m/z (%): 400 (15), 358 (100), 243 (2), 189 (6), 188 (4), 187(4), 176 (9), 175 (8), 163 (4), 150 (4), 137 (6).

Найдено, %: С 72.12; Н 8.14. С24Н32О5. Вычислено, %: С 71.97; Н 8.05.

2,17аβ-Дигидрокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен (VI).

К раствору 200 мг 2,17aβ-диацетокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триенa (V) в смеси 5 мл бензола и 3 мл метанола добавляют 150 мг NaOH и перемешивают 2 часа при 50ºС, ход реакции контролируют методом ТСХ. Реакционную смесь выливают в 1н HCl (10 мл), экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Органические слои промывают водой (2×5 мл), насыщенным раствором хлористого натрия (1×15 мл), сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют на роторном испарителе, остаток кристаллизуют из метанола. Получают 145 мг (95%) продукта гидролиза, т. пл. 210-212ºС.

Спектр ЯМР 1Н (DMSO, δ, м.д.): 8.49 с (1H), 6.51 с (1Н), 6.48 с (1Н), 4.26 с (1Н), 3.69 с (3H), 3.01 д (1H, J=21.1 Гц) 2.59 т (1H, J=13.8 Гц), 2.47-2.37 м (2H), 1.83-1.49 м (9H), 1.35-1.24 м (3H) 1.16-1.03 м (2H) 0.78 с (3Н).

Спектр ЯМР 13С (DMSO, δ, м.д.): 146.50, 145.22, 134.79, 127.10, 116.39, 112.93, 79.35, 56.41, 47.02, 42.07, 42.23, 39.10, 38.70, 31.58, 31.33, 29.00, 26.54, 25.25, 22.01 13.35

Найдено, %: С 75.84, Н 8.90. С20Н28О3. Вычислено, %: С 75.91; Н 8.92.

2,17аβ-Дисульфамоил-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен (II).

К раствору 100 мг 2,17аβ-дигидрокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триена (VI) в 2 мл сухого диметилацетамида при комнатной температуре добавляют 150 мг сульфамоилхлорида, реакционную смесь перемешивают 8 ч при комнатной температуре в атмосфере аргона. Реакционную смесь выливают в насыщенный раствор хлористого натрия (10 мл), продукты реакции экстрагируют тремя порциями этилацетата по 5 мл. Объединенную органическую фазу промывают двумя порциями воды по 5 мл, равным объемом насыщенного раствора хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия. Осушитель отфильтровывают, растворители удаляют в вакууме, остаток кристаллизуют из метанола, получают 105 мг (70%) целевого продукта, т. пл. 212-214ºС.

Спектр ЯМР 1Н (DMSO, δ, м.д.): 7.80 с (2H), 7.35 с (2H), 7.05 с (1Н), 6.78 с (1Н), 4.00 м (1Н), 3.74 с (3H), 2.85-2.61 м (4H) 2.05-1.92 м (2H), 1.87-1.15 м (11H), 0.88 с (3Н).

Спектр ЯМР 13С (DMSO, δ, м.д.): δ 150.23, 137.85, 135.86, 134.27 124.01, 113.77, 89.14, 56.58, 47.04, 41.55, 41.22, 38.78, 37.95, 31.58, 28.58, 28.43, 25.92, 24.81, 14.09.

Найдено, %: С 50.72, Н 6.43 N 5.74. С20Н30N2О7S2. Вычислено, %: С 50.61; Н 6.37 N 5.90.

