Питательная среда для выращивания пениофоры гигантской

 

О П И С A H N R (п>907068

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Соаетсиик

Социапистичесиик

Республик (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву (22)Заявлено 27.10.80 (21) 2999648/30-15 с присоединением заявки М (51)M. Кл.

С 12 И 1/02//

А 01 и 63/00 4

3Ьвудзрстеанай квинтет

СССР но денем изобретений н отнрытнй (23) П риоритет

Опубликовано 23.02.82. Бюллетень J6 7

Дата опубликования описания 23.02,82 (53) Уд К-63. 576, . 8 (088. 8) (72) Авторы изобретения Ю с

Н.И.Федоров, й3.И.Полещук и Н.И.Якимов

l

С.И.Кирова

1 I

I (71) Заявитель

Белорусский технологический институт 1им. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА Д,11Я ВЫРАЩИВАНИЯ

ПЕНИОФОРЫ ГИГАНТСКОЙ

Изобретение относится к области микробиологии, o"именно к выделению сапрофитных дереворазрушающих грибов-антагонистов корневой губки, в частности пениофоры гигантской (Peniophora gigantea), используемой для приготовления биопрепарата против корневой гнили хвойных пород.

При вьщелении штаммов микроорганизмов в чистую культуры часто происходит заселение питательной среды посторонними микроорганизмами, что затрудняет вьщеление чистых культур.

Поэтому для этой цели используются элективные питательные среды.

Известна среда для выделения де.реворазрушаюцих грибов, содержащая в качестве основы агаризованное пивное сусло с добавлением этилового спирта, молочной кислоты, пентахлор нитробензола, сернокислого магния, двухзамещенного фосфорнокислого калия и стрептомицина 1 ).

Йзвестна также среда, содержащая пивное сусло, агар-агар, дихло" ран, фенол, этиловый спирт в беномил (2), Однако указанные среды имеют сложный состав и сложную методику приготовления.

Известна также среда следующего .состава:

Пивное сусло 4Х 1000 мп

Агар-агар 20 r

Поликарбацин 80Х 5 мг

Стрептомицин 100Х 100 мг

Молочная кислота 100Х 2 мл

Этиловый спирт 96Х 20 мг

Эта среда используется для выделения дереворазрушающего гриба корневой губки (Fomitopsis annosa Karst), При использовании ее для выделения . гриба-антагониета корневой губкипениофоры гигантской она заселяется другими микроорганизмами 1 3 1.

7068

25

15

g5

Известный

Формула изобретения

Кроме того, известная среда имеет сложный состав и трудоемка в приготовлени ..

Цель изобретения — создание элективной питательной среды, которая была бы проста по составу и в приготовлении, благоприятной для роста пениофоры гигантской и неблагоприятной для роста других микроорганизмов.

УКазанная цель достигается тем, что в агаризованное пивное сусло добавляют стрептомицин и фундазол, при этом содержание всех указанных ингредиентов берут в следующих соотношениях, мас.ч.:

Пивное сусло 89,2739-107,1235

Агар-агар . 1 3393-2,2318

Стрептомицин 0,0045-0,0180

Фундазол 0,0013-0,0027

Введение в смесь 0,0013-0,0027 мас.ч. фундазола определено экспериментальным путем. Уменьшение или .увеличение количества указанного компонента не позволяет достичь поставленную цепь. Фундазол представляет собой порошок белого цвета со слабым запахом, малорастворимый в воде.

Используется в сельском и лесном хозяйстве как фунгицид системного действия для борьбы с болезнями расгений. Ранее для приготовления предлагаемой смеси не применялся.

Селективную питательную среду готовят следующим образом.

Пример 1. Берут 89,2739 мас.ч. пивного сусла и добавляют к нему

l, 3 39 3 мас . ч. агар- a rap a. Полученную смесь стерилизуют в автоклаве при температуре 112 С и давлении 0,5 атм в течение 0,5 ч. Затем добавляют

0,0045 мас.ч. стрептомицина и

0,0013 мас.ч. фундазола, полученную среду перемешивают. После этого среда готова к употреблению.

В примере полученная смесь разливалась в чашки Петри, каждая из которых инокулировалась 1 мл водопроводной воды, содержащей в среднем

50 опор пениофоры гигантской. Затем чашки Петри ставились в термостат при температуре 23-25 С и инкубировались в течение 5 сут.

11 р и м е р 2. Отличается от примера 1, тем что, исходные компоненты берут в следующем составе:

Пивное сусло 89,2745

Агар-агар 1,3395 ф

Стрептомицин 0,0090

Фунд аз ол 0,0020

Пример 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что исходные компоненты берут в следующем соотношении:

Пивное сусло 107,1285

Агар-агар 2,2318

Стрептомицин 0,0180

Фундазол 0,0027

>0 Данные испытаний представлены в таблице.

Как видно из данных таблицы, хаЗО рактеристики предлагаемой питатель— ной среды значительно превышает те же характеристики известной. Во всех примерах не наблюдается загрязнение среды другими микроорганизмами, в то время как на известной сред; это явление отмечается. Оптимальным является пример 1, где количес-во колоний пениофоры гигантской наибольшее, а их размеры наиболее крупные.

Таким образом, использование пред = лагаемой питательной среды позволяет получать незагрязненную посторонними микроорганизмами чистую культуру пениофоры гигантской с размерами и числом ее колоний на 15-20% большим, чем на известной питательной среде, Питательная среда для вы1 ащивания пениофоры гигантской, содержащая пивное сусло, агар-агар и стрептомицин, отличающаяся тем, что, с целью повышения ее элективности и упрощения технологии приготовления, она содержит фунда907068

5 зол при следующем соотношении ингредиентов, мас.ч.:

Пивное сусло 89,2739-107,1285

Агар"агар 1э,2293 2э2318

Стрептомицин 0,0045-0,0180

Фундазол 0,0013ч0,0027

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Kuhlman Е.Z, H ndrix FF. А

selectine medium for she isolation

of Fomes anosus. Phytopathology, 1962 52, 12.

2. Ho(!t RS Cotb FM. Selective шед1um fîг she isolаt1on îf wood

rotting Ваз1о iomycetes. Can. g .

Bot. 1971, 2, 49.

3. Кобеч Е.В. Методические рекомендации по определению степени латогенности популяций корневой губщ ки сосны. М., ВНИИЛМ, 1979 (прототип) .

Составитель М.Мирзаев

Редактор Г.Волкова Техред N. Tenep Корректор Л.Бокшан

Заказ 519 34 Тираж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная,