Способ прогнозирования риска развития гипертонической болезни с учетом генетических и средовых факторов

Изобретение относится к области медицины, а именно к прогнозированию риска развития гипертонической болезни у индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья. Для этого проводят выделение ДНК из периферической венозной крови. Анализ полиморфизмов генов, отличающийся тем, что анализируют полиморфизмы генов факторов роста rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR2. Устанавливают наличие у респондента средовых факторов риска развития гипертонической болезни, а именно определяют статус курения. Прогнозируют высокий риск развития гипертонической болезни при выявлении сочетания генотипа GG rs6214 IGF-1, генотипа ТТ rs2981582 FGFR2 и положительного статуса курения. Изобретение обеспечивает получение критериев оценки риска развития гипертонической болезни у указанной категории пациентов с учетом сочетания генетических и средовых факторов. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования риска развития гипертонической болезни (далее ГБ).

Гипертоническая болезнь (ГБ) является самым распространенным сердечно-сосудистым заболеванием, частота которого в общей популяции людей старше 65 лет превышает 50%, а смертность в результате осложнений ГБ составляет 9,4 млн. случаев в год [Перcпективы лечения артериальной гипертонии [Текcт] / Ж.Д. Кобалова, Ю.В. Котовcкая, C.В. Виллевальде [и др.] // Артериальная гипертензия. – 2013. – Т. 19, № 4. – C. 280-289]. Системное повышение уровня артериального давления является результатом сложных взаимодействий между генетическими факторами, факторами окружающей среды и образом жизни [Рекомендации по диагноcтике и лечению артериальной гипертензии [Текcт] / И.Е. Чазова, Е.В. Ощепкова, Ю.В. Жернакова // Кардиологичеcкий веcтник. – 2015. – № 1. – C. 3-30].

Значимый вклад в развитие гипертонической болезни вносят генетические факторы (от 30 до 80%, в зависимости от популяции) [Генетический взгляд на феномен сочетанной патологии у человека [Текст]/ В.П. Пузырев // Медицинская генетика. – 2008. – Т. 7. – № 9. – С. 3-9]. Высокая смертность, широкая распространенность заболевания, а также значительный риск развития таких грозных осложнений, как инфаркт миокарда и острое нарушение мозгового кровообращения диктуют необходимость выделения критериев индивидуального прогнозирования риска развития гипертонической болезни на основании изучения полиморфных вариантов генов-кандидатов и средовых факторов риска с целью выявления индивидуумов, предрасположенных к данному заболеванию.

В патогенез гипертонической болезни вовлечены многочисленные механизмы, в настоящее время интерес отечественных и зарубежных исследователей направлен на изучение роли неспецифического воспаления в развитии данного заболевания [Role of inflammatory gene polymorphisms in left ventricular dysfunction (LVD) susceptibility in coronary artery disease (CAD) patients [Tехt] / A. Mishra, A. Srivastava, T. Mittal [еt аl.] // Cytokine. – 2013. – №61 (3). – Р. 856-861].

Установлено, что важнейшую роль в процессах воспаления играют цитокины [Анализ межгенных взаимодействий полиморфных локусов генов цитокинов у больных эссенциальной гипертензией [Текст] / Я.Р. Тимашева, Т.Р. Насибуллин, И.А. Туктарова [и др.] // Артериальная гипертензия. –2012. – №5. – С. 431-437]. Это обширная группа пептидов, отвечающих за регуляцию воспаления, ангиогенеза, неспецифических защитных реакций организма, а также участвующих в процессах роста и дифференцировки клеток и регенерации тканей [Pro-inflammatory cytokine gene polymorphisms and threat for coronary heart disease in a North Indian Agrawal population [Tехt] / P.R. Garg, K.N. Saraswathy, A.K. Kalla [еt аl.] // Gene. – 2013. – №514 (1). – Р. 69-74]. Особый интерес с точки зрения вовлеченности в патогенез ГБ среди цитокинов представляют факторы роста, а именно, инсулиноподобный фактор роста первого типа и рецептор фактора роста фибробластов второго типа.

Инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF1) – полипептид с молекулярной массой 7,6 кДа, сходный по структуре и выполняемым функциям с инсулином. Активный белок состоит из 70 аминокислот, образуется из неактивного предшественника при связывании со специфическим рецептором. Ген, кодирующий IGF1, расположен на длинном плече 12 хромосомы (12q23.2) и включает семь экзонов [Insulinlike Growth Factor-1 and Its Binding Protein-3 Polymorphisms Predict Circulating IGF-1 Level and Appendicular Skeletal Muscle Mass in Chinese Elderly [Tехt] / C.W. Yang, T.C. Li, C.I. Li [еt аl.] // J Am Med Dir Assoc. – 2015. – Vol. 1, №16 (5). – Р. 365-370]. В 3'-нетранслируемой области гена находится полиморфизм rs6214 IGF-1, представляющий собой замену гуанина на аденин в позиции 2750. Установлено, что при носительстве аллеля А по локусу rs6214 IGF-1 снижается экспрессия соответствующего белка [Associations of IGF-1 gene variants and milk protein intake with IGF-I concentrations in infants at age 6 months – results from a randomized clinical trial (European Childhood Obesity Trial Study Group) [Tехt] / P. Rzehak, V. Grote, E. Lattka [еt аl.] // Growth Horm IGF Res. – 2013. – №23 (5). – Р. 149-158]. Согласно данным литературы, данный SNР ассоциирован с развитием сердечно-сосудистых заболеваний [Polymorphisms of IGFI contribute to the development of ischemic stroke [Tехt] / H.J. Kim, S.K. Kim, H.J. Park [еt аl.] // Exp Ther Med. – 2012. – №3(1). – Р. 93-98].

Рецептор фактора роста фибробластов 2 (FGFR2) – представитель семейства рецепторов фактора роста фибробластов, отличающегося высокой консервативностью аминокислотной последовательности. Ген, кодирующий FGFR2, расположен на длинном плече хромосомы 10, в локусе 10q26.13 и включает 26 экзонов. Интронный полиморфизм rs2981582 FGFR2 представляет собой замену цитозина на тимин в позиции 906, что приводит к увеличению транскрипционной активности гена и экспрессии FGFR2 [Allele-specific up-regulation of FGFR2 increases susceptibility to breast cancer [Tехt] / K.B. Meyer, A.T. Maia, M. O'Reilly [еt аl.] // PLoS Biol. – 2008. – № 5. – Р. 108-112]. Данный полиморфизм ассоциирован с развитием осложнений гипертонической болезни [Effects of FGF receptor peptide agonists on animal behavior under normal and pathological conditions [Tехt] / O. Rudenko, V. Tkach, V. Berezin [еt аl.] // Original Research Article Neuroscience Research. – 2010. – Vol. 68, №1. – P. 35-43].

В исследованиях последних лет показано, что у курильщиков регистрируются более высокие уровни цитокинов по сравнению с некурящими индивидуумами, при этом курение оказывает важное модифицирующее влияние на характер взаимодействий полиморфизмов генов-кандидатов факторов роста при формировании гипертонической болезни [Smoking Functions as a Negative Regulator of IGF1 and Impairs Adipokine Network in Patients with Hypertension [Tехt] / M.C. Erlandsson, M.R. Doria, S.S. Tоyrа [еt аl.] // Mediators of Inflammation. – 2016. – № 3 (8). – Р. 282-290].

Отечественные исследования, посвященные исследованию вовлеченности генов факторов роста в формирование предрасположенности к ГБ и ее осложнений единичны и фрагментарны, а данные о роли генетических вариантов rs6214 IGF-1, rs2981582 FGFR2 и статуса курения в развитии гипертонической болезни отсутствуют.

В изученной научно-медицинской и доступной патентной литературе авторами не было обнаружено способа прогнозирования риска развития гипертонической болезни на основе данных о сочетаниях генетических полиморфизмов генов rs6214 IGF-1, rs2981582 FGFR2 и статуса курения.

Из области техники известен «Способ прогнозирования риска развития артериальной гипертензии» по патенту РФ №2505814 от 14.08.2012. Способ включает учет возраста, группы крови систем резус и MN, наличия или отсутствия курения, ожирения, гиперхолестеринемии, злоупотребление солью, массы тела по индексу Кетле, отношения окружности талии к окружности бедер, лабораторные показатели, социальные факторы и вычисление прогностических коэффицинтов в баллах, по которым судят о риске развития заболевания. Недостаток указанного способа заключается в том, что не рассматриваются сочетания генетических полиморфизмов генов факторов роста с риском развития гипертонической болезни и применим только для коренных жителей Республики Алтай (тубаларов).

