Способ получения производных @ -карболин-3-карбоновой кислоты

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ -КАРБОЛИН-З-Ю БОНОВОЙ КИСЛОТЫ общей формулы I где R па;, R2 R5 -водород, С -С -алкил, Cy-Cg циклоалкил , фении или метоксифенил; -водород, фтор, хлор, С -Сг-апкнп , этоксикарбоннл. рил, нитроили метоксигруппа; отличающийся тем, что, соединение общей формулы II где R ,R и R имеют указанные значения , подвергают дегидрированию с помощью элементарной серы, дихлордицианобензохинона , хлоранила или палладия на ; угле с последующей в случае необходимости зтерификацией соединения 1,где R - оксигруппа, спиртом в присутствии бромида меди (II) или хророкиси фосфора, или соляной или серной кислоты , или алкоголята щелочного металла . Приоритет по признакам: СО 00 СП 29.08.79при R-C -Cp-aiiKOKCH-, феНОКСИ- , метоксифеноксигруппа , R и R - водород 22.04.80при R- С -С -алкокси-, 2-этоксигруппа , С -С -алкил , Су-С -циклоалкил, фенил, метоксифенил, R -. водород ,20.06.80 при R- C -Cj-алкоксигруппа , R - водород. С,-С алкил , фенил, R - водород, фтор, хлор, С;,-С2-апкил, зтоксикарбошш, нитрил, нитнитро- , метоксигруппа.

COOS СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК () С 07 D 47 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Н гО

С р1

Н НН

1 — я

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

Il0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 2969305/23-04 (22) 28.08.80 (31) 3622/79; P 3015816.8;

P 3023567.7 (32) 29.08.79; 22.04.80; 20.06.80 (33) Дания, ФРГ, ФРГ (46) 15.09.84. Бюл. У 34 (72) Ульрих Эдер, Гюнтер Нееф, Андреас Хут, Дитер Ратц, Ральф Шмихен (ФРГ), Клаус Тико Браеструп, Могенс Черлей Нильсен, Иорген Андерс

Кристенсен, Могенс Энгельштофт, Хеннинг Шоу (Дания) (71) Шеринг АГ (ФРГ) и А/с Феррозан (Дания) (53) 547.759.3.07(088.8) (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

"ф-КАРБОЛИН-3-КАРБОНОВОИ КИСЛОТЫ общей формулы I где R - окси- С -С -алкокси фенок1

Ф си-, бензилокси-, метоксифенокси-, 2-оксиэтокси-, 2,3-диокси-, пропокси-, аплилокси-, трифторметокси-, хлорфеноксн-, дихлорфеноксиили диметиламиноэтоксигруп-, па;

R - водород С -С -апкил С -г У . У Ь циклоалкил, фенил или метоксифенил;

RÐ вЂ” водород, фтор, хлор, С4-С -алкил, этоксикарбонил, нит„Я0„„11143 5 А рил, нитро-.или метоксигруппа; отличающийся тем, что, соединение общей формулы II где R «R и R имеют указанные значеI ния, подвергают дегидрированию с помощью элементарной серы, дихлордицианобензохинона, хлоранила или палладия на угле с последующей в случае необходимости этерификацией соединения I,ãäå

I O

R — оксигруппа, спиртом в присутствии бромнда меди (II) или хророкиси фосфора, или соляной или серной кислоты или алкоголята щелочного меВ

laeL талла.

Приоритет по признакам:

29.08.79 при R -С -С алкокси-, фе- С4

1 нокси-, метоксифенокснгруппа К и R — водород Сл

22.04.80 при R — С -С -алкокси-, 2-этоксигруппа, R2 — С -С -алкил, Су-С6-циклоалкил, фенил, метоксифенил, R водород

;20 ° 06.80 при К - С„-С -алкоксигруппа, R — водород, С,-С алкил, фенил, RI - водород, фтор, хлор, C -С -алкил, этоксикарбоннл, ннтрил, нитро-, метоксигруппа.

1 11 14

Изобретение относится к способу получения новых производных Р --карболин-3-карбоновой кислоты, которые могут найти применение в качестве биологически активных веществ. 5

Известно превращение пяти- и шестичленнык гетероциклов в ароматические циклы в результате дегидрирования, которое осуществляют в присутствии катализаторов (платина, палладийЦО а также под действием серы, селена, хинонов и других дегидрирующих агентов.

