Способ выделения биологически активных веществ

 

ОПИСАНИ

ИЗОБРЕТЕНИ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К ПАТЕНТУ

Зависимый от патента ¹

МПК С 12d 13/10

С 07g 7, 028

Заявлено 13.111.1968 (№ 1224830/28-13) Приоритет 5Х1.1967, М ВПба/125090, ГДР

Комитет оо делатв изоорвтвиий и открытий лри Совете Мииистров

СССР

УДК 577.15.07(088.8) Опубликовано 11 VI.1971. Бюллетень Uo 19

Дата опубликования описания 27.IX.1971

Авторы изобретения

Иностранцы

Дитар Шепфель и Иоханн Хубер (Германская Демократическая Республика) Иностранная фирма

«Форшунгсинститут фюр ди Герунгсиндустри, энзимологи унд технише

Микробиологи» (Германская Демократическая Респуолпка) Заявитель

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ

АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Icv,)„ (СО ОН) 1

Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к способам выделения биологически активных веществ, например ферментов, из культуральной жидкости.

По известному способу выделение ферментов из культуральной жидкости осуществляют, например, введением в нее дубильны.; веществ, отделением полученного осадка, введением в него растворителя и последующей промывкой и сушкой, причем в качестве дубильных веществ применяются природные дуоил1ные вещества, что связано с существеннымп затратами.

По предлагаемому способу для выделения ферментов из культуральной жидкости в качестве дубильного вещества используют сштетические органические соединения группы синтана, общей формулы где m)3; п=0; 1; 2; 3; q=l; 2; р=0; 1;

Y=OH или NHg, 1.1Х= — C(R)g —, где R=H или СНз, С вЂ” мостики т.2X= — SO — с льфон — мостики

1.3Х= — SO — су льфокси — мостики

l.4Õ= — SOg ХН вЂ” сульфонимид — мостики

1.5Х = — ХН вЂ” пмин — мостики.

Способ осуществляют следующим образом.

В культуральную жидкость вводят синтетическое дубильное вещество в количестве 0,5—

10 5", . Смесь перемешивают прп нагревании до

50 С, при комнатной температуре или при Охлаждении. Выпавший прп этом осадок отделяют, например, фильтрацией, затем дубильные вещества экстрагируют органическим раство15 рптелем, полученный осадок отделяют н высуш ив а юг.

В качестве органических растворителей применяются одно- и многоатомные спирты, смешивающиеся с водой кетоны, эфиры гли20 колей, диоксан, тетрагидрофуран и др. Для того чтобы избежать падения активности содержащих энзнм продуктов осаждения, экстракцию синтетических дубильных веществ проводят на хо",îäó, преимущественно прн 0—

25 10"С. Вьшавший продукт в зависимости от требований необходпмои чистоты либо промывают растворителями, лиоо тотчас высушивают.

Пример 1. Для осажденпя амилазы ис30 пользуется фильтрат культуры Bacillus subti306638 (СООН)р

15 Мо

Составитель H. Селиверстова

Редактор Г. Билобжескав Техред А. А. Камышникова Корректор А. П. Васильева

Заказ 2342/16 И зд. К 986 Тираж 473 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-35, Раушскан наб., д. 4 5

Типография, пр. Сапунова, 2

lis. 1,5 л содержащего амилазу фильтрата культуры добавляют в раствор карбоната натрия до Н 7,0. Далее, перемешивая, добавляют Т-вб Щ уе ическоюдубильного веществ а 1Щ ктов поликонденсации одноато Ж в смеси.,2о о. Осадок отделя1 и. 3969промывают ацетоном при

0 5 С. При высушивании получают 3,7 г сухого вещества с общей активностью

1765000 ед. амилазы.

Пример 2. Для осаждения протеазы используют фильтр ат культуры Bacillus subtil1s. К 1000 мл фильтрата с общей активностью

4780 ед. протеазы добавляют при рН 7,0 раствор дубильного синтетического вещества также с рН 7,0. Дубильное вещество соответствует типу продукта поликонденсации многоатомных фенолов и ароматических сульфоновых кислот. После перемешивания в течение

2 час при 30 С осадок отделяют, дважды экстрагируют ацетоном и высушивают. Получают

2,2 г сухого продукта с общей активностью

3771 ед. протеазы.

Предмет изобретения

Способ выделения биологически активных веществ, например ферментов, из культуральпой жидкости путем введения в нее дубильного вещества, отделения полученного осадка с последующей экстракцией из него дубильных веществ органическим растворителем, отделением осадка и высушиванием его, отличаюи4ийся тем, что в качестве дубильного вещества используют синтетические органические соединения группы синтана общей формулы

10 где m)3; п=0; 1; 2; 3; q=1; 2; р=0; 1;

20 Y=ОН или NH2, 1.1Х= — С(R12где R= H или СНз, С вЂ” мостики

1.2Х = — ЬОз — сульфон — 51ocTHKH

1.3Х =- — SO — c) . ьфокси — мостики

25 1.4Х=- — ЬО NH — сульфонимид — мостики

1.5Х= — ХН вЂ” — имин — мостики.