Состав для заключения гистологических срезов

 

Изобретение относится к гистологии . Цель изобретния - увеличение срока хранения и повышение сохранности цветовых гамм красителя за счет того, что состав содержит дополнительно пенополиуретан (ППУ). Для получения заключающего состава ППУ измельчают. Полученную крошку смешивают в соотношении, мас.%: ксилол 65-70, ППУ 30-35. Сосуд, в который помещен состав, встряхивают, тем самым перемешивая компоненты. Полное растворение смолы происходит в течение 4,2 мин. Для заключения гистологического препарата на предметное стекло с окрашенным срезом наносят кашпо состава, затем накрывают покровным стеклом . После эастьтания заключающего состава препарат готов для исследования . 3 табл. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

Ogl (11) 1.5д 4 G Ol N 1/30 61 10700

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ASTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3716187/28-14 (22) 27. 03 . 84 (46) 23.08.86. Бюл.У 31 (71) Астраханский государственный медицинский институт им. А.В.Луначарского (72) P À.Зумеров, Л.Г.Сентюрова, А.Н.Блохин и Л.С.Челмодеева (53) 616-0.88.8(088.8) .(56) Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. — М ., Медицина, 1969, с.40-42.

Лилли P. Патогистологическая техника и практическая гистохимия.—

М.: Мир, 1969, с.88-102. (54) СОСТАВ ДЛЯ ЗАКЛЮЧЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ (57) Изобретение относится к гистологии. Цель изобретния — увеличение срока хранения и повышение сохранности цветовых гамм красителя за счет того, что состав содержит дополнительно пенополиуретан (ППУ) . Для получения заключающего состава ППУ измельчают. Полученную крошку смешивают в соотношении, мас.Х: ксилол

65-70, ППУ 30-35. Сосуд, в который помещен состав, встряхивают, тем самым перемешивая компоненты. Полное растворение смолы происходит в течение 4,2 мин. Для заключения гистологического препарата на предметное стекло с окрашенным срезом наносят каплю состава, затем накрывают покровным стеклом . После застывания заключающего состава препарат готов для исследования . 3 табл.

1252694 мас.У:

IE,с и но-1

Пенополиуре65-70

35

l1,:!r рг г:!»« oiно .и гся к медицине, а им I»!» к 1 истовоi ии, и может бьlTb примененор В частностир при эаклю чении i истологических срезов ь смолу

Пе,!i, изобретения — увеличение срока хранения и повышение сохранности цветовых гамм красигеля эа счет того, то остав содержит дополни— тельн< пенополиурет.гн (IIПУ) . (ос г,.в содержит ксилол и ППУ при следующем соотношении компонентов, тан 30 — 35

Определение ог|тимальных концентраций смолы приведено в табл.l.

Из табл.1 видно, что существенным признаком качества препарата, отражающим образование пузырьков воздуха под пакровным стеклом определяется минимальная нижняя допустимая концентрация П11У в предлагаемом составе. Кроме того, минимальная концентрация смолы обусловлена степенью просветления препарата, т.е. необходимо взять не менее 30,0 мас.ч. П!1.

Рассматривая свойства состава с точки зрения качества (минимальное обраэование пузырьков воздуха под покровным стеклом, достаточная степень просветления, сохранность окраски, отсутствие кристаллизации) и в то же время учитывая физико-химические свойства, необходимо отметить, что повышение концентрации смолы выше

35,0 мас.ч. не изменяет качества препарата, по перечисленным признакам, но значительно увеличивает время приготовления сос.тава (в 5 раз) и увеличивает разницу коэффициентов оптического преломления стекла и заключающего состава, что усиливает рассеяние световых волн, создает большую разнородность оптической среды.

Учитывая все сказанное, необходимо взять для приготовления заявляемого состава минимум 30,0 мас.ч. и максимум 35,0 мас.ч. смолы.

,гстав готовят иэ отходов.

Пример 1. Для получения

cocT;lBG ППУ измельчают. Смешивают в соотношении мас.7: ксилол 70, ППУ 30. Такое соотношение ингредиентов определено графическим способом путем сравнения основных признаков

25 растворения и застывания. Полученную смесь перемешивают встряхиванием.

Полное растворение смолы происходит в течение 4 мин. Для заключения на предметное стекло с окрашенным срезом иэ биологического материала наносят каплю состава, затем покрывают покровным стеклом. Полное застывание состава происходит в течение 5 мин.

Препарат готов для излучения.

II p и м е р 2. Для получения заключающего состава ППУ измельчают.