За прототип выбран патент № 2624480 (Опубликовано: 04.07.2017) на изобретение «Способ прогнозирования риска развития эссенциальной гипертензии на основе комбинаций генов матриксных металлопротеиназ». Данный способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, анализ полиморфизмов генов матриксных металлопротеиназ и прогнозирование высокого риска развития эссенциальной гипертензии при выявлении сочетания генотипа АА rs1320632 MMР-8 и аллеля С rs11225395 MMР-8.

Недостатком прототипа является ограниченность его применения, т.к. используется только анализ полиморфизмов генов матриксных металлопротеиназ и не учитывается статус курения.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования риска развития гипертонической болезни на основе комбинаций генов факторов роста и статуса курения.

Технический результат использования изобретения – получение критериев оценки риска развития гипертонической болезни у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья с учетом генетических и средовых факторов сочетаниях, а именно, сочетания генетических вариантов локусов rs6214 IGF-1, rs2981582 FGFR2 и статуса курения.

Предложенный способ, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, анализ полиморфизмов генов, содержит новые и неизвестные из уровня техники признаки:

- анализируют полиморфизмы генов факторов роста rs6214 IGF-1, rs2981582 FGFR2;

- установливают наличие у респондента средовых факторов риска развития гипертонической болезни, а именно - определение статуса курения;

- прогнозируют высокий риск развития гипертонической болезни при выявлении сочетания генотипа GG rs6214 IGF-1, генотипа ТТ rs2981582 FGFR2 и положительного статуса курения.

Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза риска развития гипертонической болезни по наличию сочетания генетических вариантов полиморфных маркеров факторов роста rs6214 IGF-1, rs2981582 FGFR2 и статуса курения.

Выделение геномной ДНК из периферической крови осуществляют методом фенольно-хлороформной экстракции (Mathew, 1984) в два этапа. На первом этапе к 4 мл крови с ЭДТА добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5мМ MgCl2, 10мМ трис-HCl (pH=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°С, 4000 об./мин. в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10мг/мл) и инкубируют образец при 37°С в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин. в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. После лиофилизации полученную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -20°С. Выделенную ДНК используют для проведения полимеразной цепной реакции синтеза ДНК.

Анализ полиморфизма гена rs6214 IGF-1 проводят методом ПЦР синтеза ДНК на амплификаторе СFX96 (Bio-Rad) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей. Реакционная смесь объемом 25 мкл включает: 67 мМ трис-HCl (pH=8,8), 2,5мМ MgCl2, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пМ каждого праймера, по 5 пкмоль каждого зонда, по 200 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации (5 мин при 95°С) выполняют 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров – 1 мин. при t=54°С; денатурация – 15 сек при t=95°С. При проведении ПЦР в амплификаторе (CFX96) с флюоресцентной детекцией генотипирование осуществляют методом Tag Man зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции). Для rs6214 IGF-1 зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю G, зонд с красителем FAM – аллелю A (фиг.1).

Для исследования полиморфизма rs2981582 FGFR2 используют наборы 2,5х реакционной смеси для проведения ПЦР-РВ в объеме 25 мкл на 1 образец, включающие 2,5х реакционную смесь (2,5х ПЦР буфер: (KСl, ТрисHСl (рH 8,8), 6,25 мМ MgСl2), SynTаq ДНК-полимеразу, дезоксинуклеозидтрифосфаты, глицерол, Twееn 20) в объеме 10мкл, 25мМ MgСl2 в объеме 1,5 мкл, ddH2О (деионизированная вода), по 10 пкмоль каждого праймера и по 5 пкмоль каждого зонда. При проведении ПЦР в амплификаторе с флюоресцентной детекцией (на амплификаторе CFX96) генотипирование осуществляют методом Tag Man зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции). Для rs2981582 FGFR2 зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю A, зонд с красителем FAM – аллелю G (фиг.2).

Выделенную ДНК подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров [Еlеvаtеd dесrеаsеd myеlореrохidаsе соnсеntrаtiоns аssосiаtе signifiсаntly with thе risk fоr аthеrоsсlеrоsis disеаsе аnd аbdоminаl аоrtiс аnеurysm [Tехt] / Р. Рrаdhаn-Раlikhе, Р. Vikаtmаа, T. Lаjunеn [еt аl.] // Sсаnd. J. Immunоl. – 2010. – Vоl. 72, № 2. – Р. 150-157.].

