Способ получения производных 1,8-нафтиридина или их солей

 

1, Способ получения производных 1,8-нафтирИдина общей формулы JxiV нО н к, где И. - этил или винил, или их солей, отличающийчто в соединении общей с я тем, формулы 0. . i. где R имеет указанные значения; : R2 - галкоксикарбонил, карбокси-, циано-, карбамоил- , амидиногруппа или группа С NH)OAIk где Alk - С -С -алкил; RJ - водород или защитная группа, гидролизуют группу RJ, когда она не карбоксил, и/или удаляют защитную группу RJ с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гидролиз проводят водным растворителем в присутствии кислоты или основания при 30100°С . Ч сл ) о:)

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

I 1 й3 — Н и

NOH

К К

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2804598/23-04 (22) 24 ° 08 ° 79 (31) 104235/78 (32) 25 ° 08 ° 78 (33) Япония (46) 23 ° 02 ° 84. Бюл. В 7 (72) Юн-Ити Мацумото, Есиюки Такасе и Есиро Нисимура (Япония) (71) Дайниппон Фармасьютикал Ко Лтд (Япония) (53) 547 ° 834 ° 2 ° 07(088.8) (56) 1. Вейганд-Хнльгетах. Методы эксперимента в органической химии.

М., Химия, 1968, с. 326. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

1,8-НАФТИРИДИНА ИЛИ ИХ СОЛЕЙ, (57) 1,. Способ получения производных 1,8-нафтиридина общей формулы

О где Й.) — этил или винил, или их солей, о т л и ч а ю щ и й3(51) С 07 D 471/04 A 61 К 31 435 с я тем, что в соединении общей формулы где R имеет указанные значения;

Н2 — С1-С =алкоксикарбонил, карбокси-, циано-, карбамоил-, амидиногруппа или группа С (=NH) OAIk где

AIk — С -С6-алкил;

R3 - водород или защитная группа> И гидролизуют группу R, когда она не карбоксил, и/или удаляют защитную группу Вз с последущим выд лени м целевого продукта в виде основания или соли

2. Способ по п. 1, о т л и ч а юФй щ и и с а тем, что гидролиз проводят водным растворителем в присутствии кислоты или основания при 30100 С °

1075976

Изобретение относится к способам получения новых производных 1,8нафтиридина, обладающих антибактериальными свойствами, которые могут найти применение в медицине.

Известен гидролиз производных,. карбоновых кислот, таких как эфиры, нитрилы, амиды, амидины, иминоэфиры в соответствующую свободную кислоту Г11.

Цель изобретения - получение производных 1,8-нафтишшина, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Поставленная цель достигается основанным на известной реакции спо-, собом получения производных 1,8нафтиридина общей формулы

О

С 5NKi где R этил или винил, или их солей, заключающимся в том, что в соединении общей формулы где В„ имеет указанные значения)

R2 — С -Cg алкоксикарбонил, карбоксй-, циано-, карбамоил-, амидиногруппа или группа

-C(=NH)OAIkp где AIk - С„-Q

-алкил;

К вЂ” водород или защитная группа, 3 гидролизуют группу R«когда она не карбоксил, и/или удаляют защитную группу R с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли. предпочтительно проведение гидролиза с использованием водного растворителя в присутствии кисЛоты или основания при 30-100 С.

Исходные продукты получают по стандартным методикам.

Стандартная методика 1.

К 10 r полифосфорной кислоты добавляют 2,18 г диэтил-N-(6-(4-ацетил)-1-пиперазинил)-5-фтор-2-пиридил )-N-этиламинометиленмалоната, и полученную смесь нагревают при 110120 С и перемешивании в течение

15 мин. После охлаждения сиропообразный продукт смешивают с ледяной водой, доводят до рН 620%-ным водным раствором гидроокиси натрия и экстрагируют хлороформом. Экстракт после высушивания упаривают досуха. Остаток кристаллизуют добавлением этилацетата. После перекристаллизации иэ этилацетата получают 1,3 r этил-7— (4-ацетил-1-пиперазинил) -1-этил-б-фтор-1, 4-дигидро-4-оксо-1, 8- нафтиридин-3-карбоксилата, т.пл ° 195"

197 С.

Стандартная методика 2.

При нагревании этил-N- 6-(4-ацетил-1-пиперазинил)-5-фтор-2-пиридил1аминометиленцианоацетата (3,3 r), 10 полученного из 6-(4-ацетил-1-пиперазинил)-5-фтор-2-аминопиридина и этилэтоксиметиленцианоацетата, до

255 С получают 2,3 r 7-(4-ацетил-1 а

-пиперазинил) -б-фтор-l, 4-дигидро- 415 -оксо-l, 8-нафтиридин-3-карбонитрила.