Цель изобретения — разработка спо- . соба Получения новых биологически 15 активных соединений, основанного на известной реакции дегидроароматизации.

Поставленная цель достигается способом получения производных р-карбо- 20 лин 3-карбоновой кислоты общей формулы

335 2 необходимости этерификацией соединения I где К - оксигруппа, спиртом

I в присутствии бромида меди (II), или хлорокиси фосфора, или соляной или серной кислоты, или алкоголята щелочйого металла.

Пример 1. Раствор - 15 r

L-триптофана в 9 мп 9,6 í. NaOH u

6,07 мл 407 формалина нагревают в течение 25 ч до 53 С. Затем суспензию, полученную в результате реакции, тнтруют до рН 5 5 2t мп 3 н. НС1 и оставляют;. в холбдильнике при 4 С в о течение 18 ч. Осадок удаляют фильтрованием и промывают 150 мп холодной воды. Выход тетрагидро- -карболин-3-карбоновой кислоты 14 8 г после сушо ки в течение 24 ч, т.пл. 295,5 С.

7,5 г полученного, таким образом соединения, 700 мп 99,9Х этанола и

21 мп концентрированной НС1 нагревают в сосуде с обратным холодильником в течение 24 ч, выпаривают досуха.

Выход этилового эфира тетрагидро-j3-карболин-3-карбоновой кислоты 7,25 г.

7 r сложного эфира добавляют к

100 мп тетрахлорэтана и 10 г хлораниI где R - окси, С1-С -алкокси-, фенок-30 си-, бензилокси-, метоксифенокси-, 2-оксиэтокси-, 2,3-диоксипропокси-, аллнлокси-, трифторметокси-, хлорфенокси-, дихлорфенокси- 35 или диметиламиноэтоксигруппа;

R - водород, С1-С5-алкил, С5-С6

-циклоалкил, фенил, нли метоксифенил; 40

R - водород, фтор, хлор, С -С -алкил, этоксикарбонил, нитрил, нитро- или метоксигруппа, заключающимся в том, что соединение 45

Ьбщей формулы

НФО (ц>

gЯ r

50 н нн где R К и R> имеют укаэанные значения, подвергают дегидрированию с 55 помощью элементарной серы, дихлордицианобенэохинона, хлоранила или палладия на угле с последующей в случае ла, смесь нагревают в сосуде с обратным холодильником в течение 1 ч

20 мин. После экстрагирования двумя порциями в 30 мп 0,2 н. НС1 водные фазы титруют до рН 9 концентрированным аммиаком и экстрагируют двумя порциями в 300 мп эфира. После выпаривания остаток распределяют между водной фазой с рН 4,5 и этилацетатом.

После выпаривания этилацетата получают 1,5 г этилового эфире /3-карболин-3-карбоновой кислоты, который идентифицируют масс-спектрметроическим анализом, на основании молекулярного веса 240, т.пл. 230-233 С.

Пример 3. 0,5 г P -êàðáîëèí-3-карбоновой кислоты, 30 мп н-пента-нола и 5,0 мл концентрированной серной кислоты смешивают н отстаивают

3 ч в паровой бане. После охлаждения добавляют 30 мп води и аммиака, что" бы установить рН приблизительно 6.

Водную фазу, которую удаляют от пентаноловой фазы, промывают М»ным раствором бикарбоната натрия. Пентанольную фазу сушат сухим сульфатом магния и выпаривают. Выход н-нентил"/3-карболин-3-карбоксипата 0 4 r

В t т.пл. 209-210 С. Соединение перекристаллизовывают в ксилоле, получено о

0 3 г вещества с т.пл. 216-219 С.

Выход, 7

Т.пл., !!С

195-97

200-02

191-94

215-17 н-с н изо-С Н

19

53

СН -СН=СН, втор С4Н

3 11

Аналогично получают следующие соединения общей формулы I (см.табл.1).

Таблица 1

1О

258-60

4-С6 Н4С1

3,4-С6 Н С!2

44 260-6 1!