Изобретение характеризуется фигурами.

Фиг. 1. Дискриминации аллелей методом детекции TaqMan зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции) каждого зонда на амплификаторе CFX96 c детектирующей системой в режиме реального времени полиморфизма IGF-1 (rs6214): - AA, - GG, - AG, ■ - отрицательный контроль.

Фиг. 2. Дискриминации аллелей методом детекции TaqMan зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции) каждого зонда на амплификаторе CFX96 c детектирующей системой в режиме реального времени полиморфизма FGFR-2 (rs2981582): - СС, - ТТ, - СТ, ■ - отрицательный контроль.

Фиг. 3. Диаграмма взаимодействий локусов IGF-1 (rs6214), FGFR-2 (rs2981582) и курения (SMOK) в трехфакторной модели при формировании ГБ, полученная методом GMDR с коррекцией на коварианты, где столбики слева соответствуют группе больных, столбики справа соответствуют контрольной группе.

Генотипирование полиморфизмов rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR-2 осуществляют методом детекции TagMan зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции) каждого зонда на амплификаторе CFX96 c детектирующей системой в режиме реального времени.

Анализ ассоциаций сочетаний генетических вариантов и статуса курения с гипертонической болезнью проводят с помощью методов MDR (Multifactor Dimensionality Reduction) и его модификации GMDR (Generalized Multifactor Dimensionality Reduction) с использованием соответствующего программного обеспечения (MDR версии 3.0.2, http://www.epistasis.org/ mdr.html, и GMDR версии 0.9, http://www.ssg.uab.edu/gmdr/) (фиг. 3). В основе использованных методов лежит общий принцип выявления переменной, содержащей информацию о нескольких локусах, и формирование кластеров, содержащих комбинации генотипов высокого и низкого риска развития изучаемой патологии.

Возможность использования предложенного способа для оценки риска возникновения и развития гипертонической болезни подтверждает анализ результатов наблюдений 939 пациентов с ГБ и 466 индивидуумов контрольной группы. Общий объем исследуемой выборки составил 1405 человек. В группе больных насчитывается 564 мужчины (средний возраст составил 57,60 лет) и 375 женщин (средний возраст составил 58,80 лет). В контрольной группе 257 мужчин (средний возраст составил 57,54 лет) и 209 женщин (средний возраст составил 58,17 лет). В исследуемые выборки включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России и не имеющие родства между собой. Таким образом, группа больных с ГБ и контрольная группа сопоставимы по полу, возрасту, месту рождения и национальности.

Все клинические и клинико-лабораторные исследования проводили на базе неврологического и кардиологического отделений Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа, с информированного согласия пациентов на использование материалов лечебно-диагностических мероприятий, проводимых за период госпитализации и после нее для научно-исследовательских целей. В работе использовалась анкета-опросник, включающая антропометрические, социально-демографические показатели, а также сведения о наличии у респондентов средовых факторов риска гипертонической болезни, таких как курение, злоупотребление алкоголем, низкий уровень физической активности, особенности питания, стрессовые ситуации [Полоников, А.В. Промоторный полиморфизм -1293G>C гена CУР2E1 увеличивает риcк развития гипертоничеcкой болезни у мужчин, злоупотребляющих алкоголем [Текcт] / А.В. Полоников, В.П. Иванов, М.А. Cолодилова // Бюллетень экcпериментальной биологии и медицины. – 2013. – Т. 155, № 6. – C. 695-698]. Статус курения оценивался по двум категориям: отрицательный статус – обследуемый не курит/не курил, положительный статус – обследуемый курит ежедневно в течение последнего года и дольше. Полученные материалы протоколировали по стандартам этического комитета Российской Федерации.