Полученный нитрил без дальнейшей очистки обрабатывают йодистым этилом и карбонатом калия в диметилформамиде. Реакционную смесь упаривают до-О суха при пониженном давлении. Остаток экстрагируют хлороформом, экстракт промывают водой и сушат. Полученное твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанола и Îðλ

2S форма. Получают 2,2 г 7-(4-ацетил-l-пиперазинил)-l-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбонитрила, т.пл. 289-290 С.

Стандартная методика 3.

Смесь l-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (3,25 г) и фосфорилхлорида (30 мл) кипятят в течение 5 мин. После отгонки избытка фосфорилхлорида к остатку при перемешивании добавЗ5 ляют 30 г ледяной воды и смесь остав ляют при комнатной температуре на ночь . Осадок отделяют фильтрацией, промывают водой и перекристаллизовывают из ацетонитрила. Получают 3,2 r

40 7-хлор-l-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 265-267 С.

Стандартная методика 4.

При реакции 2,6-дихлор-3-нитропи4g ридина с N-этоксикарбонилпиперазином получают 6-хлор-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-нитропиридин.

При нагревании продукта (без предварительной очистки) с раствором аммиаО ка в этиловом спирте в запаянной трубке при 120-125 С получают 6-амино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазио нил) -3-нитропиридин (т. пл. 132-134 С), обработка которого уксусным ангидридом в уксусной кислоте приводит к

6-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-нитропиридину (т.пл. 168-169" С) . При каталитическом гидрировании этого соединения в уксусной кислоте в присутствии

60 5В-ного палладия на угле получают

3-амино-6-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)пиридин. Это

3-аминопроизводное без очистки растворяют в смеси этилового спирта и

65 42%-ной борфтористоводородной кисло1075976 ты, и к этому раствору добавляют при перемешивании раствор изоамилннтрита в этнловом спирте при температуре ниже О C. Через 20 мин к раствору добавляют эфир. Полученный осадок тетрафторбората 6-ацетиламино- 5

-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил-3-пиридиндиазония отфильтровывают и промывают вначале смесью метанола и эфира, а затем хлороформом (т.пл.

117-117,5ОC с разл.) . Суспензию диазо ip ниевой соли в толуоле медленно нагревают до 120 С (температура бани) и выдерживают при этой температуре при постоянном перемешивании 30 мин.

После удаления растворителя при пониженном давлении остаток подщелачивают 10%-ным раствором карбоната натрия, а затем экстрагируют хлороформом. Хлороформенный экстракт высушивают безводным карбонатом натрия.

После упаривания растворителя кристаллический остаток перекристаллизовывают из этилацетата. Получают б-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-фторпиридин (т.пл.

132-133ОС) . 3-Фторпроизводное гидро- 25 лиэуют смесью 15%-ной соляной кислоты и метанола (1:2 по объему) . Получают 6-амино-2-(4-этоксикарбонил-1-пипераэинил)-3-фторпиридина. Это соединение обрабатывают диэтилэток- 30

:симетиленмалонатом при 130-140 С, Получают N (2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-фтор-6-пиридинил1-аминометиленмалонат (т.пл. 144145 C), затем продукт циклизуют при 35 нагревании при 255ОC в этил-7-(4.-этоксикарбонил--1-пиперазинил)-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилат (т.пл. 279-281 С), Стандартная методика 5. 4O

Смесь этил-7-(4-этоксикарбонил-l-пипераэинил)-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоксилата (10,5 r), диметилформамида (100 мл) и карбоната калия (7,4 г) нагревают при 100 С в течение 15 мин.

К этому раствору добавляют раствор

10,1 r этиленбромгидрина в диметилформамиде и смесь нагревают при100 С и перемешивании в течение

45 мин. После удаления образующегося неорганического соединения фильтрацией фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 80 мл воды, и полученные кристаллы отделяют Фильтрацией и пе- 55 рекристаллиэовывают из этилового спирта. Получают 10,2 г этил-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-б-фтор-1-(2-оксиэтил) -1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоксйлата 6О (т.пл. 215-217 C) ° К раствору этого оксиэтилпроизводного (4,6 г) q хло,роформе (50 мл) добавляют 5,0 r тионилхлорида, и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин.

После охлаждения раствор обрабатывают 30 мл воды и нейтрализуют насыщенным раствором бикарбоната натрия.