4335 4 воды смесь экстрагируют хлороформом получено 1 г карэтоксиметил-P-карболин-3-карбоксилат с т.пл. 202-203 С о (33X).

Аналогично получают следующие соединения общей формулы I (см.табл.2).

Таблица 2 нео С Н, н С7Н19

297-300 15 4-С Н ОСН . 40

6 4

242-44 сн сн N(cH ) 140-41 (НВГ4 -соль) 14 165-68

234-38

221-23

114-18

261-64

20 сн с н

СН СН ОН

СН СНОН-СН ОН 46

24 сн cF>

ВыТемпература плавления, С ход, Ж

ОС Н 83

С2 нк

I н-С Н

174-194 (ра зл.) 56 142-160 (разл. ) 6 1 190-192

50 166-169

65 130 (разл;) изо C5Н! н-С4 Нф

Пример 4. 0,2 г Д -карболин-3-карбоновой кислоты, 1 r фенола и 1 мл оксихлорида фосфора смешивают в колбеЗ0

Полученную однородную смесь отстаивают в течение 2 ч на паровой бане.

После охлаждения добавляют 5 мп ледяной воды и смесь перемешивают в течение 4 ч. Затем реакционную смесь 35

> иеитрализуют твердым бикарбонатом натрия так, чтобы осадить твердое светло-коричневое вещество. Жидкость удаляют из твердой фазы отсасыванием и .твердую фазу промывают 17-ным раст-40 вором бикарбоната натрия водой и эфиром. Получено 0,1 г фенил- -карболин-3-карбоксилата с т.пл. 237-239 С.

Аналогично. получают параметоксифенил- -карболин-3-карбоксилат изб KRp45 болин-3-карбоновой кислоты, параметоксифенола и оксихлорида фосфора.

Т.пл. вещества 242-244 С.

Пример 5. 0,4 г 55Х-ной суспензии гидрида натрия в минеральном 50 масле добавляют к суспензии 2,1 г -карболин-3-карбоновой кислоты в

25 мн диметилформамида, через 5 минут добавляют 1,2 мл этилхлорацетата.

Смесь нагревают в сосуде с обратным холодильником в течение 4 ч и затем в вакууме выпаривают диметилформамид.

После добавления к остатку 100 мп

Пример 6. 10,2 r этилового эфира 4-метил-1,2,3,4-тетрагидро-j3-карболин-3-карбоновой кислоты растворяют (суспендируют) в 300 мп ксилола и смесь кипятят в течение 1О мин в аппарате Дина-Старка чтобы удалить

О влагу. После охлаждения до 100-110 С добавляют 2, 1 моль -эквивалентна серы и смесь кипятят при нагревании в сосуде с обратным холодильником в течение 5 ч. Затем в вакууме выпаривают ксилол.. Остаток растворяют в хлороформе и очищают хроматографией (хлороформ-этанол) на двуокиси кремния, чтобы удалить непрореагировавшую серу. Получают этиловый эфир 4-метил- -карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 235-239 С (выход 72X).

Пример 7. R -замещенные эфиI ры 8 -карболин-3-карбоновой кислоты общей формулы I и перечисленные в габлице 3 синтезируют из соответству ощих этиловых эфиров 4-замещенной

1,2,3,4-гетрагидро-Р-карболин-3-карбоновой кислоты аналогично примеру 6.

Таблица 3

5 ! I

1114335

Продолжение табл.3

2 3 4

72 197-201

85 237-242 п-СН ОЪ

С6Н4

180 (разл. ) 10

172-175

51

С Н„

Пример 8. 3,1 г этилового

15 эФира 4-этил-1, 2, 3, 4-тетрагидро-я-карболин-3-карбоновой кислоты растворяют в 50 мп сухого толуола, смесь охлаждают до 15 С и после добавления о

5 r дихлордицианбензохинона перемеши-+ вают в течение ч при 15 С. После

О

I разбавления 150 мл этилацетата реакционную смесь несколько раз экстрагируют 5Х-ным водным раствором аммиака и промывают до нейтрализации солевым раствором. После высушивания сульфатом натрия, Фильтрации и выпаривания растворителя в вакууме получают

2,95 г этилового эфира 4-этил-(-карболин-3-карбоновой кислоты, который перекристаллизовывают из диизопропилового эфира. Получают 2,25 r перекрисщллизованного соединения котоо рое разлагается при 174-190 С.

