Способ определения фибринолитической активности плазмы крови

 

(: А и И

Союз Советских

Социалистических

Республик (,ц 773494

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 2601.79 (21) 2719564/28-13 (5 ) М. КЛ, G N 33/48 с присоединением заявки И9 (23) Приоритет

Государственный комитет

СССР яо делам изобретений н открытий

Опубликовано 231080. Бюллетень и 39

Дата опубликования описания 23.1080 (3) УДК 616 ° 153,,962(088 ° 8) (72) Авторы изобретения

Б,A. Кудряшов и Л.А. Ляпина (71) Заяв итель

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного

Знамени государственный университет им.М. B. Ломоносова (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ

АКТИВНОСТИ ПЛАЗМЫ КРОВИ

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии.

Известен способ определения фибринолитической активности плазмы 5 крови путем выделения эуглобули новой фракции плазмы крови, растворения ее в растворе борнокислого натрия с последующей инкубацией этой фракции с растворами СаС и тромбина 1О и определением временй полного лйзиса сгустка фибрина (1), Однако данный способ не позволяет дифференцировать ферментативный и неферментативный фибринолиэ, Целью изобретения является дифференцирование ферментативного и неферментативного фибринолиза.

Указанная цель достигается тем, что эуглобулиновую фракцию плазмы делят на две части, в одну иэ которых добавляют протаминсульфат в концентрации 0,01-0,05% по весу, а в другую 0,85-0,9% раствор NaCP. и после добавления в обе пробирки хло- 25 ристого кальция по времени лиэиса фибринового сгустка в 1-й пробирке определяют ферментативный фибринолиэ, во 2-й - суммарный, включающий ферментативный и неферментативный фибри-30 нолиэ, а по разнице между ними неферментативный фибринолиз, Способ осуществляют следующим образом.

Получают эуглобулиновую фракцию плазмы, для чего к О, 5 мл плазмы добавляют 8 мп дистиллированной воды и 0,15 мл 1%-ной уксусной кислоты (рН 5,2), Смесь оставляют в холодильнике (4-6 С) на 20 — 30 мин, после чего центрифугируют в течение 1015 мин при 1800-2000 об/мин, надосадочную жидкость удаляют, а осадок растворяют в 5 мл раствора борнокислого натрия, помешивая тонкой стеклянной палочкой . После этого пробу делят на две равные части по 2,5 мл. В одну пробирку приливают раствор ИаСс в концентрации 0,850,9%, а в другую — протаминсульфат в концентрации 0,01-0,05 % по весу.

Далее пробы инкубируют при 37 С в течение 5-10 мин, после чего в oeie пробы добавляют 0,25 мл 0,025 М раствора СаСЕ, помещают в пробирки

1 тонкие стеклянные палочки, вокруг которых образуется сгусток фи брина, и замечают время от начала образсва773494

Формула изобретения

Составитель Л. Соловьев

Редактор О, Колесникова Техред Н. Граб

Корректор 3I. Иван

1Ь

Заказ 7492/55 Тираж 1019

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 ния сгустка до его полного лиэиса при 37 С.

Для расчета процента ферментативного фибринолиза (Ъ ФФ) в эуглобулиновой фракции плазмы предложена следующая формула: а ФФ = )- - — х 100, 5 где А — время лиэиса сгустка фибрина, полученного из эуглобулиновой фракции плазмы, проинкубированной с физиологическим раствором NaCK; 10

В - время лизиса сгустка фибрина, полученного из эуглобулиновой фракции плазмы, проинкубированной с раствором протаминсульфата. 35

Процент неферментативного фибринолиза (ЪНФ) в эуглобулиновой фракции плазмы вычисляют следующим образом

Ъ НФ = 100 — % ФФ

Предлагаемый способ позволяет повы-2О сить надежность способа и четко дифференцировать ферментативный и неферментативный фибринолиз, Способ ойределенкя фибринолитической активности плазмы крови путем выделения эуглобулиновой фракции ее, растворением последней в растворе борнокислого натрия с последующим добавлением хлористого кальция и проведением лизиса образовавшегося фибринового сгустка, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью дифференциации ферментативного и неферментативного фибринолиза, эуглобулиновую фракцию плазмы делят на 2 части, в одну из которых добавляют протаминсульфат в концентрации 0,010,053 по весу, а в другую 0,85-0,9% раствор ИаСЙ и после добавления в обе пробирки хлористого кальция по времени ливиса фибринового сгустка в 1-й пробирке определяют ферментативный фибринолиз, во 2-й — суммарный, включающий ферментативный и неферментативный фибринолиз, а по разнице между ними - неферментативный фибринолиз.

Источники информации принятые во внимание при экспертизе

1, Кowaeski Е,, Корее М., Niewiarowski. $, On Evotution of

the Engpobubin Method for the

Determination of Р1brinop.ysis, P Ceinica8 Pathology 1959, 12, р, 215-218.