Хлороформный слой отделяют, промывают водой и высушивают безводным, сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток хроматографируют на силикагеле (злюент — хлороформ), и кристаллы, полученные упариванием основной фракции, перекрис. таллизовывают из этилацетата. Получают 4,7 г этил-1-(2-хлорэтил)-7†(4-этоксикарбонил-1-пиперазиннл)—

-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафти. ридин-3-карбоксилата (т.пл. 143144 С), Стандартная методика 6.

К хорошо перемешиваемой смеси этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил) -1,4-дигидро-б-нитро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (4,7 г) и карбоната калия (3,77 r) в 40 мл диметилформамида при 80 С добавляют

3,8 r йодистого этила. Смесь перемешивают в течение 80 мин при той же температуре (80 C) . После .удаления нерастворимого остатка фильтрацией

Фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и экстрагируют хлороформом.

После упаривания хлороформа и добавления эфира к остатку получают 4,5 г этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил) -l.-этил-1,4-дигидро-б-нитро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоксилата, T,ïë 211-212ОС.

K раствору этого продукта (8,0 r) в 200 мл уксусной кислоты при 7080 С добавляют порциями 16 г восста.новленного железа. После перемешивания в течение 0,5 ч при этой же температуре к смеси доьавляют этиловый спирт. После фильтрования фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 300 мл воды, и смесь охлаждают в бане со льдом. Полученное твердое вещество собирают и перекристаллизовывают иэ этилового спирта. Получают 5,8 г этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-б-амино-l-этил-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата, т.пл

265 270оC.

1

Пример 1. Этил-1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-пиперазинил)-1.,8-нафтиридин-3-карбоксилат (3,48 г) нагревают с 30 мп водной 5В-ной гидроокиси натрия на водяной ьане в течение 30 мин. После охлаждения уксусной кислотой рН доводят до 7. Полученный твердый про дукт соьирают и иерекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 3,0 r 1-этил-6-Фтор-l,4-дигидро-4-оксо-7-(l-липе разинил)-1,8-нафтиридин-3- карбоновой кислоты, т.пл. 220-224ОС.

1075976

Пример 2. Смесь этил-7†(4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (20 г) и 20%ной соляной кислоты кипятят с обратным холодильником в течение 3,5 ч, а затем к реакционной смеси добавляют 100 мл воды и 200 мл этилового спирта. Получившееся твердое вещество собирают и растворяют в 300 мл горячей воды. В раствор доьавляют 5 г 10 активированного угля и отфильтровывают. К фильтрату добавляют 25,5 мл концентрированной соляной кислоты и при охлаждении в бане со льдом получают 15,2 г гидрохлорида 1-этил- )5 †-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пипе. разинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. выше 200 С.

14,2 r гидрохлорида растворяют в 100 мл водной 4%-ной гидроокиси натрия и разбавленной уксусной кислотой доводят до рН 7,5. Осадок собирают, промывают и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 11,7 г 1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Пример 3. 7-(4-Ацетил-1-пиперазинил) — l-этил-б-фтор-1,4-дигиДро-4-оксо-1,.8-нафтиридин-б-карбонитрил (3,43 г) растворяют при нагревании в 10 мл концентрированной серной кислоты. Раствор нагревают в течение 15 мин на паровой бане, а затем выливают в ледяную воду. Раст- 35 вор доводят до рН 8 водной 10%-ной гидроокисью натрия и экстрагируют хлороформом. Экстракт промывают водой, высушивают и упаривают хлороформом. Полученный осадок кристалли- 40 зуют доьавлением этилового спирта и хлороформа. Получают 3,35 r 7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-б-фтор

-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксам да, т пл. 282-283ОС. 45

Смесь 7-(4-ацетил-1-пиперазинил)— — l-втил-б-фтор-l,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксамида (3,3 г) уксусной кислоты (20 мл) и концентрированной соляной кислоты (20 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. Смесь упаривают до трети объема и доводят рН до 7 водной 10%-ной гидроокисью натрия. Полученное твердое вещество собирают, промывают водой и перекрис- 55 таллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 2,92 г

1-этил-б-фтор-1 4-дигидро-4-оксо-7†(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты. 60

Пример 4 . К перемешив аемому раствору этил- l-этил-б-фтор-l, 4-дигидро-4-оксо-7- (4-трифторацетил-1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-З-карбоксилата (2, бб г) в смеси хлороформа (20 мл) . — и метанола (30 мл) добавляют раствор карбоната натрия (4,14 r) в 60 мл воды. Смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре, нейтрализуют уксусной кислотой и экстрагируют хлороформом.