Анализ ассоциаций сочетаний генетических вариантов и статуса курения с гипертонической болезнью проводили с помощью методов MDR (Multifactor Dimensionality Reduction) и его модификации GMDR (Generalized Multifactor Dimensionality Reduction) с использованием соответствующего программного обеспечения (MDR версии 3.0.2, http://www.epistasis.org/ mdr.html, и GMDR версии 0.9, http://www.ssg.uab.edu/gmdr/), с коррекцией на индекс массы тела, уровни холестерина, триглицеридов, липопротеидов низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, низкую физическую активность, предпочтение к жирной пище, редкое употребление овощей и фруктов. Для валидации полученных результатов проводили пермутационный тест – выполнено 1000 пермутаций при 10 кросс-валидациях, что обеспечивает рperm<0,001

Установлены особенности «конституции» больных с гипертонической болезнью на основе комбинаций генов факторов роста и статуса курения. Выявлена модель генно-средовых взаимодействий полиморфизмов rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR-2 с курением, ассоциированная с высоким риском развития гипертонической болезни с поправкой на индекс массы тела, уровни холестерина, триглицеридов, липопротеидов низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, низкую физическую активность, предпочтение к жирной пище, редкое употребление овощей и фруктов: воспроизводимость модели (CVC) составила 100%, точность предсказания модели (Test.Bal.Acc.) равна 57,24%, OR=2,63, 95% CI 1,69-4,10, р=0,01 (рреrm<0,001).

В рамках данной модели выявлена комбинация, являющаяся фактором риска развития гипертонической болезни: сочетание генотипа GG rs6214 IGF-1 с генотипом ТТ rs2981582 FGFR2 и положительным статусом курения наблюдается у 5,11% пациентов с ГБ и у 2,14% индивидуумов контрольной группы (Х2=6,19, р=0,01). Таким образом, наличие данного сочетания генотипа GG rs6214 IGF-1 с генотипом ТТ rs2981582 FGFR2 и положительного статуса курения является фактором риска развития гипертонической болезни (ОR=2,46, 95% СI 1,19-5,22) независимо от влияния прочих средовых факторов.

В качестве примеров конкретного применения разработанного способа приведено обследование добровольцев русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья и не являющихся родственниками между собой: определен статус курения и проведено генетическое обследование по локусам rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR2.

Пример 1. У пациента С. была взята венозная кровь, при генотипировании ДНК-маркеров было выявлено, что генотип индивидуума по локусу rs6214 IGF-1 – GG, генотип по локусу rs2981582 FGFR2 – ТТ. При анкетировании установлено, что пациент С. курит ежедневно в течение 8 лет. Сочетание генотипа GG (rs6214 IGF-1), генотипа ТТ (rs2981582 FGFR2) и положительного статуса курения позволило отнести пациента в группу больных с высоким риском развития гипертонической болезни. Дальнейшее наблюдение подтвердило диагноз гипертонической болезни у пациента.

Пример 2. У пациентки К. произведен забор венозной крови, при генотипировании ДНК-маркеров выявлено, что ее генотип по локусу rs6214 IGF-1 – GG, генотип по локусу rs2981582 FGFR2 – СС. При анкетировании установлено, что пациентка К. не курит. По данным генотипирования и отрицательному статусу курения пациентка К. не включается в группу больных с высоким риском развития гипертонической болезни. В дальнейшем было установлено, что артериальное давление пациентки К. соответствует норме.

Пример 3. У пациента Р. после забора венозной крови из локтевой вены и последующего генотипирования выявлен генотип АА по локусу rs6214 IGF-1 и генотип СС по локусу rs2981582 FGFR2. При анкетировании установлено, что пациент Р. ежедневно курит в течение более 5 лет. По данным генотипирования пациент Р. не включается в группу больных с высоким риском развития гипертонической болезни. В дальнейшем было установлено, что артериальное давление пациента Р. соответствует нормальным значениям.

Приведенные примеры подтверждают осуществимость предложенного способа и достижение заявленного технического результата.

Применение данного способа позволит на доклиническом этапе формировать среди индивидуумов группы риска и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению развития гипертонической болезни.

Способ прогнозирования риска развития гипертонической болезни у индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизмов генов, отличающийся тем, что анализируют полиморфизмы генов факторов роста rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR2, устанавливают наличие у респондента средовых факторов риска развития гипертонической болезни, а именно определяют статус курения, прогнозируют высокий риск развития гипертонической болезни при выявлении сочетания генотипа GG rs6214 IGF-1, генотипа ТТ rs2981582 FGFR2 и положительного статуса курения.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам для идентификации связывающих полипептидов (например, антител или их антигенсвязывающих фрагментов), которые специфически связываются с антигеном клеточной поверхности, что может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и касается прогнозирования гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.