Л р и м е р 9; 6,21 г этилового эфира 4-метил-1,2,3,4-тетрагидро-(3-карболин- 3-карбоновой кислоты растворяют в 120 мл теплового мезитилена н после добавления 4,1 г Рд/с (10X) кипятят при нагревании в сосуде с обратным холодильником (165 С) в те-,"® чение 7 ч. После охлаждения катализа.тор удаляют фильтрованием, промывают

его хлористым метиленом и объединенные фильтраты концентрируют в вакууме. После перекристаллизации в ацетоне получают 4,98 г этилового эфира

4-метил"р-карболин-3-карбоновой кислоты с т.пл. 234-237 С.

Пример 10. А. 1 r этилового эфира R-замещенной р карболии"3-кар- 50 боновой кислоты суспендируют (растворяют) в 10 мл спирта и нагревают до 50 С в течение 5-24 ч после добав0 ления 20 мг бромида меди (lI). 3a ходом реакции следят с помощью тонхд-< слойкой хроматографии. Для того, чтобы вццелить полученное соединение, добавляют ледяную воду и полученный таким образом осадок удаляют фильтро-ванием, промывают водой, сушат и перекристаллйзовывают.

В. 100 мг натрия растворяют в 10мл спирта и добавляют 1 г производного сложного этилового эфира. Реакционную смесь нагревают до 60-80©С. С целью выделения полученного соединения добавляют ледяную воду и соединенйе обрабатывают так, как и способе А.

С. Газообразный хлористый водород пропускают в раствор или суспензию

1 г производного сложного этилового эфира в 10 мл спирта при охлаждении льдом до насыщения. Затем реакционную смесь перемешивак1т в течение 6-24 ч при комнатной температуре. Время реакции определяют с помощью тонкослойной хроматографии. Реакционную смесь смешивают с ледяной водой и устанавливают рН 9-10 путем добавления концентрированного аммиака при охлаждении льдом. Осажденный продукт обрабатывают, как в способе А.

Таким образом получают следующие соединения.

Согласно способу А: пропиловый эфир 4-метил-/Ь карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 210-213 С, метиловый эфир 4-этил-Р-карболин-3-карбоиовой кислотй, т.пл. 208-210 С.

Согласно способу С: метиловый эфир 4-пропил-, -карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир 4-метил-Я-карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 243-246ОС

2-оксиэтиловый эфир 4-метил- -карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 208210 С.

Согласно способу В:

2-оксиэтиловый эфир 4-изопропил- -карболин-3-карбоновой кислоты, бенэиловый эфир 4-изолропил-/ -карбо» лин-3-карбоновьй кислоты, пропиловый эфир 4-этип- 3-карболки-3-карбоновой кислоты, изопропиловый эфир 4-этил-ф-карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир 4-н-пропил-P-карболин-З-.карбоновой кислоты, пропиловый эфир 4-н-пропил"7-карболин-3-карбоновой кислоты, 2-оксиэтиловый эфир 4-н-пропил-/3-карболин-3-карбоновой кислоты, изопропиловый эфир 4-изьпропил-/3-карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир-4-н -бутил- 6-карболин3-карбьновой кислоты, 7 . 1114

Пример 12. 400 мг этилового эфира 7-нитро-1,2,3,4-тетрагидро- 9-карболин-3-карбоновой кислоты раст- э воряют в 40 мп горячего ксилола и 40 л после добавления 400 мп палладия на .э угле (10X) нагревают в сосуде с об- б ратным холодильником в течение 30 ч. .эт

Катализатор отфильтровывают вакуум- -к фильтром и хорошо промывают теплым 4S эт ксилолом. Фильтрат концентрируют.в -к вакууме и остаток хроматографируют эт на силикагеле смесью хлороформ— -к этанол (10:2). Получают 260 мг эти- эт лового эфира 7-нитро»ф-карболин-3- зО -3