Исследовали влияние стероида (II) на рост перевиваемой культуры клеток человека MCF-7 (аденокарцинома молочной железы). В качестве отрицательного контроля использовали нормальные кожные фибробласты человека (КФЧ) ранних пассажей. Клетки культивировали во флаконах Карреля в среде DMEM/F12 (Биолот) с добавлением 1% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота (Биолот), без антибиотиков, в 5% СО2 атмосфере, при 37оС. Клетки высаживались на флаконы Карреля по 50 х 104 клеток на флакон. Для изучения пролиферативной активности клеток через 24 часа после посева в культуральную среду заменяли на среду, содержащую ингибитор сульфатазы до конечной концентрации 50 мкг/мл, после чего инкубировали данные опухолевые клеточные линии в течение различных промежутков времени (от 24 до 72 ч). Конечная концентрация ДМСО в культуральной среде не превышала 0.5%. Для исключения цитотоксического действия ДМСО проводили опыты с добавлением ДМСО без ингибитора сульфатазы. Для исключения неспецифического губительного действия веществ использовались нормальные кожные фибробласты человека. Далее клетки снимали раствором версена-трипсина (Биолот), рассеивали на флаконы Карреля, содержащие новую полную культуральную среду. Подсчет клеток проводили в момент достижения необработанными контрольными клетками максимальной плотности клеток на единицу площади поверхности культурального флакона (монослой), при этом их количество определялось как 100 %. Оказалось, что при концентрации стероида (II) 20 мкг/мл рост опухолевых клеток тормозится примерно в той же степени, что и под действием применяемого в клинической практике тамоксифена. При этом стероид (II) не тормозил рост нормальных кожных фибробластов человека. Этот результат весьма важен, так как механизмы действия стероида (II) и тамоксифена различны.

Литература

[1] Gururaj A.E., Rayala S.K., Vadlamudi R.K., Kumar R. Novel mechanisms of resistance to endocrine therapy: genomic and nongenomic considerations // Clin. Cancer Res. 2006. Vol. 12, pp. 1001s-1007s.

[2] Thomas M.P., Potter B.V.L. Estrogen O-sulfamates and their analogues: Clinical steroid sulfatase inhibitors with broad potential //J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2015. Vol. 153 (September), pp. 160-169.

[3] Leese M.P., Hejaz H.A.M., Mahon M.F., Newman S.P., Purohit A., Reed M.J., and Potter B.V.L. A-Ring-Substituted Estrogen-3-O-sulfamates: Potent Multitargeted Anticancer Agents // J. Med. Chem. 2005. Vol. 48, N 16, pp. 5243-5256.

[4] Leese M.P., Leblond B., Smith A., Newman S.P., Di Fiore A., De Simone G., Supuran S.T., Purohit A., Reed M.J., Potter B.V.L. 2-Substituted estradiol bis-sulfamates, multitargeted antitumor agents: synthesis, in vitro SAR, protein crystallography, and in vivo activity // J. Med. Chem. 2006. Vol. 49, N 26, pp. 7683-7696.

[5] Jourdan F., Leese M.P., Dohle W., Hamel E., Ferrandis E., Newman S.P., Purohit A., Reed M.J., Potter B.V.L. Synthesis, antitubulin, and antiproliferative SAR of analogues of 2-methoxyestradiul-3,17-O,O-bis-sulfamate. J. Med. Chem. 2010. Vol. 53, N 7, pp. 2942-2951.

[6] Морозкина С.Н., Дроздов А.С., Ковалев Р.А., Филатов М.В., Шавва А.Г. Рацемический 2,17β-дисульфамоилокси-3-метокси-8α-эстра-1,3,5(10)-триен в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток МСF-7. Патент РФ 2562242 (2015).

[7] Ржезников В.М., Ананченко С.Н., Торгов И.В. Восстановление D-гомостероидов с ароматическим кольцом А щелочными металлами по Берчу. Химия природных соеди-нений. 1965. № 2, с. 90-100.