Группа изобретений относится к области детекции маркера-мишени в биологическом образце. Набор для детекции маркера-мишени в биологическом образце в комбинации с молекулой, связывающейся с маркером-мишенью, способной специфически связываться с маркером-мишенью, содержит: первое связывающее средство, содержащее первую связывающую молекулу, способную прямо или косвенно специфически связываться с молекулой, связывающейся с маркером-мишенью, и вещество мечения; линкерную молекулу, способную специфически связываться с первым связывающим средством; и второе связывающее средство, содержащее вторую связывающую молекулу, способную специфически связываться с указанной линкерной молекулой, и вещество мечения.

Изобретение касается способа прогнозирования сердечно-сосудистого риска в течение 10 лет у индивидуума, заключающийся в том, что определяют уровень гормона роста (hGH) или его изоформ натощак в крови, плазме или сыворотке, взятой у указанного индивидуума, где изоформу гормона роста (hGH) выбирают из группы, включающей изоформу 1 hGH, изоформу 2, изоформу 3 и изоформу hGH 4 (SEQ ID NO: 1-4), и устанавливают корреляцию между указанным уровнем гормона роста (hGH) или его изоформ натощак и сердечно-сосудистым риском, при этом повышенный уровень относительно порогового значения является прогностическим критерием повышенного риска.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, ангиологии, кардиохирургии, реабилитологии, и может быть использовано для прогнозирования неблагоприятных сердечно-сосудистых событий в течение 12 месяцев у больных хронической сердечной недостаточностью с рецидивом стенокардии после реваскуляризации миокарда.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики тяжелого течения механической желтухи доброкачественного генеза, отличающийся тем, что методом непрямой иммунофлюоресценции в крови определяют абсолютное количество pan-маркеров Т-лимфоцитов и естественных киллеров (NK-клеток), а в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа определяют уровни иммуноглобулина IgG и цитокинов - интерлейкина-10 (ИЛ-10) и фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α), спектрофотометрическим методом в эритроцитах определяют содержание малонового диальдегида (MDA) и активность дуплекса ферментов супероксиддисмутазы и каталазы (SOD-CAT) и при абсолютном количестве раn-маркеров Т-лимфоцитов ниже 0,47×109/л, NK-клеток ниже 0,14×109/л, уровне IgG выше 5 г/л, ИЛ-10 выше 30 пг/мг, TNF-α выше 2 пг/мл, MDA выше 40 нмоль/1 г Нb, активности SOD ниже 600 ед./мин /1 г Hb, CAT ниже 0,8 ммоль/с/1 г Нb прогнозируют тяжелое течение механической желтухи доброкачественного генеза.
Изобретение относится к области медицины, к офтальмологии и может быть использовано для раннего прогнозирования пороговой стадии ретинопатии недоношенных (РН) с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ).

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии и гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики заболеваний гастродуоденальной зоны.

Изобретение относится к медицине, может быть использовано для прогнозирования уровня заболеваемости ВИЧ-инфекцией в регионе на основе эволюционного моделирования.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской генетике, и позволяет прогнозировать риск развития генитального эндометриоза для индивидуумов славянской популяции Северо-Западного федерального округа.

Настоящее изобретение относится к способу эффективного разложения биоразлагаемой смолы. Описаны варианты способа разложения биоразлагаемой смолы.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, паразитологии, венерологии, медицинской микробиологии, гематологии, и может быть использовано для диагностики урогенитального трихомониаза.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения биологической активности дефибротида. Приводят в контакт дефибротид, эуглобулин млекопитающего и субстрат, специфичный для плазмина, который в результате реакции с плазмином дает измеряемый продукт.

Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где R1 и R2 независимо представляют собой Н или F; R3 представляет собой OR5 и R4 представляет собой Н, или R3 представляет собой Н и R4 представляет собой OR5; каждый из R5 представляет собой Н; R6 представляет собой Н или OR5; R7 выбирают из группы, состоящей из Н и C1-8-алкила; R8 выбирают из группы, состоящей из C1-8-алкила, необязательно замещенного 1-3 атомами фтора; и каждый R9 независимо выбирают из группы, состоящей из Н, C1-6-алкила, или две группы R9 связаны вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-членного кольца, содержащего 3 атома углерода.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики гибели эмбрионов у коров. На 28-40 дни гестации осуществляют забор венозной крови, в сыворотке которой определяют показатель активности гамма-глутамилтрансферазы (ГГТ).