-карбоиовой кислоты с т.пл. 321 С 23 (с разложением) . эт

П р я м е р 13. 2,58 r этилового ли эфира 5-метил-1,2,3,4-тетрагидро-/3-. 298

-карбоаин3-карбоновой кислоты раст- SS этип воряют в 40 мп абсолютизированного боли толуола, охлаждают до 15 С, добавля- . 28

О ют 2,72 г.дихлордицианбензохинона и эт

2-оксиэтиловый эфир 4-н-бутил-Р-кар= болин-3-карбоновой кислоты, пропиловый эфир 4-н-бутил-/ -карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир 4-циклогексил-/1-карболин-3-карбоновой кислоты, пропиловый эфир 4-циклогексил-/3-карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир 4-фенил-(-карболин-3-карбоновой кислоты, f0 пропиловый эфир 4-ценил-/3-карболин-3-карбоновой кислоты, изопропиловый эфир 4-фенил- -карболин-3-карбоновой кислоты, бутиловый эфир 4-фенил-8-карболин-3- 1

-карбоновой кислоты, 2-оксиэтиловый эфир 3-фенил-/ -карболин-3-карбоновой кислоты, метиловый эфир 4-н-пентил-P-карболин-3-карбоновой кислбты. 20

Пример 11. Используют 720 мг этилового эфира 6-фтор-1;2,3,4-тетрагидро-р -карболит-3-карбоновой кислоты и 130 мп ксилола. По окончании реакции дегидрирования (около 20 ч, контроль с помощью хроматографии) раствор концентрируют выпариванием в вакууме и остаток хроматографируют . на силикагеле смесью хлороформом— этанол (95:5) . Получают 300 мг этилового эфира 6-фтор-/ -карболин-3-карбоновой кислоты с т.пл. 284 С (разо лагается). После взаимодействия с соляной кислотой получают гидрохлорид, который плавится при 295 С с разложением.

335 8 перемешивают в течение 1 ч при данной температуре. Затем смесЬ разбавляют этилацетатом, экстрагируют несколько раз путем встряхивания с разбавлением раствором аммиака и с насыщенным раствором поваренной соли, сушат над сульфатом кальция н концентрируют в вакууме ° Хроматография на силикагеле смесью хлороформ — этанол дает

1,56 r этилового эфира 5-метил-Р-карболин-3-карбоновой кислоты.с т.пл .

221-223 С (с разложением).

Пример 14. Аналогично примеру 1 из эфиров 1,2,3,4-тетрагидро-/ -карболин-3-карбоновой кислоты получают следующие /3 -карболинпроизводные общей формулы I: этиловый;эфир 8-метил-,3-карболин-З-карбоновой кислоты, 80Х. от теоретического выхода, Ф.пл. 230-233 С, этиловый эфир 7-фтор-/ -карболин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 6-фтор- -карболин-3карбоновой кислоты, этиловый эфир 8-фтор-/3-карболин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 5-циан-/)-карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 310 С (разлагается7, этиловый эфир 5-хлор-P-карболин-3I

-карбоновой кислоть|, т.пл. 274 C (разлагается), этиловый эфир 7-хлор-/ -карболин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 8-хлор-/3-карболин-3карбоновой кислоты, тиловый эфир 7-циан- 3-карболин-3арбоновой кислоты, тиловый эфир 5-карбэтокси-j3-карбоин-3-карбоновой кислоты, тиловьнЪ эфир 5-гидроксиметил-/3-каролин-3-карбоновой кислоты, иловый эфир 8-метил-J3-карболин-3арбоновой кислоты, т.пл. 230-233 С, Иловый эфир 5-нитро- 3-карболин-3арбоновой кислоты, иловый эфир 6-циан-/3-карболин-3арбоновой кислоты, яловый эфир 6-метокси-)3-карболин-карбоновой кислоты, т.пл. 23580С9

mohaN эфир 6-фтор-4-метил-6-карбон-3-карбоновой кислоты, т.пл. 292С (разложение), овый эфир 5-хлор-6-метоксиg-кари-3-карбоновой кислоты, т.пл.