Экстракт высушивают и хлороформ упаривают. Получают кристаллический продукт. Сырой продукт перекристаллизовывают из этилацетата„ при этом получают 2,0 r этил-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата, т пл. 150-151 С

Карбоксилат (1,74 г) нагревают с 15 мл 5%-ного водного раствора гидроокиси натрия на водяной бане в течение 20 мин. После охлаждения уксусной кислотой доводят . . рН реакционной смеси до 7. Полученное твердое вещество собирают и перекристаллизовывают из смеси этанола и хлороформа. Выделяют 1,5 г 1-этил-б-фтор-1.,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты»

Пример 5. 6-Фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1-винил-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоту (т.пл. 256-260 С) получают из этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил) -1-винил-1,8-нафтири; дин-3-карбоксилата по способу примера 4.

Пример б. 5%-ный раствор гидроокиси натрия (30 мл) добавляют к 1,5 г 7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-l-винил-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в те чение 5 ч. После охлаждения рН раствора доводят до 7 уксусной кислотой, Полученный осадок отделяют фильтрова нием. Осадок растворяют в водной

10%-ной уксусной кислоте при нагревании, и рН раствора доводят до 7 раствором аммиака. Полученный осадок отделяют фильтрованием, выделяют

0,98 г б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7†(l-пиперазинил)-l-винил-1,8-нафтири. дин-3-карбоновой кислоты.

Пример 7. Смесь этил-1-этил

-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)—

-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (10 г), 15%ной соляной кислоты (50 мл) и этилового спирта (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 45 мин.

После упариван:. я этанола смесь охлаждают. Полученное твердое вещество отделяют, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси дихлорметана и этилового спирта. Получают

7,5 r 1-этил-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 246-247 C.

1075976

Раствор 7,5 г. 1-этил-7-.(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил) †-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты в 75 мл водной

10%-ной гидроокиси натрия кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. 5

Смесь охлаждают и доводят рН до 7 уксусной кислотой.

Полученное твердое вещество собирают, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта 1О и хлороформа. Получают 5, 45 r 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Пример 8. Перемешиваемый 15 раствор 1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-трифторацетил-1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (1,12 г) в 30 мл уксусной кислоты оставляют на ночь при комнат- 20 ной температуре. После упаривания уксусной кислоты при пониженном давлении рН остатка доводят до 8-9 разбавленным раствором аммиака. Выпавший осадок собирают, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают

0,6 r 1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Пример 9. К раствору 7-(4-бензилоксикарбонил-1-пиперазинил)-1-этил.-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1 8-Нафтиридин-3-карбоновой кислоты (1,4 r, т.пл. 232-234 С) в смеси этилового спирта (20 мл), воды (8 мл) и пиридина (2 мл) добавляют

140 мг 5%-ного палладия на угле.

Смесь гидрируют при комнатной температуре при встряхивании. После поглощения 84 мл водорода смесь фильт- 40 руют для удаления катализатора и фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 16 мл воды и рН раствора доводят до 7, при этом образуется оса- 45 док. Осадок отделяют, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа.

Получают 0,82 r 1-этил.-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)— ,-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

50 !

Пример 10. 1-Этил-6-фтор-1 4-дигидро-4-оксо-7-(4-(p,p y-трихлорэтоксикарбонил) -1-пиперазинил)— . -1,8-нафтиридин-З-карбоновую кислоту (500 мг) обрабатывают 500 мг цинковой пыли и 5 мл уксусной кислоты при комнатной температуре в течение 2 ч.

После фильтрования фильтрат упаривают при пониженном давлении. Остаток 60 растворяют в воде и нейтрализуют раствором авеюиака. Полученный,осадок собирают и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 290 мг 1-этил-6-фтор- 65

-1, 4-днгидро-4-оксо-7- (1-пиперазинил)

-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Пример 11. Смесь этил-1-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-эток- сикарбонил-1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (т.пл. 171173 С) (0,8 г), 10Ъ-ной гидроокиси натрия (6 мл) и этилового спирта (2 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения рН раствора доводят до 7,0-7,5

10%-ной уксусной кислотой. Осадок отделяют фильтрованием, промывают этиловым спиртом и перекристаллизовывают из смеси диметилформамида и этилового спирта. Получают 0,57 г

1-зтил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Полученную карбоновую кислоту (0,2 r) растворяют в 5%-ной соляной кислоте, раствор упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток кристаллизуют из воды. Получают гидрохлорид этой кислоты (0,21 г) .

0,2 г укаэанной карбоновой кислоты растворяют в 7%-ном растворе метансульфоновой кислоты при нагревании. После охлаждения осадок перекристаллизовывают из водного метанола. Получают аддукт метансульфоновой кислоты с этой карбоновой кислотой (0,22 r) с т.пл. выше 300 С (с разл.) .

