Способ консервирования эритроцитов

Авторы патента:

A01N1/02 - Консервирование тел людей или животных, или растений или их частей; биоциды, например дезинфектанты, пестициды, гербициды (препараты для медицинских,стоматологических или гигиенических целей A61K; способы или устройства для дезинфекции или стерилизации вообще, или для дезодорации воздуха A61L); репелленты или аттрактанты (приманки A01M 31/06; лекарственные препараты A61K); регуляторы роста растений (соединения вообще C01,C07,C08; удобрения C05; вещества, улучшающие или стабилизирующие состояние почвы C09K 17/00)

„,SU» 1250236 A 1

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

gg 4 А 01 N 1/02, А 61 K 35/18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

Il0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ мол. мас. 20000 и полиэтиленоксид с мол. мас, 1500, а суспендирующий раствор дополнительно содержит натрий лимонно-кислый трехзамещенный, причем консервирующий раствор содер-, жит эти компоненты в следующем соотношении, мас.Ж:

1,2-Пропандиол 28-30

Декстран с мол. м.

20000 4-6

Полиэтиленоксид с мол. м. . 1500

Сахароза

Хлористый натрий

Бидистиллированная вода а Остальное, и суспендирующий раствор содержит компоненты.в следующем соотношении, мас.l:

Сахароза 9-11

Хлористый натрий 1,5-1,7

Натрий лимоннокислый трехзамещенный

Бидистиллированная вода Остальное (21) 3852515/28-14 (22) 29.12.84 (46) 15.08.86. Бюл. N 30 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины AH УССР (72) А. N. Воротилин и А. А. Мартыненко (53) 616.475(088.8) ($6) Авторское свидетельство СССР

N - 560613, кл. А 61 К 35/18, 1975.

Авторское свидетельство СССР

Р 888896, кл, А 61 N 1/02,. 1980.

4-6

2-4

0,5-0,7 (54)(57) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ

ЭРИТРОЦИТОВ путем их замораживания в консервирующем растворе, содержащем 1,2-пропандиол, сахарозу, хлористый натрий .и бидистиллированную воду, размораживания и суспендирования в среде, содержащей сахарозу, хлористый натрий и бидистиллированную воду, о т л и ч а ювЂ” шийся тем, что, с целью снижения степени повреждения эритроцитов, консервирующий раствор дополнительно содержит декстран с

О, 2-0,4

ВСЕ((1ЕР1 - 9

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ д " д

К А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ЬИ6.Д Й:« i;A. w

Изобретение относится к медицине, а именно к криобиологии, и может быть использовано для длительного низкотемпературного хранения эритроцитов, Целью изобретения является снижение степени повреждения эритроцитов за счет их затормаживания в консервирующем растворе, содержащем 1,2-пропандиол (IIg), сахарозу, хлористый натрий, декстран, полиэтиленоксид (ПЭО) и бидистиллированную воду при определенных соотношениях, и суспензировании после размораживания в растворе, содержащем сахарозу, хлористый натрий лимоннокислый трехзамещенный и бидистиллированную воду при определенных соотношениях.

Способ осуществляется следующим образом.

Эритроциты замораживают со скоростью 12-14 С/мин до 150-170 С после смешивания с консервирующим раствором, содержащим,X: 1,2-ПД 2830; декстран с мол. мас. 20000 4-6;

ПЭО с мол. мас. 1500 4-6; сахароза

2-4, хлористый натрий 0,5-0,7; вода бидистиллированная остальное, а после размораживания их суспендируют в среде, содержащей, : сахароза 9 11; натрий хлористый 1,5-1,7; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,20,4; вода бидистиллированная остальное.

Пример 1, К 120 мл эритроцитарной массы приливают 180 мл консервирующего раствора, содержащего, : 1,2-ПД 29; декстран вЂ” 20000

5; ПЭО-1500 5; сахароза 3; NaCI 0,6; вода бидистиллированная остальное и перемешивают. Смесь центрифугируют при 4 С (3000 об/мин) в течение 30 мин. Надостаточную жидкость и слой лейкоцитов удаляют, а осадок эритроцитов объемом 100 мл переносят в контейнер и замораживают в течение 15 мин со скоростью

13 С/мин от 25 до -170 C. Затем к::нтейнер помещают в хранилище с жидким азотом (-196 С). Через 30 дней хранения контейнер извлекают из жидкого азота и помещают в пенопластовый чехол с толщиной стенок

1250236 2 .40 мм на 24 мин, что обеспечивает о отогрев эритроцитной массы до 100 С со средней скоростью 4 С/мин. Затем контейнер переносят в воду с температурой 45 С на 80 с и размораживао ют клетки от 100 С со скоростью

80 С/мин. К размораживаемой эритроцитной массе при перемешивании в течение 5 мин добавляют 150 мл суспен10 дирующей среды, содержащей, : сахароза 10; NaC1 1,6; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,3 и вода бидистиллированная остальное.

При этом получают суспензию эрит15 роцитов, гемолиз которых в суспендирующей среде составляет 0,56 .

При переносе эритроцитов из суспендирующей среды в физиологический раствор NaC1 гемолиз составил

20 1, 34Х

Пример 2. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, используя консервирующий раствор в следующем составе, .:

25 1,2-ПД 28

Декстран-20000 4

ПЭО-1500 4

Сахароза 2

NaCl 0,5 щб Вода бидистиллированная Остальное

Гемолиз эритроцитов в суспендирующей среде 0,83, а в физиологическом растворе NaC1 1,62Х.

35 П Р и M e Р 3. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, за исключением того, что консервирующий раствор использовали в следующем составе,X:

1,2-ПД 30

Декстран-20000 6

ПЭО-1500 6

Сахароза 4

NaC1 0,7

Вода бидистиллированная Остальное

Гемолиз эритроцитов в суспензирующей среде составил 0,68, а в физиологическом растворе вЂ” 1,74Х.

После суточного хранения деконсервированных эритроцитов в суспендирующей среде показатель гемолиза увеличивается от 0,6-0,9 до 0,9-1,SX по известному способу степень разрушения составляет более 2Х.

ВНИИПИ Заказ 4353/4 Тираж 679 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4