Рацемический 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен формулы

в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток МСF-7.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к способу получения бетулина из березовой коры, включающему измельчение коры, экстракцию спиртом, отделение раствора с последующим удалением из него растворителя, в котором измельченную бересту добавляют в нагретый до 75°C изопропиловый спирт в соотношении спирт : береста 5:1, при этом смесь дополнительно обрабатывают ультразвуком при температуре 75-82°C в течение 1-1,5 часов.
Изобретение относится к способу переработки внешней берёзовой коры, включающему выделение бетулина и субериновых кислот, заключающемуся в экстракции бетулина регенерируемой смесью EtOAc-вода (~3.5% Н2О), с последующей обработкой коры горячей водой, содержащей EtOAc для гидродистилляции органического растворителя, а затем водным раствором неорганического основания с извлечением солей субериновых кислот.

Изобретение относится к лекарственному средству, обладающему противовоспалительной активностью, содержащему в качестве активного ингредиента N-(2-гидроксиэтил)-3β-гидроксиурс-12-ен-28-амид формулы .Технический результат: получено новое эффективное лекарственное средство, обладающее противовоспалительной активностью.

Изобретение относится к способу получения гликопептидов тритерпенового гликозида - глицирризиновой кислоты общей формулы (lIa-g) В предложенном способе продукт получают из глицирризиновой кислоты (ГК) без предварительной защиты гидроксильных групп углеводной части молекулы, превращая ее в активированный трис-оксибензотриазольный эфир с помощью N-гидрооксибензотриазола (HOBu) и N,N'-дициклогексилкарбодиимида (DCC) или трис-оксисукцинимидный эфир с помощью N-гидроксисукцинимида (HOSu) и DCC в среде тетрагидрофурана или диоксана при 0-+5°C 1 ч, 20-22°C - 24 ч, затем образующийся активированный эфир вводят в реакцию с аминокислотой (АК) (L-фенилаланин, L-тирозин, L-лейцин, L-изолейцин, L-метионин, L-валин, S-бензил-L-цистеин) в растворе 1N водного раствора гидроокиси натрия и N,N'-диметилформамида при мольном соотношении реагентов ГК/HOBt/DCC/AK, равном 1/3.0-3.5/3.0-3.5/4-5, или ГК/HOSu/DCC/AK=1/4-5/3.0-3.5/4-5.

Изобретение относится к способу получения дифталата бетулинола формулы ацилированием бетулинола, в котором в качестве ацилируюшего агента используют фталевую кислоту, и ацилирование проводят сплавлением бетулинола с фталевой кислотой при температуре 180-200°С в течение 2-3 минут при мольном соотношении бетулинола и фталевой кислоты, равном 1:3, с последующей перекристаллизацией целевого продукта из этанола.

Изобретение относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, имеющему структуру: Изобретение также относится к другим индивидуальным соединениям и их фармацевтически приемлемым солям, структурные формулы которых указаны в формуле изобретения, к фармацевтической композиции для ингибирования репликации ВИЧ и к способу лечения ВИЧ-инфекции.

Изобретение относится к способу получения диацетата бетулинола, проявляющего противоопухолевую активность. Диацетат бетулинола получают ацетилированием бетулинола уксусной кислотой в присутствии каталитических количеств ортофосфорной кислоты в среде толуола с удалением воды, образующейся в ходе реакции.

Изобретение относится к способу получения новых потенциально биологически активных производных бетулиновой кислоты - сульфобетаинов с фрагментом 3-(диметиламмоний)пропан-1-сульфоната в положении С-3 и с фрагментом 4-(диметиламмоний)бутан-1-сульфоната в положениях С-3 или С-28 общей формулы (1, 2а, б, 3).

Изобретение относится к способу получения бетулоновой кислоты из наружного слоя коры березы (бересты), которая является промежуточным продуктом для получения бетулиновой кислоты и других биологически активных веществ.

Изобретение относится к получению дипропионата бетулинола - биологически активного вещества, проявляющего противоопухолевую активность. Дипропионат бетулинола получают в одну стадию кипячением бетулинола с пропионовой кислотой в присутствии каталитических количеств ортофосфорной кислоты в среде толуола с удалением воды, образующейся в ходе реакции, при этом концентрация пропионовой кислоты в реакционной смеси 13,3 мас.