Карбоновую кислоту (1,0 г) при нагревании растворяют в этиловом спирте, затем к раствору добавляют уксусную кислоту (1 мл) . После охлаждения смеси полученные кристаллы отделяют,.перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают аддукт уксусной кислоты и карбоновой кислоты (0,93 r) с т.пл 228-229ОС

Стандартная методика 7.

К смеси 37%-ного формалина (12 мл) и муравьиной кислоты (18 мл) добавляют 6,0 г 1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-окоо7- (1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

Смесь нагревают при 120-125 С в течение 4 ч при перемешивании. Затем смесь упаривают досуха при пониженном давлении, и рН остатка доводят до 8 добавлением водного 7%-ного бикарбоната натрия. Экстрагируют хлороформом. Экстракт высушивают и растворитель упаривают..Осадок перекристаллизовывают из смеси хлористого метилена и этилового спирта.

Получают 5,0 r 1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-7-(1-метил-1-пиперазинил)-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 228-230 С.

I

С о е д и н е н и е. 1. 1 Этил 6-фтор-1, 4-дигидро-4-оксо-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновая кислота.

1075976

10

Штамм

1 .- 1

Грамположительные бактерии

1,56

0,78

0,78

3,13

0,78

0,78

12,5

12,5

12,5

12,5

12,5

1,56

1, 5 6

1,56

Грамотрицательные бактерии

Escherichia coli NIHIIC-2 0,2

Oil

0,2

0,05

Escherichia coIi P-5101

Escherichia coIi P-140a

0,1

0,1

Oil

0,2

0ga

0i l

0,05

0,05

0,.1

0,1

ЯЬ igel la f Iexner i 2а

0,1

0,2

0,2

ShigeIla fIexneri 4а P-330

0,2

0,39

0,39

KIebsieIIa pneumoniaI Р 13

0,2

0,1

0,2

Oil

0,2

0,2

0, 39

О, 7 8

0,39

0,2

0,39

0,78

0,2

0,39

0,39

0,1

0,2

0,2

0,39

0,2

0,39

С о е д и н е н и е 1 ° 1-Этил-

-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пипераэинил)-1,8-нафтирндинметансульфонат, С о е д и н е н и е 2. 6-Фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пиперази- 5 нил)-l-винил-1,8-нафтиридин-З-карбоновая кислота.

С о е д и н е н и е A (известное) . 1-Этнл-1,4-дигидро-4-оксо-7-(l-пиперазинил)-1,8-нафтирндин-3-карбоновая кислота (неэамещенный

6-нафтиридин) .

С о е д и н е н и е В .(получено стандартным методом) . 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-7-(4-метил-l-пиперазинил) -4-оксо-l, 8-нафтиридин-3-карбо-. новая кислота.

С о е д и н е н и е С (известное). б-Хлор-1-этил-1 4-дигидро-4-оксо-7I

20 — (1-пиперазинил) -хинолин-3-карбоновая кислота.

Staphylococcus aureus 209 РХС-1

Staphylococcus aureus Р 50774

Streptococcus faecaIis P-2473 Streptococcus pyogenes 65а

Corynebacterium pyogenes С-21

БаХтопеХХа typhimurium $-9

Salmonella enkeritides Р 1891

Entегоbacter cIoacae P-2540

Pseudomonas aeruginosa tsuchijima;

PseudOmonaS aeruginosa Р 12

ЯеггаТ1а marcescens 1РО 3736

Proteus morgani Kono

Proteus mirabiIis P-2381

С о е д и н е н и е D (иэвестное1„

1-Этол-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пипераэинил)хинолин-3-карбоновая кислота.

С о е д и н е н и е Е .(известное).

1-Этил-1,4-дигидро-7-метил-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновая кислота.

С о е д и н е н и е F (известное).

8-Этил-5,8-дигидро-5-оксо-2-(l-пиперазинил)пиридо(2,3-4)пиримидин-б-карбоновая кислота.

С о е д и н е н и е G (известное).

Натриевая соль а(†(5-инданилоксикарбонил)бензилпенициллина.

С о е д и н е н и е Н (известное).

DM-Аминобенэилпенициллин.

С о е д и н е н и е Х (известное).

7"(D-,à(.-йминофенилацетамидо) дезацетоксицефаллоспориновая кислота.

Антибактериальная активность in

vitro при минимальных ингибирующих концентрациях предлагаемых соедине.ний приведена в табл. 1 и 2.