Полученную крошку смешивают в соотношении, мас.7.: ксилол 67,5 и ППУ

32,5. Сосуд, в котором помещен состав, встряхивают, тем самым перемешивая компоненты. Полное растворение смолы происходит в течение 4,1 мин., lëÿ заключения 1 истологического препарата на предметное стекло с окрашенным срезом иэ биологического материала наносят каплю состава, затем накрывают покровным стеклом.

Полное застывание заключающего состава происходит в течение 4 мин.

Препарат готов для исследования.

Пример 3. .Для получения заключающего состава ППУ измельчают.

Полученную крошку смешивают в соотношении, мас.7: ксилол 65, ППУ 35.

Сосуд, в котором помещен состав, встряхивают, тем самым перемешивая компоненты. Полное растворение смолы происходит в течение 4,2 мин. Для заключения гистологического препарата на предметное стекло с окрашенным срезом из биологического материала наносят каплю состава, затем накры вают покровным стеклом. Полное застыванне заключающего состава происходит в течение 3 мин. Препарат готов для микроскопирования.

Полученный состав для заключения серийного гистологического препарата имеет следующие зкономические и физико-химические характеристики, приводимые в табл.2 и 3.

Как видно иэ табл.2, при заключении серийных гистологических препаратов предлагаемым составом в процессе хранения в течение 24 мес. не происходит выцветания красителя, так как имеется более стабильная пептидная химическая связь С-N, по сравнению с известным составом (где имеется лабильная связь С=С, легко присоединяющая кислород). Состав

1252694

Таблица 1

Количе- Коэффициент ство оп. пр.

ППУ

Кристаллизация

Образование

ЗастыПросветление

РастКоличество ксилола ворение, мин ванне, мин пузырьков воздуха,Х

1440 отсут- 100 ствует

Отсут- 1 ствует

1,5 1400

3 600

100

80 удовле- 3 120 творительное и

0,02

3,5 5

4 3

8 3

40 3

0,02

0,02

0,02 также не подвергается кристаллизации в 1001 случаев. Раствор готовится быстрее в 300 раэ, так как исходная смола обладает большим сродством к растворителю, чем известная смола, и поэтому растворяется лучше.

Кроме того, в предлагаемом составе смолы необходимо в 2 раза меньше (30-30 мас.ч. вместо 60). В значительно меньшем числе случаев (0,027. вместо 2Х у известного состава) происходит образование пузырьков воздуха, так как состав застывает быстрее в 288 раз, по сравнению с известным.

Предлагаемый состав удаляется с предметного стекла быстрее в

1240 раз, по сравнению с известным.

Кроме того, коэффициент оптического преломления предлагаемого состава имеет статистически достоверную разницу, по сравнению с известным составом (1,50- 0,01 вместо 1,53+

+0,01), поэтому обеспечивается оптимальная для микроскопирования и

90,0 10,0 1,48+0,01

85,0 15,0 1,48i0,01

80,0 20,0 1,48+0,01

75,0 25,0 1,49+0,01

70,0 30,0 1,50+0,01

65,0 35,0 1,50+0,01

60,0 40,0 1,51+0,01

55,0 45,0 1,51+0,01 фотографирования интенсивность светового потока, максимально zнижается рассеяние световых волн, так как свет проходит через оптически более

5 однородную среду. Смола при хранении не требует специальных условий.

Окраска гистологи еских срезов, эаключенных в предлагаемый состав, не выцветает лишь в течение 24 мес. в то время как при заключении срезов в известный состав окраска их не выцветает в течение 9-10 мес.

Формула изобретения

Состав для заключения гистологических срезов на основе ксилола, отличающийся тем, что, с целью увеличения срока хранения

20 н повышения сохранности цветовых гамм красителя, он дополнительно содержит пенополиуретан при соотношениях компонентов, мас.X:

Ксилол 65-70

Пенополиуретан 30-35

1252694 Ь

Таблица 2

Наименование показателя

Пример

Расход смолы, мас.Х

Источник сырья

30 отходы

32 5

Таблица 3

Значение

Показатели качества

Коэффициент оптического

I,50 0,01

1,50 0,01

1 50+0 01 преломления

0i02

0,02

0,02

Кристаллизация

Отсутствует Отсутствует Отсутствует

Отсутствует Отсутствует Отсутствует

Растворение, мин 4

4,2

4,1

Застывание, мин 5

Удаление с предметного стекла спирта горячей воды в течение, мии 3-5

3-5

3-5

Условия хранения условий

Не требует специальных

С вЂ” N стабильная

С-N стабильная

Вид химической С вЂ” N связи стабильная

Заказ 4617/45 Тирах 778 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная 4

Образование пузырьков воздуха, Х

Выцветания красителя при хранении в течение

24 мес ° показателя качества по примеру! 2 3