Изобретение относится к соединениям формулы (Ie) или его фармацевтически приемлемым солям: где Z представляет собой NR7R8 или S(O)aR7, где а имеет значение 0; R1 представляет собой Н или C1-С6 алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из гидроксила, C1-С6 алкоксила; каждый из R2 и R4, независимо, представляет собой -Q1-T1, где Q1 представляет собой связь или С1-С3 алкильный линкер, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена и гидроксила, и Т1 представляет собой Н, С1-С3 алкил; R3 представляет собой Н или галоген; R5 представляет собой Н или C1-C6 алкил; R6 представляет собой Н, галоген, -C(O)NRaRb или RS2, где RS2 представляет собой C1-С6 алкил или 4-12-членный гетероциклоалкил, содержащий от 0 до 3 гетероатомов в кольце, выбранных из О, N или S, и где каждый из Ra и Rb, независимо, представляет собой Н, C1-С6 алкил или Ra и Rb вместе с N атомом, с которым они связаны, образуют 4-12-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, выбранный из О, N или S; R7 представляет собой -Q4-T4, где Q4 представляет собой связь или С1-С4 алкильный линкер и Т4 представляет собой Н, C1-С6 алкил, С3-С8 циклоалкил, С(О)-C1-С6алкил или 4-14-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома в кольце, выбранных из О, N или S, каждый из которых необязательно замещен одним или несколькими -Q5-T5, где Q5 представляет собой связь, С(О), C(O)NRk, NRkC(O) или С1-С3 алкильный линкер, где Rk представляет собой Н или C1-С6 алкил, и Т5 представляет собой Н, C1-С6 алкил; R8 представляет собой Н, C1-С6 алкил, необязательно замещенный галогеном или C1-С6 алкоксилом, С2-С6 алкенил, С3-С8 циклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома в кольце, выбранных из О, N или S; или R7 и R8 вместе с N атомом, с которым они связаны, образуют 4-12-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 0-2 дополнительных гетероатома, выбранных из О, S или N, и 4-12-членное гетероциклоалкильное кольцо, которое образуют R7 и R8, необязательно замещен одним или несколькими -Q6-Т6, где Q6 представляет собой связь или С1-С3 алкильный линкер и Т6 представляет собой Н, галоген, C1-С6 алкил; и R12 представляет собой галоген, C1-C6 алкоксил, С2-С6 алкенил или C1-С6 алкил, необязательно замещенный галогеном.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к полиморфам N4-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-N6-(4,4-диметил-4,5-дигидрооксазол-2-ил)хиназолин-4,6-диамина.

Изобретение относится к соединению общей формулы (I) в которой X представляет собой группу (С1-С6)алкил, фенил, бензил, C(O)OR5 или C(O)NHR5; R1 представляет собой атом водорода или группу C(O)R6 или C(O)OR6; R2 представляет собой атом водорода или группу (С1-С6)алкил; или R2 совместно с R1 или X образуют насыщенную углеводородную цепь, которая образует 5- или 6-членный цикл; R3 представляет собой атом водорода или группу (С1-С6)алкил; R4 представляет собой атом галогена или группу (С1-С6)алкил, (C1-С6)алкокси или фенилокси, причем указанная группа возможно замещена одним или более атомами галогена; Ar представляет собой тиофенильную или фенильную группу, возможно замещенную одним атомом галогена; и R5 и R6 независимо друг от друга представляют собой группу (С1-С6)алкил, фенил-(С1-С6)алкил или фенил, возможно замещенный одним атомом галогена.

Изобретение относится к новой кристаллической форме III N-(1-трет-бутилбутил)-N'-(2-этил-3-метоксибензоил)-гидразида (R)-3,5-диметилбензойной кислоты. В настоящем изобретении также предложены композиции, содержащие кристаллическую форму III, способ ее получения и применения для регуляции экспрессии генов в клетке или в субъекте.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому производному аминометилхинолона формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где R представляет собой -С(=O)А, -С(=O)ОА, -C(=O)NHA, -C(=N-C≡N)A, -C(=N-C≡N)NHA или A; А представляет собой С1-6-алкил, фенил, низший циклоалкил, адамантил, гетероциклоалкил, выбранный из бензодиоксина, пирролидина, пиперидина, морфолина или пиперазина, гетероарил, выбранный из пиридина, пиразола, тиазола, триазола или пиримидина или бициклический гетероарил, выбранный из хинолина, хиназолина, индола, бензотиазола, бензоимидазола или имидазопиридина, возможно замещенный одним или двумя А1; каждый А1 независимо представляет собой А2 или А3; каждый А2 независимо представляет собой галогено или оксо; каждый А3 независимо представляет собой С1-6-алкил, С1-6-алкокси, фенил, бензил, гетероциклоалкил, выбранный из морфолина, пиперидина, диазепана, пирролидина, азепана или пиперазина, бициклический гетероциклоалкил, выбранный из бензодиоксола или диазобициклогептана, гетероарил, выбранный из оксазола, триазола, пиразола, имидазола, тиадиазола, оксадиазола, тиазола или тетразола, амино, С1-6-алкиламино, C1-6-диалкиламино, амидо, группу С1-6-алкилового сложного эфира, сульфонил, сульфонамидо, -С(=O) или -С(=O)O, возможно замещенные одной, двумя или тремя группами, выбранными из галогено, гидрокси, С1-6-алкил, С1-6-алкокси, фенил, гидрокси-циклоалкил, где циклоалкил представляет собой адамантил, амино, С1-6-алкиламино, С1-6-диалкиламино, трет-бутилового сложного эфира карбаминовой кислоты, (С1-6-алкил)-сульфонил-пиперидинил или гидрокси-(С1-6-алкил); R' представляет собой Н или метил; X представляет собой СХ'; X' представляет собой Н или галогено; X1 представляет собой Н, 2-оксазолил, диметиламидо или группу С1-6-алкилового сложного эфира; Y представляет собой СН или N; и Y1 представляет собой Н, галогено, С1-6-алкокси или галогено-(С1-6-алкил).

Изобретение относится к применению комбинации соединения формулы (III) с одним или несколькими дополнительными лекарственными средствами для изготовления лекарственного средства для применения в терапии, которые ингибируют активность антиапоптотических белков Bcl-2.

Настоящее изобретение относится к биохимии, в частности к композиции для лечения заболевания и способам лечения заболевания, сопровождающегося повышенной экспрессией матриксной металлопротеиназы MMP-9.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен рекомбинантный ген, кодирующий белок L1 вируса папилломы человека 16 типа, с кодонами, оптимизированными для гетерологичной экспрессии в штаммах Е.

Изобретения относятся к области медицины и вирусологии. Представлены аттенуированные вирусы гриппа А, векторы на их основе и содержащие их фармацевтические композиции.

Изобретение относится к новым бициклическим соединениям пиперазина формулы I, , а также к их фармацевтически приемлемым солям. Технический результат: получены новые соединения формулы I, обладающие модулирующей активностью в отношении тирозинкиназы Брутона (Btk), которые могут быть использованы для приготовления фармацевтических композиций, а также для лечения иммунных расстройств, таких как воспаление, опосредованное киназой.

Изобретение относится к фармакологии и медицине. Предложено применение эстетрола для лечения повреждения головного мозга в области гиппокампа.

Изобретение относится к рацемическому 2,17аβ-дисульфамоилокси-3-метокси-D-гомо-8α-эстра-1,3,5-триену формулы в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток МСF-7. Технический результат: получено новое соединение, обладающее свойствами ингибитора роста клеток рака молочной MCF-7.

Наверх