:Taблица 1

Концентрация, мг мп, соединения

107597.6

Таблица 2

Штамм

Грамположительные бактерии

StaphyIococcus aureus 209 РХС-1

100

StaphyIococcus ангелов Р 50774

0,78

50 1,56

1,56

streptococcus faecaIis P-2473

6,25

6,25

)200

Carynebacterium pyogenes С-21

Грамотрицательные бактерии

6,25

0,39

0,1

12,5

0,39

0,2

0,05

3,13

0,2

3i13!

Escherichia coIi P-140а

SaImoneIIa typhimurium S-9

SaImoneIIa enteritidis Р 1891

ShigeIIa fIexneri 2а

0,1

0,2

6,25

0,39

3,13

0,05

0,2

0,2

6,25

0,05

0,2

3,13 °

0,1

1,56

6,25

6,25

0,39 0,1

0,39

0,2

12,5

0,2

0,78

12,5

0,78 О., 2

12,5

0,39

6,25

0,1

0,2

0,39

6,25

Pseudomonas aeruginosa TsuchiJima

200

3 13 0,78

200

3,13

6,25

0,78 0,2

1,56

12,5

6,25

0,39 О,l

6,25 0 78

0,39 0,2

1,56

Грамположительиые бактерии

1,56

12,5

0,05

StaphyIococcus aureus 209 РХС-1

0,39

0,1

1,56

0,78

1 56 200

200

0 025 0,78

0,2

200 Corynebacterium pyogenes С 21

Streptococcus pyogenes 65-A

Escherichia coIi XC-2

Escherichia coIi P-5101

ShigeIIa fIexneri 4-à P-330

KIebsieIIa pneumoniae В 13

Entегоbacter cIoacae P-2540

Pseudomonas aeruginosa В 12

Serratia mascescens fF0 3736

Proteus morganii Kono

Proteus mirabiIis P 2381

StaphyIococcus auieus 50774

Streptococcus faecaIis P-,2473

Streptococcus pyogenes 65 A

Концентрация, мг/мл, соединения

25 1,56 0,78 0,39

100 12,5 6,25. 3,13 ) 200

1 56 1,56 0,78 )200

1,56 3,13 0,39

3,13 1,56 1.,56

1075976

Продолжение табл. 2 и ° Л

1 I

Концентрация, мг/мл, соединения

Штамм

Е

Грамотрицательные бактерии

1,56

Евсйет1сЫ.а coIi НАНУ 1С-2

Escherichià coIi P-5101

Escherichia coIi P-140a

6,25

6,25 12,5

6,25 6,25 12,5

1,56

200 7200

0,39 6,25

1,56

SaImoneIIa typhimurium S-9

0,78

1,56

SaImoneIIa enteritidis 9 1891

ShigeXIa fhexneri 2а

ShigeIIa fIexneri 4-à P-330

KIebsieIIa pneumoniae,9 13

Entегоbacter cIoacae P-2540

Pseudomonas aeruginosa Tsuchi)ima

0,78

0,2

1,56

3,13

12,5

3 13 12,5

6,25 200

3,13

1,56

6,25

6,25

) 200

100

6,25

3,13 )200 >200

6,25 7200 >200

50 200 )о200

1,56

12,5

Pseudomonps aeruginosa, Р 12

Serratia lharcescens ЙГО 3736

Proteus morgani IKono

>200

3,13

3,13

100 >200

0,78

3,13

3,13 12,5

0,78

3,13

Терапевтическая эффективность

in vivo.

Соединения 1, 1 и 2, а также соединения А - G (каждое) растворяют в деионизированной воде или. суспенди руют в 2,0В-ном водном растворе СМС. каждый из растворов вводят орально мьзаам, предварительно зараженным тест-микробами, Средняя эффективная доза (ED < ) представлена в табл. 3.

Из результатов табл. 1 и 2 следует, что соединения 1, 1 и 2 обладают очень высокой антибактериальной активностью по отношению к грамположительным и грамотрицательным45 бактериям, включая Pseudomonas aeru

ginosa; соединение А (6-незамещенный

1,8-нафтнридин) уступает Ilo антибактериальной активности по отношению к грамположительным H rpaMoTpHuaTenr ным50 бактерий предлагаемым соединениям.