2 С (этанол/гексан)., илевый эфир 4,6-диме тил-9-карболин1114335 (10

-3-карбоновой кислоты, т.пл. 192197 С. этиловый зафир 4-этил-6-метил- - карболин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 6-метил-4-фенил- -карболин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 4-этил-б-фтор-,6-карбо лин-3-карбоновой кислоты, этиловый эфир 6-фтор-4-пропил-/1-карболин-3-карбоновой кислоты, 1О этиловый эфир 6-фтор-4-фенил-) -карболин-3-карбоновой кислоты.

Фармакологичееки активные соединения могут использоваться для. готовых форм фармацевтических препаратов, 15 например, для перорального и парентерального введения мпекопитающим, включающая человека, в соответствии с общепринятыми способами фармацевтики. . Общепринятыми наполнителями явля" 20 ются такие приемлемые в фармацевтическом отношении органические и неорганические вещества носителей для

1 парентерального или кишечного применения, которые не дают вредной реак- 25 ции с активными соединениями. Примерами таких носителей являются вода, растворы солей, спирты, полиэтиленгликоли, полигидроксиэтоксилированное касторовое масло, жеЛатин, лактоза, амилоза, стеарат магния, тальк, крем- ниевая кислота, мойоглицериды и диглицериды жирной кислоты, сложные эфиры нентаэритритоловой жирной кислоты, гидроксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон .

Фармацевтические препараты могут быть стерилизованны и смешаны при не обходимости с вспомогательным агентами, например, смазочными материала-4О ми, консервантами, стабилизаторами, сьачивающими агентами, эмульгаторами, солями для изменения осмотического давления, буфферами и/или окрашивающими веществами и им подобными, ко- 45 . торые не оказывают вредного влияния на активные соединения.

Для парентерального применения в основном приемлемы инъекционные растворы или суспензии, предпочтительно 5О водные растворы с активным соединением, растворенным в полигидроксиэтоксилированной касторовом масле.

Ампулы являются удобными единицами дозировки 55

Для перорального применения в основном приемлемы таблетки, драже или капсулы, имеющие тальк и/или углеводный носитель,или связывающее вещество,или им подобные, причем носителем,,) предпочтительно является лактоза и/или кукурузный крахмал, и/или картофельный крахмал. Сироп, эликсир или им подобное может использоваться, если применяется подслащенный растворитель.

Обычно соединения дозируют по единичным дозам, включающим 0,05-10 мг в фармацевтически приемлемый носитель ю единицу дозы.

Доза соединений, равна О, 1300 мг/день, предпочтительно 1-30 мг/ день, при введении пациентам, например человеку, в качестве лекарства.

Фармакологические свойства соединений исследуют путем определения их способности к замещению радиоактивно меченого флунитразепама из таких бензодиазепиновых рецепторов.

Замещающую активность соединений определяют по значению 1С О и Е0 .

Значение IC представляет концентрацию, которая вызывает замещение

50Х особого связуницего вещества Н-флунитразепама (1,0 нМ, О С) в об0 разцах, включающих общий объем 0 55 мл суспензии мозговой мембраны, например, от крыс.

Испытание на замещение проводят следукицим образом.

0,50 мп суспеизии необработанного переднего мозга крысы в 25 мМ

КН2РО, РН 7, 1 (5-10 мг ткань/образец) инкубируют в течение 40-60 мин при ООС вместе с Н-диазепамом (удельная активность 14,4 Ки/ммолв, 1,9 нМ) или Н-флунитразепамом (удельная активность 87 Кн!ммоль, 1,0 нМ). После инкубации суспензию фильтруют через стекловолоконные фильтры "Whatman

GF/С", остаток дважды промывают холодным буфферным раствором и измеряют радиоактивность сцинцнлляторным счетчиком.

Испытание повторяют, но перед добавлением радиоактивного меченого бензодиазепина добавляют данное или избыточное количество соединения, замещающая способность которого должну быть оцределена. На основе полу" ченных данных можно рассчитать значение 1С

Величина ED

11 111 рецепторами в живом мозгу на 50Х по сравнению с контрольным значением.

Такое испытание in vivo проводят следующим образом.

