Способ диагностики сенсибилизации к лекарственным препаратам

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскик

Социвлистическин

Республик о 943576 (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 26.08.80. (21) 2982165у28 13 с присоединением заявки РЬ (28) П риоритет (5! )М. Кл.

6 01 N 33/48

ВеударетвкнныМ комнтет

СССР по делам нзабретеннй н открытнй (53) УД 3(616-07,(088.8) Опубликовано 15 07,82. бюллетень №26

Дата опубликования описания 15,07.82

П. М. Сараджишвили, В. М. Габашвили, В. С. Мухаринская, 1

Ф. Г. Ветрогон и Н. А, ТатишвЦли (72) Авторы изобретения

Институт клинической и экспериментальной неврологии-=-,. (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ К ЛЕКАРСТВЕННЫМ

ПРЕПАРАТАМ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для--диагностики сенсибилнзации к лекарственным препаратам.

Известен способ диагностики сенсибилиэации к лекарственным препаратам путем обнаружения антител в биологической жидкости с поа мощью реакции микропреципитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем (1) .

Однако известный способ не обеспечивает достаточной точности диагностики.

Цель изобретения — определение нейросинсибилизации к противосудорожным препаратам.

Укаэанная цель достигается тем, что при осуществлении способа диагностики сенснбилизации к лекарственным препаратам путем обнаружения антител в биологической, жидкости с помощью реакции микропрецинитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем, отличительной особен- эп ностью является то, что реакцию микропреципитации проводят смешиванием спинно-мозговой жидкости с растворами противосудорожного препарата.

На фиг. 1 и 2 изображены графики зависимости оптической плотности or разведения антигена..

Способ осуществляют следующим образом.

Проводят клиническое исследование больного и устанавливают показания для взятия спинномоэговой жидкости. Затем проводят спинномозговую пункцию. Для выявления нейросенсибилиэирующего воздействия принимаемого больным противосудорожного препарата проводят следующие исследования спинномоэговой жидкости. Готовят аллерген-суточную дозу исследуемого лекарственного противосудорожного препарата, разводят в 100 мл дистиллированной воды. Раствор лекарственного препарата должен быть визуально прозрачным и бесцветным. В штатив ставят 10 пробирок, и в первые

9 пробирок наливают по 1,0 мл дистиллированной воды. В десятую пробирку наливают

10 мл дистиллированной воды и добавляют в нее 1;О мл (из 100 мл) приготовленного раствора противосудорожного препарата. Содер.жимое десятой пробирки перемешивают стеклянной палочкой, и приступают к дальнейшему

3 943576 разделению, 1,0 мл раствора из десятой пробирки переносят э : девятую пробирку, из нее, повторяя процедуру, 1 мл жидкости переносят в восьмую пробирку и т. д,, вклю° чая первую пробирку, в результате чего разведения аллергена увеличиваются в геометрической прогрессии. На следующем этапе исследования проводят определение оптической плотности полученных растворов с помощью фотоэлектроколориметра (например, ФКМ вЂ” 56), 1я

Для этого берут 2 кюветы с рабочей длиной

30-50 мм, в левую (контрольную) кювету наливают 2,8 мл дистйллированной воды, в правую кювету (опытную) наливают 2,8 мл спинномоэговой жидкости. Обе кюветы помеща- ют в кюветодержатели фотоэлектроколориметра и с зеленым светофильтром определяют исход. ную величину оптической плотности испытуемой спинномозговой жидкости, Затем в обе кюветы вносит по 0,1 мл предварительно разведенного лекарственного препарата, начиная с минимальной его концентрации (первая пробирка) и содержимое кювет перемешивают стеклянной палочкой.

Спустя 2 мин после добавления лекарственного препарата каждого из разведений, фиксируют цифровые показатели со шкалы фотоэлектроколориметра, которые отображают изменение оптической плотности спинномозговой жидкости в результате внесения растворов лекарственных препаратов различного разведения (с первой по десятую пробирку).

Из полученных значений оптической плотности строят график зависимостей оптической плотности спинномозговой жидкости от разведения лекарственного препарата (фиг. 1 и 2), причем З5 иа оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси;абсцисс — разведение препарата.

Если испытываемая спинномоэговая жидкость ие содержит антител по отношению в данному лекарственному препарату (отрицательная реакция), то график зависимости оптической плотности спинномозговой жидкости от разведения препарата представляет собой наклонную прямую линию. Если испытываемая спинномозговая жидкость содержит антитела по отноше- 45

4 нию к данному лекарственному препарату (положительная реакция), то на графике зависимости оптической плотности спинномозговой. жидкости от разведения лекарственного препарата появляются пики или плато, параллельные оси абсцисс, при этом наличие пиков указывает на более интенсивную реакцию антител, чем плато.

Необходимость взятия суточной дозы противосудорожного препарата и разведение его в

100 мл дистиллированной воды при исследовании спинномозговой жидкости, а не в 1000 мл дистиллированной воды, как принято при исследовании крови, связано с проницаемостью гистоэнцефалического барьера для лекарственных веществ. Количество взятой для исследования пробы спинномозговой жидкости (1,8 мл) обьясняем тем, что при меньшей ее концентрации постановка реакции невозможна. Необходимость постановки пробы в 10 пробирках обусловлена фиксированием определенного разведения для количественного учета характера реакции. Предлагаемый способ позволяет диагностировать нейросенсибилизацию к таким противосудорожным препаратам, к которым при исследовании крови она не выявляется.

Формула изобретения

Способ сенсибилизации к лекарственным препаратам путем обнаружения антител в биологической жидкости с помощью реакции микропреципитации с последующим измерением оптической плотности реагирующих систем, о тл и ч а ю шийся . тем, что, с целью определения нейросенсибилизации к противосудорожным препаратам, реакцию микропреципитации проводят смешиванием спинномоэговой жидкос-ти с растворами противосудорожного препарата.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Реакция пассивной гемагглютинации для обнаружения антигел к лекарственным препаратам.— Лабораторные методы исследования в неинфекционной иммунологии, lion. ред. О. Е. Вя-. зова. М., Медгиз, 1967, с. 99-100.

943576

ГлиноиагеУдд жийдйвэ

Pua8clewc анвиг |на

Фиг.1

ЙиечфийФ аиФкжнь

Крв8ь

РЮййюий ахи гвна

2 Ф 6 Ю 1д

Фиг.g

Составитель P. Катосова

Техред М. Рейвес

Корректор А. Гриценко

Редактор М. Парфенова

Заказ 5097/49 Тираж 887

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

1И

Q 86 80

Os е м

109 а 89

g юа

3:- 0

Филиал ППП "Патент™, г. Ужгород, ул. Проектная, 4