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ диагностики in vitro нейродегенеративного заболевания у индивидуума.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для детектирования активности эндопептидаз с измененной нацеленностью. Способ по изобретению включает этап обработки клетки из стабильной клеточной линии образцом, содержащим эндопептидазу с измененной нацеленностью, выделения из обработанной клетки компонента SNAP-25, содержащего продукт расщепления SNAP-25197, карбоксильный конец которого соответствует остатку P1 разрезаемой связи в сайте расщепления токсином BoNT/A, осуществление контакта компонента SNAP-25 с анти-SNAP-25 антителом, иммобилизованным на твердофазной подложке, и детектирование присутствия комплекса антитело-антиген, включающего анти-SNAP-25 антитело и продукт расщепления SNAP-25197.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа определения активации плазминогена бактериями. Способ включает внесение протамина сульфата в подготовленный супернатант, инкубацию полученной смеси, осаждение клеток центрифугированием, инкубацию супернатанта с протамин сульфатом, осаждение белка и регистрацию активации плазминогена бактериями по количеству отщепившегося аргинина, содержание которого определяют методом Сакагуши по окрашиванию проб в красный цвет.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения функциональной активности компонента C3 комплемента человека.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и генетики. Предложен способ качественного и количественного анализа липидов, прочносвязанных с геномной ДНК, включающий стадии выделения из клеток геномной ДНК, связанной с липидами, детергентным способом, гидролиза ДНК гидролизующим ферментом, выделения липидов в смеси хлороформ-метанол-вода при 37˚С, выпаривания растворителя, стабилизации липидов 2,6-ди-трет-бутил-п-крезолом, смешивания липидов с TMSH, хроматографии с помощью газового хроматографа с последующей масс-спектрометрией.

Изобретение относится к медицине, гепатобилиарной хирургии и онкологии. Для определения отдаленной выживаемости у больных опухолями проксимальных желчных протоков в предоперационном периоде у больных с опухолями проксимальных желчных протоков в предоперационном периоде проводят определение диагностических факторов, используют клинические факторы, морфологические и молекулярные параметры опухоли в биологическом материале, полученном с помощью биопсии. В качестве клинических факторов используют стадию опухоли по TNM, поражение лимфоузлов гепатодуоденальной связки (ГДС) по данным КТ и МРТ, в качестве морфологических и молекулярных параметров используют степень дифференцировки клеток, уровень и наличие экспрессии N-kadherin, СОХ - 2, полученным данным присваивают балльные оценки: при выявлении I-II стадии опухоли по TNM присваивают 2 балла, III-IV стадии - 4 балла; при выявлении поражения лимфоузлов присваивают 1 балл, отсутствии поражения - 0 баллов; при выявлении высокой степени дифференцировки клеток присваивают - 0 баллов, умеренной - 2 балла, низкой - 4 балла, при отсутствии экспрессии N-cadherin - 0 баллов, при наличии - 2 балла, при отсутствии экспрессии СОХ-2 - 0 баллов, при выявлении уровня экспрессии величиной 1 балл присваивают 3 балла, величиной 2 балла - 4 балла, величиной 3 балла - 6 баллов. Прогностический критерий Р выживаемости у больных воротной холангиокарциномой в предоперационном периоде определяют по формуле: где - сумма балльной значимости каждого фактора; F max - максимальное значение баллов факторов риска, равное 17 баллам. При значении Р от 0 до 50% делают вывод о вероятности выживаемости более 36 мес; от 51% до 75% - вероятности выживаемости 18-36 мес включительно; более 76% - вероятности выживаемости менее 18 мес. Способ обеспечивает точное определение выживаемости в данной группе больных. 1 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к прогнозированию риска развития гипертонической болезни у индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья. Для этого проводят выделение ДНК из периферической венозной крови. Анализ полиморфизмов генов, отличающийся тем, что анализируют полиморфизмы генов факторов роста rs6214 IGF-1 и rs2981582 FGFR2. Устанавливают наличие у респондента средовых факторов риска развития гипертонической болезни, а именно определяют статус курения. Прогнозируют высокий риск развития гипертонической болезни при выявлении сочетания генотипа GG rs6214 IGF-1, генотипа ТТ rs2981582 FGFR2 и положительного статуса курения. Изобретение обеспечивает получение критериев оценки риска развития гипертонической болезни у указанной категории пациентов с учетом сочетания генетических и средовых факторов. 3 ил., 3 пр.

Наверх