Группы мышей инъектируют испытуемым веществом при различных дозах обычно подкожно. Через 15 мин мышам

in vitro

in vivo

1,9

Н Н

Н Н

Н Н, ОСН

ОСН СНСН

>100

1,4

400

3,2

ОСИН

118

54 сн н сн(сн ) и

0250

Осгн5

0,4

6-КОр сн>

Осгн

ОСгн

1,7

5-снЭ

Снэ

6 "ОСН >

70СН э

3,7

1,9

5-с Н5 о

С ОсгНу сн

2 У

233

1,3

®7 У

2,4 сн> бсгнg

0,56 снэ

Осгну

1,4

ОсгНу с н

2 ° 3

Н сн>

0,4

> 250

1,4

ОСН2CF3

) 250

0 5

ОС Н

6-С1

Р 250

112

> 250

Н

1,4

Н

ОС Кд

Испытуемое вещество

Р3 у

„з - Сй

К гН

1 I

1" Т

6-Осн Э

5-ОСН

5"СН ОН

4335 12 внутривеннб вводят Н/флунитразепам и после 20 мин убивают, мембраны переднего мозга удаляют и измеряют их радиоактивность с помощью сцинцилляторного счетчика. Значение ЕЭ определяют ло кривым дозовых зависимостей. Полученные данные сведены в табл.4.. Таблица 4 одавление связывания Н-флунитазепама

Е1 О в мг/мл Рщ s мг/кг (под ожно.3

Испытуемое вещество

ДвигательПодавление

Испытуемое соединение

Е030 мг/кг ная координация 30 состояния

Сложный эфир этил- -карболин-3-карбоновой кислоты

Хпордиазэпоксид

Диазепам агрессии (1/2 ч) 100

1,2

0,4

ED

ED, мг/кг (подкожно) Хлордиазэпоксид и диазепам вводят в виде промышленных инъекционных препаратов.

4 100 Некоторые соединения при испытании

40 на мьппах демонстрируют побуждающий эффект без признаков ненормального поведения, вызываемого классическими

Хлордиазепоксид () ид (2) 45 50 стимуляторами центральной нервной

Ъ системы (например, амфетамином). (3)

Диазепам 3 45 Таким образом, данный способ позволяет получать новые производные

Из табл. 5 видно, что s отличие от 1". карболин-3-карбоновой кислоты,. кохлордиазепоксида и диазапама предложен- торые могут найти применение в каные соединения подавляют состояние агрес- честве биологически активных веществ.

Составитель В.Теренин

Редактор О.Колесникова Техред 3.Палий

Ос Н- Н Н

ОСИН

Корректор: С.Черни

Заказ бб48/47 Тираж 409 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4

1114

Соединения показывают антиагрессивное действие на мышах. Подавление агрессии определяют на самцах мьппей весом 20-22 r. Мьпней изолируют в пластмассовых клетках на 3 недели.

Когда двух мьппей помещают в одну клетку, они самопроизвольно и почти мгновенно начинают драться. Это агрессивное сос ояние эффективно .подавляют некоторым. количеством психоак- 10 тивных лекарств, включающих бензодиазепины. Соединения полностью подавляют состояние агрессии, их вводят подкожно и перорально и действие определяют через 1/2 ч. На основе по 1g лученных данных определяют значение ЕР5о °

Результаты, полученные при испытании некоторых предложенньм соединений и хорошо известных транквилиэато щ ров, показаны в табл.5. Изучают также подавление двигательной координации у мышей через 30 мин после подкожного введения.

Таблица 5

335 14 сии, не вызывая нарушения двигательной координации, не проявляют успокаивающего или другого нежелательного свойства мускульной релаксации, свойственных бенэодиазепинам, поэтому приемлемы для использования в качестве неуспокоительнык противосудорожных лекарств, противоагрессивных и препятствующих возникновению чувства беспокойства или препарата стрессовой защиты.

Подавление экспираторной подвижности у грызунов широко используется в испытании на успокоительное действие. Предложенное соединение и два известных транквилизатора подвергают такому испытанию. Через 30 мин после подкожного введения физиологического раствора и испытуемых веществ крыс переносят в новую клетку и измеряют подвижность в течение первых 10 мин.

ED < является дозой, подавляющей подвижность на 50Х по сравнению с контрольными. Получены следующие результаты испытания: