Способ определения липидо-белкового соотношения в липосомах (его варианты)

 

Изобретение относится к клинической биохимии. Цель изобретения ускорение и упрощение определения липидов. Определение липидов включает регистрацию интенсивности максимума полосы поглощения сложноэфирных групп и нахождение с помощью построенного для данной липидной смеси калибровочного графика концентрации липидов, Дпя определения соотношения концентраций белка и липидов липосомы из легкой воды переводят в тяжелую воду. При центрифугировании отделяют липосомы. После обмывки липосомы помещают в одну кювету , а раствор, который применяют для последней , помещают в кювету сравнения. Затем регистрируют -( ИК-спектр в области 1600-1800 см с fB По интенсивности полос поглощения .гемоглобина и лецитина и соответст (Л вующим калибровочным графиком находят количество гемоглобина и лецитина в суспензии липосом, а также их соотйошение. 2 с.п. ф-лы.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ .СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (Ш (51)4 G 01 Н 33/48

А1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCKOIVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Lilt ь. 1 1::

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3673566/28-14 (22) 16.12.83 (46) 07.11.86. Бюл. М 4Г (71) Центральный научно-исследовательский институт гематологии и пе реливания крови (72) E. С. Шурхина, М. Г. Вашкевич и Г. Н. Кольцова (53) 616.07(088.8) (56) Украинский биохимический журнал, 54, 1982, 11 1, с. 66-68. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИПИДО-БЕЛКОВОГО СООТНОШЕНИЯ В ЛИПОСОМАХ (ЕГО

ВАРИАНТЫ ) (57) Изобретение относится к клинической биохимии. Цель изобретения— ускорение и упрощение определения липидов. Определение липидов включает регистрацию интенсивности максимума полосы поглощения сложноэАирных групп и нахождение с помощью построенного для данной липидной смеси калибровочного графика концентрации липидов. Для определения соотношения концентраций белка и липидов липосомы из легкой воды переводят в тяжелую воду. При центрифугировании отделяют липосомы. После об" мывки липосомы помещают в одну кювету, а раствор, который применяют для последней QTMblBKH> помещают в кювету сравнения. Затем регистрируют

ИК-спектр в области 1600-1800 см

По интенсивности полос поглощения гемоглобина и лецитина и соответст" вующим калибровочным графиком находят количество гемоглобина и лецитина в суспензии липосом, а также их соотНошение. 2 с.п. ф-лы.

1269и2п

778 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской биохимии.

Цель изобретения — ускорение и упрощение определения липидов при одновременном определении белков за 5 счет регистрации спектра поглощения образца в тонкослойной флуоритовой кювете в области 1700-1800 см или же за счет предварительной обработки.липосом солевым раствором тяжелой воды и регистрации ИК-спектра в та-1 кой же кювете в области 1600-1800 см, Способ осуществляют следующим образом.

Способ определения липидов и белка основан на регистрации ИК-спектра водной суспензии липосом в тонкослойных флюоритовых кюветах.

Определение липидов включает регистрацию интенсивности максимума 20 полосы поглощения сложноэфирных групп и нахождение с помощьи предварительно построенного для данной липидной смеси калибровочного графика концентрации липидов.

Количество белка определяют по формуле б

С =С 6 л л ° где С и С вЂ” концентрация белка и липидов в суспензии липосом соответственно, б соотношение концентрал ций белка и липидов в суспензии липосом.

Для определения соотношения концентраций белка и липидов липосомы из легкой воды (Н О) переводят в тяжелую воду (Д О); затем регистрируют максимумы полос поглощения белка (Амид 1) и сложноэфирных групп липидов и находят с помощью предварительно построенных для данного белка и липидной смеси калибровочных графиков соотношение концентраций белка и липидов в суспензии липосом, Пример 1. Анализируемый образец липосом помещают во флворитовую кювету толщиной 20 мкм и на инфракрасном спектрофотометре регистрируют спектр в области 1700-1900 см, ВНИИПИ 3аказ 6028/46 Тираж

ПО интенсивности нолос1)1 но!лоще1!Ин при 1730 см и калибровочному графику определяют содержание лецитина в образце (для анализа требует -.я

0,02 мкл суспензии)., Пример 2, Суспензии липосом помещают в ценгрифужнуи пробирку, куда прибавляит 5 мл 0,97-ного раствора ПаС1 в /<0. Пробирку закрывают резиновой пробкой, ее содержимое тщательно перемешивают, а затем с помощью центрифугирования отделяит липосомы (при 600-700 достаточно центрифугирования в течение 10 мин). После трехкратной отмывки гемосомы помещают во флюоритовую кювету толщиной 100 мкм, а раствор, применяющийся для последней отмывки — в кювету сравнения, Затем регистрируит ИК-( спектр в области 1600-! 800 см и по . интенсивностям полос поглощения гемоглобина (1650 см ) и лецитина (1730 см ) и соответствующим калибровочным графикам находят количества гемоглобина и лецитина в суспензии липосом в Д О, а также их соотношеЪ ние.

Формула изобретения! . Способ .определения липидо-белкового соотношения я липосомах путем исследования их водной суспензии методом ИК-спектроскопии, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа при определении липидов, ИК-спектр реристрируют в тонкослойной флиоритовой. кювете в области 1700-1800 см

2. Способ определения липидо-белкового соотношения в липосомах путем исследования их водной суспензии ме— тодом ИК-спектроскопии, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения определения липидов при одновременном определении белков, водную суспензию липосом предварительно обрабачъ вают солевым раствором тяжелой води, далее регистрируют ИК-спектр в тонкослойной флюоритовой кювете в области 16001800 см