Таблица 3

Е0 „, мг/кг, при введении

° е

Соединение

taphyIococcus aureus Escherichia coIi

50774 (перорально) Р-5101 (перорально) 1,8

9,0

9,0

1,8"

Proteus ю1гаЫ?1в P-2381

1 ве к1оюопав aeruginosa

М 12 (перорально) 16

1075976

Продолжение табл. 3 Соединение

ED>, мг/кг, при введении

Pseudomonas aeruginosa

М 12 (перорально) Escherichia coIi

Р-53.01 (перорально) taphyIococcus aureus

50774 (перорально) 33 4

2,4

1,3

)200

10,6

>100

1,2

4,8

)100

Около 15

Около 100

21,9

15,5

4,7

) 200

29,2

)800

99,5

21,2

215

201,6

100

10-40

43,5

) 400

2 2

400

22,6

12,1

Рассчитано для свободной карбоновой кислоты.

Мыши-самцы (ddY) весом 20 г заражаются инфекцией StaphyIococcus

aureus В 50774 внутривенно дозой 5—

10 LDgs(около 9xf0 клеток/мышь) бак. териальной суспенэии в физиологическом растворе.

Escherichia coIi Р-5101. Внутрибрюшная инфекция дозой 5 — 10 LD6a 40 (около 9 х 10 клеток/мышь) бакте6 риальной суспензии в триптосоевом бульоне.

Preudomonas aeruginosa В 12.

Внутрибрюшинная инфекция дозой 50 - 45

100 LD<< (около 9 х 10 клеток/мьааь) бактериальной суспенэии в триптосоевом бульоне с 4% муцина.

Лечение: препарат вводится,цважды (через 5 мин и б ч после заражения) .

Наблюдение: S taphyIococcus aureus

У 50774 — 14 дн.; Escherichia coIi

P-5101 — 7 дн.; Pseudomonas aeruginosa М 12 — 7 дн.

Иэ результатов табл. 3 следует, что соединения 1 и 1 демонстрируют высокую терапевтическую эффективность при общей инфекции грамположительными и грамотрицательными бактериями; терапевтическая эффективность соеди- 6О нения 2 в отношении грамположительных бактерий ниже, чем соединений l и 1, но в отношении грамотрицательных бактерий его терапевтическая эффективность выше. Таким образом, 65 соединение 2 особенно полезно для лечения общей инфекции, вызываемой ,Pseudomonas aeruginosa; соединения

1, 1 и 2 демонстрируют лучшую терапевтическую эффективность при общей инфекции грамположительными бактериями, особенно Pseudomonas aeruginosa, чем соединения A и С, соединения Е и F которые предстаВляют собой промышленные синтетические антибактериальные вещества, и соединения

G Н и (, которые представляют собой промышленные антибиотики; соединения 1 и 1 обладают большей терапевтической эффективностью, чем .соединение D в отношении грамположительных бактерий in vivo.

Терапевтическая эффективность

in vivo.

Терапевтическую эффективность соединений 1 и 2 определяют на мышах при восходящей инфекции почек, вызываемой Pseudomonas aeruginosa М 12.

Полученные .результаты (ED<« мг/кг) представлены в табл. 4.

Методика испытания.

У мышей-самок (ddY) весом 22-30 r под внутривенным пентабарбиталовым наркозом (50 мг/кг) небольшим надлобковым надрезом вскрывают пузырь и вводят 0,1 мл разбавленной в отношении 1:10000 культуры Pseudomonas

aeruginosa В 12,. выращенной за 20 ч, с помощью 0,25 мл шприца и 0,25 мм

1075976

17 иглы. Мышей ограничивают в питье в течение 1 — 3 дней и на 1-й день после инфицирования в течение трех дней после инфицирования дважды в день вводят испытуемые препараты. Для выявления бактерий на пятый день после заражения почки извлекают, го-. товят поперечные среды, помещают в агар Кинг А!! и инкубируют при

37 С в течение ночи. При этом в почо

icax не обнаруживают бактерий восхо- 1Î дящей инфекции почек. Значения ED g рассчитаны с помощью усредненных анализов.

ЭфФективность in vivo соединенйй при восходящей инфекции почек Pseudo. )5

monas aerug1nosa 9 12 на мыаах приведена в табл.4.

Продолжение табл ° 5

1516

) 5000

7 4000

)5000

3000

На основании результатов табл.5 можно сделать выводы о том, что предлагаемые соединения имеют очень

2О низкую токсичность; соединение В, полученное введением метильной группы в положение 4, в 1-пиперазинильной группе соединения 1 демонстрирует одинаковую или более высокую

25 антибактериальную активность, чем предлагаемые соединения (см.табл.

1-3), однако оно имеет очень высокую токсичность

Подострая токсичность.

30 Соединение 1 перорально вводят однократно шести мишам-самцам (2CLICR линии), имеющим средний вес

20 г, в количестве 2 мг/кг в один иэ 14 дней. В течение испытательного

35 периода производят взвешивание каждой из seameN Ha 15-й день проводят гематологическое исследование. После гематологического исследования мышей умерщвляют и взвешивают.каждый

4р из органов, а также проводят гистопатологическое исследование.

