Способ тестирования дофаминергической активности химических соединений

 

Изобретение относится к медицине и предназначено для испытания дофаминергических химических соединений . Цель изобретения - сокращение времени и повьшение селективности способа за счет хронического вживления электрода в медици.альный гипоталамус кролика и регистрации реакции на однократную электрическую стимуляцию до и лосле введения тестируемого соединения. Кроликам в область медиального гипоталамуса вживляют электрод. Проводят однократную электрическую стимуляцию. Регистрируют количество ударов задними конечностями , время продолжительности реакции и латентный период появления ударов. Затем вводят тестируемое соединение и снимают те же показатели . Об эффективности исследуемого : вещества судят по изменению количественных показателей каждого параметра. I (Л § Од

СОЮЭ 008ЕТСННХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИН (59 4. С ОТ"3 33/!5, А 61 B 10

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1„:

К A ВТОРСКОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

-iv (21) 3787606/28-14 (22) 24.07.84 (46) 23.07.86,Бюл. 9 27 (71) Научно-исследовательский институт нормальной физиологии им.П.К.Анохина (72) В.П.Белый (53) 615.78(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

11 562772, кл. G 01 N 38/48, 1975. (54) СПОСОБ ТЕСТИРОВАНИЯ ДОФАМИНЕРГИЧЕСКОИ АКТИВНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ С0ЕgHHEHHA (57) Изобретение относится к медицине и предназначено для испытания дофамннергическнх химических соединений. Цель изобретения — сокращение времени и повьппение селективности

„„Я0„„1246002 A 1 способа за счет хронического вживления электрода в медициальный гипоталамус кролика и регистрации реакции на однократную электрическую стимуляцию до и после введения тестируемого соединения. Кроликам в область медиального гипоталамуса вживляют электрод. Проводят однократную электрическую стимуляцию. Регистрируют количество ударов задними конечностями, время продолжительности реакции и латентный период появления ударов. Затем вводят тестируемое соединение и снимают те же показатели. Об эффективности исследуемого вещества судят по изменению количественных показателей каждого параметра.

1246002

Я)

415

Изобретение относится к медицине и касается разработки экспериментальной модели для испытания дофаминергических химических соединений, которые могут найти применение,пля лечения нервных, психических и функциональных заболеваний, связанных с эмоциальным стрессом.

Цель изобретения — сокращение времени и повьппение селе -.тивности способа за счет хронического вживления электрода в медиальный гипоталамус кролика и регистрации реакции на однократную электрическую стимуляцию до и после введения тестируемого соецинения.

Способ осуществляется следующим образом.

Кроликам стереотаксически хронически вживляют биполярный электрод из нихромового провода в изоляции (диаметр провода 0,15 мм) в область медиального гипоталамуса (вентромедиальное или дорсомедиальное ядра гипоталамуса). Затем на свободно перецвигающемся животном определяют пороговую силу электрического раздражения, при котором в ответ на однократную стимуляцию появляется 1-2 удара задними,лапами. В дальнейшем для вызова тест-реакции используют удвоенную пороговую силу раздражения. Экспериментальным контролем служат 10 последовательных раздражений, предъявляемых с интервалом

3 мин. По результатам этого тестирования находят средние величины количества ударов лапами в ответ на однократное раздражение (Х), латентного периоца появления первого удара вслед .за окончанием подачи раздражения (ЛП) и общую продолжительность поведенческой реакции (Т) . Дополнительным параметром, характеризующим динамику поведенческой реакции, может служить суммарный график количества ударов в зависимости от времени.

Об эффективности фармакологического вещества., в даннбм случае гормона коры надпочечников кортизола, судят по изменению количественных показателей каждого из исследуемых параметров ответной двигательной реакции (Х, ЛП, Т). Для определения достоверности различий по каждому из параметров поведения используеTcH не параметрический критерий t-Стьюдента,. Все зти операции проводят на одном или г1:.уппе. животных в зависимости от величины наблюдаемого эффекта от введения препарата.

Пример.Тестирование дофаминергической активности гормонального препарата — кортизола.

Отбирают одного †тр интактных кроликов весом 2,5-4 кг. С поверхности черепа под местной новокаиновой анестезией (27.-ный раствор) удаляют мягкие ткани. В черепной кости просверливают отверстие диаметром 0,5 в точке, лежащей на 1 мм сзади и на

1 мм латеральнее от места пересечения медиального черепного шва с брегмой. В это отверстие в соответствии со стереотаксическими координатами (перпендикулярно к поверхности черепной кости). погружают на глубину 12 мм биполярньп| электрод. Конечное положение электрода фиксируют. на поверхности черепной кости самотвердеющей зубной:пластмассой "Протакрил". Через 3- 5 дн после операции животное помещают в экспериментальный бокс, контакты от раздражающих электродов присоединяют с помощью гибкого кабеля к электронному стимулятору. Постепенно увеличивая интенсивность раздражения„ производят одноразовые стиму-." ляции. Во время подачи электрического раздражения (5 с) обычно наблюдается двигательная реакция кролика в виде побежки. При достижении пороговой величины раздражения сразу вслед за побежкой кролики начинают производить удары задними лапами по полу. На самопишущем приборе регистрируют число ударов лапами при удвоенной величине пороговой силы раздражения,. Производят 10 последовательных раздражений с интервалом

3 мин. Затем внутрибрюшинно вводят кортизол в дозе 10 мг/кг, разведенный в 1 мл физиологического раствора.

Через 5 мин после этого наносят еще

10 раздражений с той же силой и интервалами как и в контроле.

На основании результатов исг |тания с:.роят два графика динамики поведенческой реакции и подсчитывают достоверность различий между данными,по Х, ЛП и Т в контроле по сравнению с аналогичными параметрами пос. ле введения препарата. В приведенном примере Х для контроля равно

13,4 - 2,8 ударов, а после введения корти:Зола Х=6 7+1,3 (Р С 0,01}. Со-.

1246002

Составитель Н. Гуляева

ТехРед О.Сопко Корректор И.Эрдейи

Редактор Н.Яцола

Эаказ 3993/37 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,r..Ужгород,ул.Проектная,4 ответствующие значения для среднего времени поведенческой реакции (Т) равны 58i8 с и 34+4 с (P (0,05) .

Для латентных периодов появления первого удара вслед за окончанием по. дачи раздражения различия недостоверны (4,6+2,4 с и 4,111,2 с соответственно). Делается заключение .об активации эндогенной дофаминергической системы мозга кортизолом на основании увеличения общего числа ударов и продолжительности реакции, вызванной стимуляцией дофаминергических путей гипоталамуса.

Формула изобретения

Способ тестирования дофаминергической активности химических соединекий путем определения числа ударов задних конечностей кролика до и после введения тестируемого соединения с последующей оценкой дофаминергической активности по изменению измеряемых параметров, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью сокращения времени и повышения селективности способа, в область медиальfQ ного гипоталамуса моз :i кролика хронически вживляют электрод, проводят электрическую стимуляцию, регистрируют количество ударов задними конечностями, время продолжительности реакции после однократной стимуляции и латентный период появления

1 ударов, затем вводят тестируемое соединение и снимают те же показатели.