Способ определения лизоцима в лейкоцитах
Изобретение позволяет повысить точность определения лизоцима (ЛЦ) в лейкоцитах путем приготовления мазков крови, нанесения на одну половину мазка 0,01% раствора гистамииа, на другую,- 0,2 М фосфатный буфер рН 7,2, инкубирования во влажной камере при комнатной температуре, всполас . кива1шя, высушивания и окрашивания фермента раствором анионного красителя амидочерный 10Б в конечной концентрации 0,05-0,15% в том же буфере . Ядро докрашивают 0,1% водным раствором азураЛ в течение 30 с и по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитьшают активность интралейкоцитарного ЛЦ. Табл.1.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (50 4 С 01 33/48
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ГОСУДАРСТВЕЯЯЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
Н А BTOPCH0MV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3757042/28-14 (22) 20.06.84 (46) 23.06.86. Бюл, Ф 23 (71) Томский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт (72) Л.П. Бушмелева, В.В. Климов и Л.И. Огородова (53) 616.07 {088.8) (56) Sckolnik Kass-J. Histochem.
Cytochem, 1973,, v. 21. с,65,-72. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИЗОЦИМА В
ЛЕЙКОЦИТАХ (57) Изобретение позволяет повысить точность определения лизоцима (ЛЦ).
„„SU„„1239597 А I в лейкоцитах путем приготовлеиия мазков крови, нанесения на одну половину мазка 0,017 раствора гистамина, на другую, — 0,2 И фосфатный буфер рН
7,2, инкубирования во влажной камере при комнатной температуре, всполас- . кивания, высушивания и окрашивания фермента раствором анионного красителя амидочерный 1ОВ в конечной концентрации 0,05-0,152 в том же буфере. Ядро докрашивают 0,17. водным раствором азураД в течение 30 с и по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитывают активность интралейкоцитарного ЛЦ. Табл,1.
1239597
Изобретение относится к области ,медицины, а именно к клинической медицине.
Целью изобретения является повышение точности способа эа счет окраски фермента раствором анионного красителя амидочерного 1ОБ.
Способ осуществляется следующим образом.
Свежеприготовленный, .высушенный на воздухе мазок крови фиксируют спнртово-формалиновым раствором (9:1) в течение в течение 30 с, расчерчивают продольно на две части, затем на-1/2 мазка, располагающегося горйзонтально, наносят 0,01 -ный раствор гистамнна, на другую часть0,2 И фосфатный буфер рН 7,2, инкубируют во влажной камере при комнатной температуре 30 мин, всполаскивают, высушивают, опускают на 60 мин в раствор анионного красителя амидочерного 10Б в конечной концентра ции 0 05-0,15 . в том же буфере. Ядра докрашивают 0,1 -ным раствором азура Й в течение 30 с, по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитывают активность интралейкоцитарного ЛП.
2.
11редлагаемый способ дает возможность диагностировать первичные и вторичные дефициты интралейкоцитарного ЛЦ вЂ” параметра, который в отличие от сывороточного показателя более достаточно отражает состояние естественной защиты организма, характер течения вспомогательного заболевания, его возможные исходы, целе10 сообразность дополнительной биологической стимуляции, В таблице приведен сравнительный анализ положительного эффекта от применения амидочерного 10Б и извест1 ного красителя. Из таблицы видно, что при использований прочного зеле- . ного нет возможности получения достоверных данных с их .полуколичественной оценкой.
Формула изобретения
Способ определения лиэоцима в лейкоцитах путем приготовления мазков . крови с последующей окраской их кис" лым цитохимическим красителем, о тл и ч а ю шийся .тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве красителя используют амидочерный 1ОБ в конечной концентрации
ЗО 0 05-0 15, l239597
3 л
А f
Е
О о °
Х 1-(В! Ф (»!
1
I ..
1!! л
СЧ
И
О л
СЧ
О сп Ю
Ю О л вт са
1 а ж
I ф
fl!
00
О л
О л
О
О!!
Ю л СФ) а ч О!
С! . л л
О (/\ л л
I. I
СЧ л
О (7
О л
О л О
О СО п л
Ю м о
О1 СЧ . CV л л
О СЧ ю
С ) л
СЧ м л л
Ю п
Ю
С Ъ . л
Ю а а о
Ф л
Ф i
U ca о м
С! л
СЧ .
М СЧ л О л ° \
1
Р1
СГ) л
О. со
Ю о
I м м \
С (л! л ° \, CO!
С!
СЧ л л
О л
C) I
y o
Ы (el о фи
Ц !о !» м
О1 Р ) л
СЧ
Ф л
СЧ! ж !
» ф !
" и
1
И
3 ж ж ф ф. о
Ц
Ф к
О
О
Ю!
1
I .I !
a! I 3 1
Р 14
I P 1
xl ex
ca I са1 Оф
ВВ I. !О I 14 1 .1 Ю I. I
ca u
I I !О М I
I I Ü Г» Х и о
1 О g I
1 Ж I
I 85 14Е
Ф I 1
N ) 1
1
Р I Ф cD о в к о.ж
1 И Ж ф 1 1
14 1 1
U 1 1 ф 1 1 а l 1
Ф
Ф
Ц
0I !!! о а о
В .
С0 н
О Ю М
vi
Ю л л
П О СЧ
Щ
О В М
° CCc ь л л
-ч О .сч о а
U Ф о Ф .Ж. 4 !В к Ф о ж
S4 I»
Я !
В о о
В