Та блица 4

2,4

Перорально

0,56

Не наблюдается отклонений от нормы в весе тела и органов в группе

4 мьзаей, которой вводили соединение l.

Гематологические исследования и гис.топатологическое наблюдение также не обнаруживают отклонений по сравнению с контрольной группой мы50

Уровень в плазме.

Собакам (кобели) весом :12 tcj каж. дый перорально вводят капсули, содержащие одно из соединений l и 2, дозой по 25 мг/кг реса с 200 мл моло ка. Образцы крови берут из вены каждой из собак через 0,5; 1, 2, 3, 6, 8 и 10 ч после введения и центрифугированием каждого образца отделяют плазму.

60 Уровень препарата в крови определяют тонкослойной хроматографией с использованием Escherichia coIi Kp. в качестве индикатора.

Полученные при этом результаты

g5 показаны в табл.6. 7 4000

) 4000

>4000

210

> 2000

) 2000

Соединения Способ введе- ЕЮ О,Mr/êã ния

Иэ результатов табл. 4 следует, что терапевтическая эффективность соединений 1 и 2 при восходящей ин- фекции почек, вызванной Pseudomonas

aerug1nosa, намного выше, чем соединения D.

Острая токсичность.

Растворы предлагаемых и известных соединений в различных концентрациях перорально вводят мышам-самцам (@AY) (группы от 4 до 8 особей) дозой

0,1 мл на каждые 10 г веса мьааи. Ко личество погибших мышей Рассчитывает. ся через 7 дней, и в соответствии с известным методом рассчитывается значение средней летальной дозы (XD, мг/кг) .

Полученные результаты представлены в табл.5. .Таблица 5 ф

Значения, рассчитанные для карбоновой кислоты.

1075976

Таблица6

Уровень препарата в плазме, мг/мл, через, ч

Соединение

Таблица 7

0,3

2 3 6 8 10

1 0,6 2,4 5,5 5,9 4,2 3,7 2,4 10

2 н/о н/о" 1,5 2,8 5,5 5,2 4,4

40,7

606

29,4

326

15 н/о - не обнаружено.

Из результатов табл. 7 следует, что выделение соединений 1 и 2 с мочой достаточно хорошее и составляет за 24 ч 30-40Ъ от препарата, введенного перорально; уровень препаратов 1 и 2 (326-205 мг/мл) в моче превышает в 13 — 6000 раз значения

МИК (0,1-25 мг/мл) для различных бактерий (табл.1); соединения 1 и 2 демонстрируют более высокую эффективность при низких дозах при лечении инфекции мочевых путей, вызываемой различными бактериями.

30 Как следует из табл. 1 — 7 предлагаемые соединения, особенно соединения .1, 1 и 2, демонстрируют высокую терапевтическую эффективность при сильных заражениях грамположи35 тельными и грамотрицательными бактериями. После пероральыого введения они сохраняют высокий уровень в плазме крови и моче в течение длительного времени. Они низкотоксичны и эф4О фективны при низких дозах при лечении Инфекций мочевых путей и общей .инфекции, вызываемых различными бактериями.

Составитель A. Орлов

Редактор Н. Егорова Техред Т.Фанта Корректор А. Зимокосов

Заказ 540/54 Тираж 410 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раущская наб,, д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Из результатов табл.6 видно, что соединения 1 и 2 хорошо абсорбируются организмом при пероральном введении, и уровень препарата в плазме сохраняется на высоком уровне в течение довольно долгого времени, в частности, соединение 1 демонстрирует более высокий уровень в плазме, чем значения МИК (см. табл.1), в от-исааении большинства бактерий в течейие 1 — 10 ч после введения. Так, например, уровень соединения 1 в плазме (5,9 мг/мл) в 8 раз превышает .значения МИК против Pseudomonas aeru

ginosa М 12 и StaphyIococcus aureus

В 507704, и в 60 превышает значение

МИК против Escherichia coIi P-5101.

Соединения 1 и 2 демонстрируют довольно высокий уровень в плазме и таким образом, высокая антибактериальная активность препарата наблюдается при низких дозах при лечении общей инфекции, вызываемой различными бактериями.

Выделение с мочой.

Мочу собак, использованных в пре- дыдущем примере, собирают в течение

24 ч, и содержание соединений 1 и 2 в моче определяют тем же методом, что и в предыдущем примере. Полученные результаты приведены в табл. 7.

Соединение Концентрация, Выделено, мг/мл Ъ