Способ количественного определения цистеина

 

СПОСОБ КОЛтЕСТВЕННОГО OlfPEДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированиемполученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения длительности определения, в качестве цветореагента используют раствор N-xлop-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0. (Л с

C0IO3 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (1I) (s»4 G 01 N 21/78

5I. Ъ|- !

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3714318/23-04 (22) 22 ° 03.84 (46) 23.07.85. Бюл. 1(- 27 (72) С.С.Артемченко и В.В.Петренко (7 1) Запорожский медицинский институт (53) 543.42.063(088.8) (56) 1. Сиггиа С., Ханна Дис.Г, Количественный органический анализ по

tt 1! функциональным группам. М., Химия

1983, с. 540-541.

2. Коренман И.M. Фотометрический анализ. Методы определения органичес= ких соединений. N., "Химия", 1975, с. 291 (прототип).

3. Лурье Ю.Ю. Справочник по анали-!! !! тической химии. Изд. 5-е. М., Химия

1979, с. 3 1 2. (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием- полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувстви тельности и сокращения длительности определения, в качестве цветореагента используют раствор Й -хлор-1 4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0.

1168834

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения цистеина 1-амино-2 -меркаптопропионовой кислоты, применяемого в медицинской практике для задержки развития катаракты и просветления хрусталика глаза.

Известен способ количественного определения цистеина потенциометрическим титрованием с серебряно-суль- 1о

Фидным электродом в 0,1 М растворе гидроксида натрия и .

Недостатком способа является низкая чувствительность (12 мкг).

Наиболее близким к изобретению по.15 технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения цистеина, заключающийся в обработке анализируемой пробы 0,5 мл 0,02 И раствора тетра- 20 хлорпалладата аммония в 1 н, хлористоводородной кислоте с последующим измерением (через 1 ч) величины оптической плотности при 350 нм 2 .

Недостатками способа являются от- 25 носительно невысокая чувствительность (2.,33 мкг/мл) и большая продолжительность анализа (более 1 ч).

Целью изобретения является повышение чувствительности и сокращение gp длительности определения.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения цистеина путем обработки анализируемой пробы раствором 0-хлор35

-1,4-бензохинонимина в изопропаноле в среде универсального буферного раствора с рН 9,0 и последующим фотометрпрованием полученного раствора, в качестве цветореагента раствора И-хлор-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0, Универсальный буферный раствор описан в f3) .

° °

Пример. Количественное опрееление цистеина в субстанции. Навеску цистеина в пределах 0,015-0,025 г растворяют в воде в мерной колбе 50 вместимостью 200 мл и доводят до мет- ки тем же растворителем. 2 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют

3 мл О, 1Е-ного раствора N-хлор-1 4" 55

-бензохинонимина в изопропаноле и доводят до метки универсальным буфер" ным раствором с рН 9,0. Параллельно проводят опыт со стандартным раствором цистеина и контролем. Через

15 мин измеряют оптическую плотность анализируемых растворов на фоне контроля при помощи спектрофотометра при

423 нм в кюветах с толщиной слоя

1 см.

Расчет количественного содержания цистеина проводят по формуле

D 2500 Со

C Å = где D — оптическая плотность анализируемого раствора, 9 — оптическая плотность стано дартного спектрофотометрируемого раствора

С вЂ” концентрация стандартного спектрофотометрируемого раствора (0,0008 г в 100 мл);

p — навеска, г

1 — толщина слоя, см.

Результаты количественного определения цистеина в субстанции приведены г в табл.1.

Таблица 1

Навеска,г Найдено,X Метрологичес-: кие характеристики

0,0187

98,97 х=99,49

0,0220

0,0188

99,02

99,49

S=0 4313

Sv =0,0043

0,0200

0,0214

99,64

100,iO

0,0209

99,70

Сравнительная характеристика предлагаемого способа и известного приведены в табл.2.

Т а б л и ц а 2

Характеризуемы показатель

Способ звест- Предлагаеый MblH

Чувствительность, мкг/мл 2,33

0,71

Продолжительность анализа, мин

1168834

Составитель С. Хованская

Редактор А.Шандор Техред Д.Микещ Корректор М.Самборская

Заказ 4608/37 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4!5

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4

Как видно из табл.2, величина чувствительности данного способа выше, чем у известного более чем в

3 раза. По технике выполнения данный способ требует в 4 раза меньших временных затрат на проведение анализа.